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Merck

MAB351

Sigma-Aldrich

抗グルタミン酸デカルボキシラーゼ抗体、65 kDaアイソフォーム、クローンGAD-6

clone GAD-6, Chemicon®, from mouse

別名:

GAD65

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About This Item

UNSPSCコード:
12352203
eCl@ss:
32160702
NACRES:
NA.41

由来生物

mouse

品質水準

抗体製品の状態

purified immunoglobulin

抗体製品タイプ

primary antibodies

クローン

GAD-6, monoclonal

化学種の反応性

rat, human

メーカー/製品名

Chemicon®

テクニック

immunohistochemistry: suitable
western blot: suitable

アイソタイプ

IgG2a

NCBIアクセッション番号

UniProtアクセッション番号

輸送温度

dry ice

ターゲットの翻訳後修飾

unmodified

遺伝子情報

human ... GAD2(2572)

詳細

グルタミン酸脱炭酸酵素(GAD、E.C.4.1.1.15)は、グルタミン酸をγ-アミノ酪酸(GABA)に変換する酵素で、高次脳領域の主要な抑制性伝達物質であり、膵島では傍分泌ホルモンとしてはたらくことが推定されています。GADの2つの分子型(65 kDaと67 kDa、お互いのaa同一性は64%)は高度に保存されており、いずれの型も、CNS、膵島細胞、精巣、卵管、卵巣で発現しています。これらのアイソフォームは、ラットやマウスの脳内の細胞質中に局在化して存在しています(Sheikh, S. et al. 1999)。GAD65は、ヒト第10番染色体上でコードされる両親媒性の膜アンカータンパク質(585a.a.)であり、小胞性GABAの産生を担っています。GAD67は細胞質に存在し(594 a.a.)、第2染色体上にコードされ、重要な細胞質GABAの産生を担っていると考えられています。GADの発現は、ラット脊髄の神経発達中に変化します。 GAD65はE13周辺の交連軸索で一時的に発現しますが、翌日にはダウンレギュレートされます。一方、GAD67の発現は主にこれらのニューロンの細胞体で増加します(Phelps, P. et al. 1999)。成熟ラット膵臓では、GAD65とGAD67が異なる局在を示すと考えられており、GAD65は主にインスリン含有ベータ細胞に、GAD67はグルカゴン含有(A)細胞に認められます(Li, L. et al. 1995)。GAD67の発現は著しく可塑的であると考えられ、実験操作(神経刺激や切断など)や病勢進行、統合失調症などの疾患の出現に反応して変化する可能性があります(Volk et al., 2000)。 2つのGADアイソフォームの共局在は、IDDMやSMSなどの特定の病態に関連したGAD65/GAD67の分布の変化も示しています。

特異性

脳で特定されている2つのGADアイソフォームのうち、分子量が低い方のアイソフォームを認識します(Gottlieb, et al., 1986; Chang & Gottlieb, 1988)。このモノクローナル抗体は、脳または膵臓の免疫組織化学的局在に使用できます。抗GADは、ウエスタンブロッティングでの精製GADの標識にも使用されています(Chang & Gottlieb, 1988)。

免疫原

精製ラット脳グルタミン酸デカルボキシラーゼ。

アプリケーション

免疫組織染色:(1 μg/mL *プロトコルを参照)

ウェスタンブロッティング

最適な希釈濃度は、ご自身で決定してください。

MAB351のアプリケーションノート

免疫組織染色

1) 1%パラホルムアルデヒド、0.34% L-リジン、および0.05% m-過ヨウ素(1% PLP)を含有する100 mMリン酸緩衝液(pH 7.4)でラットを灌流します。

2) 1% PLPで1~2時間、脳を後固定します。

3) 30%スクロースを含有する100 mMリン酸緩衝液に脳を移し、シェーカープラットフォームに載せて+4°Cで48~60時間、ゆっくり撹拌します。

4) 滑走式ミクロトームを用いて、凍結小脳の30 mm切片を切り出します。切り出した切片は、冷却した100 mMリン酸緩衝液のバイアルに収集してください。

5) 1.5%正常血清および0.2% Triton X-100を含有するPBS中で、切片を30分間培養します。

6) シェーカープラットフォーム上で、MAB351(1.5%正常血清および0.2% Triton X-100を含有するPBSで1 μg/mLに希釈)により切片を+4°Cで12~36時間培養します。

7) シェーカープラットフォーム上で、切片をPBS中で8回洗浄します。洗浄時間は1回あたり10~15分としてください。

8) 標準的な二次抗体検出システム(PAP、ABC、など)を用いて検出します。

9) 切片をマウントし、脱水させ、カバースリップで覆います。
抗GAD抗体。65 kDaアイソフォーム、クローンGAD-6は、グルタミン酸デカルボキシラーゼのレベルを検出します。また、IH、WBでの使用が文献発表され、検証されています
研究のカテゴリ
神経科学
研究のサブカテゴリ
神経伝達物質および受容体

ターゲットの説明

65 kDa

物理的形状

フォーマット:精製
精製プロテインA
精製免疫グロブリン。 10 mMリン酸カリウム、70 mM塩化ナトリウム、pH 7.4、0.02%アジ化ナトリウムから凍結乾燥されています。100 μLの無菌水で溶解してください(1 mg/mL)。

保管および安定性

凍結乾燥した製品は、-20°Cで最長12か月保存できます。溶解後は、未希釈アリコートで-20°Cで最長6か月冷凍保存できます。凍結・融解サイクルの繰り返しは避けてください。

アナリシスノート

コントロール
ラット脳組織

ヒト脳ライセート

その他情報

濃度:ロットに固有の濃度につきましては試験成績書をご参照ください。

法的情報

CHEMICON is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

免責事項

メルクのカタログまたは製品に添付されたメルクのその他の文書に記載されていない場合、メルクの製品は研究用途のみを目的としているため、他のいかなる目的にも使用することはできません。このような目的としては、未承認の商業用途、in vitroの診断用途、ex vivoあるいはin vivoの治療用途、またはヒトあるいは動物へのあらゆる種類の消費あるいは適用などがありますが、これらに限定されません。

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ピクトグラム

Exclamation mark

シグナルワード

Warning

危険有害性情報

危険有害性の分類

Acute Tox. 4 Dermal - Acute Tox. 4 Inhalation - Acute Tox. 4 Oral - Aquatic Chronic 3

保管分類コード

13 - Non Combustible Solids

WGK

WGK 3

引火点(°F)

Not applicable

引火点(℃)

Not applicable


適用法令

試験研究用途を考慮した関連法令を主に挙げております。化学物質以外については、一部の情報のみ提供しています。 製品を安全かつ合法的に使用することは、使用者の義務です。最新情報により修正される場合があります。WEBの反映には時間を要することがあるため、適宜SDSをご参照ください。

毒物及び劇物取締法

毒物

労働安全衛生法名称等を表示すべき危険物及び有害物

名称等を表示すべき危険物及び有害物

労働安全衛生法名称等を通知すべき危険物及び有害物

名称等を通知すべき危険物及び有害物

Jan Code

MAB351:


試験成績書(COA)

製品のロット番号・バッチ番号を入力して、試験成績書(COA) を検索できます。ロット番号・バッチ番号は、製品ラベルに「Lot」または「Batch」に続いて記載されています。

以前この製品を購入いただいたことがある場合

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文書ライブラリにアクセスする

Differential activation of neuronal cell types in the basolateral amygdala by corticotropin releasing factor.
Rostkowski, AB; Leitermann, RJ; Urban, JH
Neuropeptides null
Synaptic reorganisation of the medial amygdala during puberty.
Cooke BM
Journal of Neuroendocrinology null
Thalamocortical dysfunction and thalamic injury after asphyxial cardiac arrest in developing rats.
Shoykhet, M; Simons, DJ; Alexander, H; Hosler, C; Kochanek, PM; Clark, RS
The Journal of Neuroscience null
Quantitative effects produced by modifications of neuronal activity on the size of GABAA receptor clusters in hippocampal slice cultures.
Serge Marty, Rosine Wehrle, Jean-Marc Fritschy, Constantino Sotelo
The European Journal of Neuroscience null
Quantitative analysis of ER alpha and GAD colocalization in the hippocampus of the adult female rat.
S A Hart, J D Patton, C S Woolley, S A Hart, J D Patton, C S Woolley
The Journal of Comparative Neurology null

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