H4034

HEPES

BioPerformance Certified, ≥99.5% (titration), suitable for cell culture

• Sinonimo/i: Acido 4-(2-idrossietil)piperazina-1-etansolfonico, N-(2-idrossietil)piperazina-N′-(acido 2-etansolfonico)
• Formula empirica (notazione di Hill): C₈H₁₈N₂O₄S
• Numero CAS: 7365-45-9
• Peso molecolare: 238.30
• Beilstein: 883043
• Numero CE: 230-907-9
• Numero MDL: MFCD00006158
• Codice UNSPSC: 12161700
• ID PubChem: 24895616
• NACRES: NA.25

Proprietà

• Grado: BioPerformance Certified
• Livello qualitativo: 400
• Saggio: ≥99.5% (titration)
• Forma fisica: crystalline powder
• Condizioni di stoccaggio: dry at room temperature
• tecniche: cell culture | mammalian: suitable; competitive inhibition ELISA: suitable
• Impurezze: endotoxin and total aerobic microbial count, tested
• Colore: white
• Intervallo di pH utile: 6.8-8.2
• pKa (25 °C): 7.5
• Cationi in tracce: Fe: ≤5 ppm
• Assorbimento: ≤0.05 at 260 in H₂O at 0.1 M; ≤0.05 at 280 in H₂O at 0.1 M
• Compatibilità: suitable for Western blot; suitable for component for culture media
• applicazioni: clinical research; diagnostic assay manufacturing; general analytical; life science and biopharma
• Attività estranea: DNase, RNase, NICKase, protease, none detected
• Stringa SMILE: OCCN1CCN(CC1)CCS(O)(=O)=O
• InChI: 1S/C8H18N2O4S/c11-7-5-9-1-3-10(4-2-9)6-8-15(12,13)14/h11H,1-8H2,(H,12,13,14); JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N

Descrizione

Descrizione generale

Il tampone HEPES non esercita azione citotossica sulle cellule e può quindi essere utilizzato nelle colture di cellule animali.

L′HEPES viene descritto come uno dei migliori tamponi universali disponibili per la ricerca in campo biologico. A pH biologici la molecola è zwitterionica; è efficace come tampone in un intervallo di pH compreso tra 6,8 e 8,2. L′HEPES trova impiego in un'ampia gamma di applicazioni, inclusa le colture di tessuti. È comunemente utilizzato per tamponare i terreni per colture cellulari esposti all′aria. L′HEPES viene impiegato in esperimenti in vitro sul Mg.

L′HEPES, o acido 4-(2-idrossietil)piperazin-1-etansolfonico, è un acido amminosolfonico N-sostituito zwitterionico con capacità tampone. Dà prova di un′eccezionale capacità tampone nell′intervallo di pH tra 6,8 e 8,2, potendo vantare una pKa di 7,48 a 25 °C. Universalmente riconosciuto come uno dei tamponi più versatili, l′HEPES viene utilizzato diffusamente nella ricerca in biologia cellulare, biochimica e biologia. Una caratteristica di rilievo consiste nella mancanza di reattività nei confronti degli ioni metallici. A differenza di molti altri tamponi, l′HEPES non forma complessi di rilievo con la maggior parte dei metalli: ciò ne fa un′ottima scelta per quelle applicazioni in cui sono presenti ioni metallici, con la cui attività l′HEPES non interferisce. Questa peculiarità lo rende particolarmente utile come “tampone non coordinante” (non-coordinating buffer). Nelle colture cellulari, l′HEPES è particolarmente efficace nel mantenere stabile il pH fisiologico, a dispetto delle variazioni nella concentrazione di diossido di carbonio determinate dalla respirazione cellulare. Ciò lo distingue dai tamponi bicarbonato (NaHCO3) i quali, benché comunemente utilizzati, sono meno efficaci nel mantenere stabilità del pH

L′HEPES si dimostra altresì una scelta più vantaggiosa in vari processi biologici e biochimici. La sua natura di elettrolita anfotero (anfolito) lo rende idoneo come separatore per la generazione di gradienti di pH nella focalizzazione isoelettrica, una tecnica impiegata spesso per la separazione e l′analisi delle proteine. In più, se confrontato con tamponi con un numero minore di gruppi amminici sostituiti, come il Tris, l′HEPES interferisce con le reazioni enzimatiche di restrizione del DNA in misura molto ridotta. Questo fa dell′HEPES la scelta d′elezione per quelle applicazioni che comportano la manipolazione e l′analisi del DNA. Oltre a queste specifiche applicazioni, l′HEPES si dimostra una valida scelta in numerosi altri procedimenti biologici e biochimici, tra cui l′immunoprecipitazione, la lisi cellulare e l′imaging cellulare dal vivo. La sua versatilità, abbinata alla sua eccezionale capacità tamponante e alle ridotte interazioni con altre molecole, fa di HEPES uno strumento indispensabile in svariate aree di ricerca.

Applicazioni

L′ HEPES viene utilizzato:

• per integrare il terreno DMEM (Eagle modificato da Dulbecco) per la coltura e il mantenimento delle linee cellulari.
• come componente del buffer di risospensione delle piastrine
• come supplemento nella soluzione salina basica di Hank, utilizzata per il lavaggio del tessuto pancreatico
• come componente del tampone di lavaggio e del tampone di bloccaggio nella purificazione e quantificazione delle proteine con saggio di immunoassorbimento enzimatico (ELISA)
• per la regolazione e il mantenimento del pH di soluzioni biologiche
• come componente della soluzione salina bilanciata di Hank (HBSS) e come terreno di dissociazione negli studi di sviluppo neuronale
• per omogenare i tessuti e nella preparazione di estratti citosolici e nucleari dalle cellule
• come componente di terreni per la coltura di cheratinociti e fibroblasti

Caratteristiche e vantaggi

• Sottoposto a test che ne confermano i bassi livelli di contaminazione da metalli pesanti, garantendone l′idoneità ad un ampio ventaglio di applicazioni
• Altamente solubile in acqua, con intervallo utile di pH da 6,8 a 8,2 e pKa di 7,5 a 25 °C
• Legame con ioni metallici trascurabile
• Meno tossico per le cellule rispetto ad altri tamponi, quali il Tris e il tampone fosfato
• Stabile in un ampio intervallo di pH
• Sottoposto a ricerca di endotossine e a conteggio totale di microrganismi aerobi
• Privo di DNasi, RNasi, nickasi, endonucleasi, esonucleasi e proteasi

Altre note

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Informazioni sulla sicurezza

• Codice della classe di stoccaggio: 11 - Combustible Solids
• Classe di pericolosità dell'acqua (WGK): WGK 1
• Punto d’infiammabilità (°F): Not applicable
• Punto d’infiammabilità (°C): Not applicable
• Dispositivi di protezione individuale: Eyeshields, Gloves, type N95 (US)