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Merck

CLL1143

Sigma-Aldrich

SKOV3細胞GFP-HER2 RFP-EGFR

human female ovary (Source Disease: Ovarian adenocarcinoma)

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About This Item

UNSPSCコード:
41106514
NACRES:
NA.81

product name

SKOV3細胞GFP-HER2 RFP-EGFR,

由来生物

human female ovary (Source Disease: Ovarian adenocarcinoma)

OMIMアクセッション番号

保管温度

−196°C

遺伝子情報

詳細

SKOV3 GFP-HER2 RFP-EGFRは64歳のヒト白人女性の卵巣腺癌細胞であり、両方とも対応する内因性遺伝子座から発現されるHER2-GFP導入遺伝子およびEGFR-RFP導入遺伝子を作製するZFN修飾を有しています。

この細胞株は、ATCCカタログ番号HTB-77に由来します。

アプリケーション

ゲノムHER2遺伝子が緑色蛍光タンパク質(GFP)遺伝子で、また、ゲノムEGFR遺伝子が赤色蛍光タンパク質(RFP)遺伝子で、CompoZrジンクフィンガーヌクレアーゼ(CompoZr® Zinc Finger Nuclease)技術を用いて内因性にタグ標識されたヒトSKOV3細胞株です。組み込まれると、GFPがHER2のC末端に結合している融合タンパク質およびRFPがEGFRのC末端に結合している融合タンパク質が内因性に発現します。蛍光イメージングでは、特徴的なHER2およびEGFR膜の発現が示されます。EGFを添加すると、細胞株の細胞膜からエンドソームへのEGFRの再分布が示されるので、これは化合物のハイコンテントスクリーニングに役立ちます。たとえば、再分布は、EGFRの選択的阻害剤であるチルホスチンAG 1478によって廃止することができます。この安定な細胞株は単一クローンから増殖させたものです。ターゲットの遺伝子調節および対応するタンパク質機能は、外因性プロモーターを介した過剰発現を伴う細胞株とは対照的に保持されます。

特徴および利点

ジンクフィンガーヌクレアーゼ(ZFN)の媒介により、染色体17q21.1にあるHER2遺伝子の最後のコーディングエクソンを標的とした蛍光GFP標識ならびに染色体7p11.2にあるEGFR遺伝子の最後のコーディングエクソンを標的としたRFP標識を統合させることにより、タンパク質のC末端でそれぞれ対応する蛍光レポーターで標識された双方の導入遺伝子の安定した発現を示す細胞株を作製できます。

これらのSKOV3細胞は接着性で、倍加時間は約48時間です。

品質

マイコプラズマ、無菌性、凍結後生存度、細胞株識別のための短末端反復(STR)分析、細胞株種確認のためのシトクロムオキシダーゼI(COI)分析により、検査されています。

調製ノート

培地交換は1週間に2、3回です。

バイアルの蓋を水に浸さないようにして、37°Cのウォーターバスで穏やかに撹拌(約2分)して、バイアルを速やかに解凍してください。70%エタノールで除染し、9 mLの培養液を加え、125 x gで遠心分離します(5~7分)。 完全培地に再懸濁し、37°C、5%CO2雰囲気でインキュベートしてください。

継代培養比:1:3~1:6

この細胞株の基本培地は、McCoy′s 5A(マッコイ5A)培地、カタログ番号M8403。完全な増殖培地を作製するために、基本培地に以下の成分を添加します:ウシ胎児血清、カタログ番号F2442を最終濃度(v/v)10%、およびL-グルタミン、カタログ番号G7513を最終濃度1.5 mMとします。

細胞凍結用培地DMSO 1X、カタログ番号C6164

法的情報

CompoZr is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

免責事項

研究用途に限ります。輸出入を含む科学目的の使用を意図するとき、この製品はフランスで規制されています(公衆衛生法典L第1211-1条2)。購入者(すなわち最終使用者)は、フランス研究省から公衆衛生法典L第1245-5-1 II.の輸入許可を取得する必要があります。本製品を発注することで、あなたは適切な輸入許可を取得したことを確認します。

保管分類コード

10 - Combustible liquids

WGK

WGK 3

引火点(°F)

188.6 °F - closed cup

引火点(℃)

87 °C - closed cup


適用法令

試験研究用途を考慮した関連法令を主に挙げております。化学物質以外については、一部の情報のみ提供しています。 製品を安全かつ合法的に使用することは、使用者の義務です。最新情報により修正される場合があります。WEBの反映には時間を要することがあるため、適宜SDSをご参照ください。

労働安全衛生法名称等を表示すべき危険物及び有害物

名称等を表示すべき危険物及び有害物

労働安全衛生法名称等を通知すべき危険物及び有害物

名称等を通知すべき危険物及び有害物

Jan Code

CLL1143-1VL:


試験成績書(COA)

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Sebastian Strauss et al.
Nature methods, 17(8), 789-791 (2020-07-01)
DNA-PAINT's imaging speed has recently been significantly enhanced by optimized sequence design and buffer conditions. However, this implementation has not reached an ultimate speed limit and is only applicable to imaging of single targets. To further improve acquisition speed, we

ライフサイエンス、有機合成、材料科学、クロマトグラフィー、分析など、あらゆる分野の研究に経験のあるメンバーがおります。.

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