G003762

HPLCによる尿中のピロキシカムおよび2-アミノピリジンの分析、Discovery^® HS F5、SPE処理、Discovery^® DSC-MCAX使用

application for SPE, application for HPLC

特性

• テクニック: HPLC: suitable; solid phase extraction (SPE): suitable
• 試験パラメータ: sample preparation: SPE (Solid Phase Extraction); sample/matrix: human urine spiked with piroxicam (4 μg/mL) and 2-aminopyridine (10 μg/mL); SPE tube/cartridge: Discovery DSC-MCAX, 100 mg/3 mL (52783-U); condition: 1 mL methanol; 1 mL 10 mM potassium phosphate, pH 3; sample addition: 1 mL; washing: 1 mL 10 mM potassium phosphate, pH 3; 1 mL methanol; elution: 1 mL 5% ammonium hydroxide in methanol; eluate post-treatment: evaporate to dryness with nitrogen at room temperature, reconstitute in 1 mL mobile phase; column: Discovery HS F5, 15 cm x 4.6 mm I.D., 5 μm particles (567516-U); mobile phase: [A] 10 mM potassium phosphate, pH 6: [B] acetonitrile (85:15, A:B); flow rate: 2 mL/min; column temp.: 25 °C; detector: UV, 220 nm; injection: 10 μL
• 適合性: application for HPLC; application for SPE
• アプリケーション: clinical

詳細

アプリケーション

サンプルの前処理:
ピロキシカムと2-アミノピリジン(ピロキシカムの極性代謝物)を、ヒト尿にそれぞれ4 μg/mL、10 μg/mL加えました。その尿サンプルを、pH 3、10 mMのリン酸カリウムで1:1に希釈しました。

条件 SPEチューブ(メタノール1 mL、10 mM リン酸カリウム1 mL、pH 3)
ロード 希釈混入された尿サンプル1 mL
洗浄 10 mMリン酸カリウム1 mL、pH 3、メタノール1 mL
溶出 5%水酸化アンモニウム入りメタノール1 mL
エバポレート N₂乾燥、室温
再構成 LC移動相1 mL

2つの競合するウェイト/ハードウェアディメンション当量ベッドの混合モード陽イオン交換相を用いて、上記手法を繰り返してください。

法的情報

Discovery is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany