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詳細
CRISPR関連エンドヌクレアーゼCas9/Csn1（UniProt：Q99ZW2、別名：SpyCas9）は、Streptococcus pyogenes血清型M1遺伝子cas9（Gene ID：901176）によってコードされています。CRISPR（Clustered regularly interspaced short palindromic repeats）とは、先行する可動性配列と相補的な塩基配列の短い反復を含むDNA遺伝子座であり、侵入する核酸を標的とします。各繰り返しの後には、過去のウイルスばく露によるスペーサーDNAの短いセグメントが続きます。Cas9は、Streptococcus pyogenesの血清型M1のCRISPR免疫系に不可欠なエンドヌクレアーゼであり、プラスミドやファージなどの外来遺伝子配列に対して耐性を付与します。CRISPRクラスターは転写され、さらに処理されてCRISPR RNA（crRNA）になります。II型CRISPR系でpre-crRNAを正しく処理するには、トランスコードされた低分子RNA（tracrRNA）、内因性リボヌクレアーゼ3（rnc）およびCas9が必要です。Cas9/crRNA/tracrRNAは、スペーサーに相補的な直鎖状または環状dsDNA標的を、エンドヌクレアーゼ的に切断します。crRNAに相補的ではない標的鎖は、まずエンドヌクレアーゼ的に切断され、さらに3′-5′エキソヌクレアーゼ的にトリミングされます。
特異性
クローン10C11-A12は、Cas9のC末端に位置するエピトープを認識します。
免疫原
Hisタグ付きリコンビナント S.pyogenes Cas9のC末端フラグメント。
アプリケーション
免疫細胞染色：33.5 µg/mLで使用、外因的にトランスフェクトしたS. pyogenes Cas9コンストラクトのドキシサイクリン誘導発現が検出されました。これは、メタノール固定、アセトン安定化したHeLaトランスフェクタントの蛍光免疫細胞染色により、PTight（Tet-ON）プロモーターの制御下で行われました（Dr. Stefan Schuechner and Dr. Egon Ogris, Medical University of Vienna, Austria、厚意による提供）。
免疫沈降：13.4 µg/mLで使用、250 µgのトランスフェクトしたHeLa細胞ライセートで外因的に発現させたCas9を検出しましたが、トランスフェクトしていないライセートでは検出されませんでした（Dr. Stefan Schuechner and Dr. Egon Ogris, Medical University of Vienna, Austria、厚意による提供）。
ウェスタンブロッティング：1.675 µg/mLで使用、20 µgのトランスフェクトしたHeLa細胞ライセートで外因的に発現させたCas9を検出しましたが、トランスフェクトしていないライセートでは検出されませんでした（Dr. Stefan Schuechner and Dr. Egon Ogris, Medical University of Vienna, Austria、厚意による提供）。
ウェスタンブロッティング：クローン10C11-A12ハイブリドーマの培養上清は、HeLa由来のTet-ON細胞株におけるPTightの制御下で、FLAGタグ付きCas9コンストラクトのドキシサイクリン処理誘導性の発現を検出しました（Dr. Stefan Schuechner and Dr. Egon Ogris, Medical University of Vienna, Austria、厚意による提供）。
免疫沈降：13.4 µg/mLで使用、250 µgのトランスフェクトしたHeLa細胞ライセートで外因的に発現させたCas9を検出しましたが、トランスフェクトしていないライセートでは検出されませんでした（Dr. Stefan Schuechner and Dr. Egon Ogris, Medical University of Vienna, Austria、厚意による提供）。
ウェスタンブロッティング：1.675 µg/mLで使用、20 µgのトランスフェクトしたHeLa細胞ライセートで外因的に発現させたCas9を検出しましたが、トランスフェクトしていないライセートでは検出されませんでした（Dr. Stefan Schuechner and Dr. Egon Ogris, Medical University of Vienna, Austria、厚意による提供）。
ウェスタンブロッティング：クローン10C11-A12ハイブリドーマの培養上清は、HeLa由来のTet-ON細胞株におけるPTightの制御下で、FLAGタグ付きCas9コンストラクトのドキシサイクリン処理誘導性の発現を検出しました（Dr. Stefan Schuechner and Dr. Egon Ogris, Medical University of Vienna, Austria、厚意による提供）。
抗Cas9抗体、C末端、クローン10C11-A12はCas9に対する抗体で、免疫細胞染色、免疫沈降およびウェスタンブロッティングで使用できます。
品質
Cas9をトランスフェクトしたHeLa細胞ライセートでウェスタンブロッティングにより評価されています。
ウェスタンブロッティング：0.5 µg/mLで使用、10 µgのトランスフェクトしたHeLa細胞ライセート外因的に発現するCas9を検出できます。
ウェスタンブロッティング：0.5 µg/mLで使用、10 µgのトランスフェクトしたHeLa細胞ライセート外因的に発現するCas9を検出できます。
ターゲットの説明
実測値：約158 kDa算出値：158.4 kDa
物理的形状
フォーマット：精製
その他情報
濃度：ロットに固有のデータシートを参照してください。
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保管分類コード
12 - Non Combustible Liquids
WGK
WGK 1
引火点(°F)
Not applicable
引火点(℃)
Not applicable
適用法令
試験研究用途を考慮した関連法令を主に挙げております。化学物質以外については、一部の情報のみ提供しています。 製品を安全かつ合法的に使用することは、使用者の義務です。最新情報により修正される場合があります。WEBの反映には時間を要することがあるため、適宜SDSをご参照ください。
Jan Code
MABS1291:
試験成績書（COA）
製品のロット番号・バッチ番号を入力して、試験成績書（COA） を検索できます。ロット番号・バッチ番号は、製品ラベルに「Lot」または「Batch」に続いて記載されています。
ライフサイエンス、有機合成、材料科学、クロマトグラフィー、分析など、あらゆる分野の研究に経験のあるメンバーがおります。.
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