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Merck

FSUPMMRO

Roche

FastStart Universal Probe Master (Rox)

sufficient for 250 reactions, sufficient for 1250 reactions, sufficient for 5000 reactions, suitable for qPCR, suitable for RT-qPCR

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About This Item

UNSPSCコード:
41106300
NACRES:
NA.55

使用法

sufficient for 1250 reactions
sufficient for 250 reactions
sufficient for 5000 reactions

品質水準

特徴

dNTPs included: no
hotstart

メーカー/製品名

Roche

包装

pkg of 1250 x 20 μL reactions (04913957001)
pkg of 250 x 20 μL reactions (04913949001)
pkg of 5000 x 20 μL reactions (04914058001)

テクニック

RT-qPCR: suitable
qPCR: suitable

入力

purified DNA

検出方法

probe-based

詳細

すべてのリアルタイムPCRシステム上で、qPCRおよびRT-qPCR用のすぐに使えるユニバーサルホットスタート反応混合液では、ROXを用いた正規化が必要です。

FastStart Universal Probe Master(Rox)には新規のリファレンス色素が含まれており、この色素のために本製品をすべてのリアルタイムPCR装置で使用することができます。本製品ではROXを用いた正規化が必要ですが、特定の装置またはプロトコルに対する変更または調節は不要です。この、すぐに使える2倍濃縮マスター混合液には、qPCRおよび2段階qPCRを含む、SYBR Green I検出法で行う定量的なリアルタイムDNA検出アッセイを実行するのに必要な、すべての試薬 (ただし、プライマー、プローブ、および鋳型を除きます) が含まれています。FastStart Universal Probe Master(Rox)を用いると、Applied Biosystems 7900 HT Fast Real-Time PCR SystemやApplied Biosystems 7500 Real-Time PCR Systemなどの装置を用いた実験で、優れた結果が得られます。この製品は、LightCycler®機器での使用を意図していません。
ホットスタート産物では、特異性、感度、およびPCR収率が著しく改善されることが証明されています。FastStart Taq DNAポリメラーゼの一部のアミノ酸残基には熱不安定性のブロック基があり、室温ではこれが改変酵素を不活化します。したがって、プライマーが非特異的に結合できる間は、伸長が生じません。FastStart Taq DNAポリメラーゼは、高温(すなわち、+95℃におけるプレインキュベーション段階)でブロック基を除去することにより活性化されます。

アプリケーション

FastStart Universal Probe Master(Rox)は、下記の用途で使用されています:
  • MIR376B、MIR376A、MIR181Aなどの内在性miRNAの定量を目的とした、TaqMan®定量的リアルタイムポリメラーゼ連鎖反応(qRT-PCR)
  • 分類不能の炎症性末梢関節炎(UPIA)患者の全滑膜組織での腫瘍壊死因子(TNF)の発現分析を目的とした、逆転写ポリメラーゼ連鎖反応(RT-PCR)
  • GCまたはAT含量が多いDNA配列を含む、標的DNAまたはcDNA配列の定量的PCRによる増幅および検出
このマスター混合液とTranscriptor First Strand cDNA合成キット (ロシュ) を組み合わせることで、2段階qRT-PCRで優れた結果を得ることができます。

特徴および利点

  • qPCR感受性および特異性を増加させます。
サイクル数 (Ct) の値を低くします。

  • あらゆるプローブに基づくアッセイ法にマスター混合液を使用できます。
Universal ProbeLibrary Probesまたは他の何らかの加水分解プローブを用いるアッセイで、高い感受性と特異性のある結果が得られます。

  • 広範囲にわたるDNAまたはcDNA標的の増幅と検出を行います。
GC-またはAT-リッチなものを含めて、長さ500 bpまでの断片を増幅します。

  • アガロースゲル上の増幅産物を目視できるようにします。

  • ロボット・ピペット・ステーションを使用してqPCR反応をセットアップします。
反応セットアップ時間が長引いても室温で安定な、マスター混合液を使用します。

  • キャリーオーバー汚染によって生じる擬陽性を防止します。
このdUTPを含む混合液とウラシル-DNAグリコシラーゼ使用して、前回のPCR反応から持ち越された混入DNAを排除します。

構成

FastStart Universal Probe Master (Rox) は、FastStart Taq DNAポリメラーゼ、反応緩衝液、ヌクレオチド (dATP、dCTP、dGTP、dUTP) および基準色素を含む、2倍濃縮マスター混合液です。

品質

機能試験: ロットごとに、3種類の鋳型、すなわちGC-リッチの鋳型、AT-リッチの鋳型、および長鎖の鋳型 (約440 bp) を用いてqPCR性能についての試験が行われます。

その他情報

生命科学研究用途に限ります。診断手順に使用しないでください

法的情報

FastStart is a trademark of Roche
LightCycler is a registered trademark of Roche
TaqMan is a registered trademark of Roche Molecular Systems, Inc.

保管分類コード

12 - Non Combustible Liquids

WGK

WGK 1

引火点(°F)

does not flash

引火点(℃)

does not flash


試験成績書(COA)

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