A1978
Anticorpo anti-β-actina monoclonale murino
clone AC-15, purified from hybridoma cell culture
Sinonimo/i:
Anti-β-actina monoclonale
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About This Item
Codice UNSPSC:
12352203
NACRES:
NA.41
Prodotti consigliati
Origine biologica
mouse
Livello qualitativo
Coniugato
unconjugated
Forma dell’anticorpo
purified immunoglobulin
Tipo di anticorpo
primary antibodies
Clone
AC-15, monoclonal
Forma fisica
buffered aqueous solution
PM
antigen 42 kDa
Reattività contro le specie
sheep, carp, feline, chicken, rat, mouse, Hirudo medicinalis, rabbit, canine, pig, human, bovine, guinea pig
Non deve reagire con
Dictyostelium discoideum
tecniche
immunocytochemistry: 10-40 μg/mL using human foreskin fibroblasts
immunohistochemistry (frozen sections): suitable
indirect immunofluorescence: suitable
microarray: suitable
western blot: 0.5-1 μg/mL using cell extract of human foreskin fibroblasts or chicken fibroblasts.
Isotipo
IgG1
N° accesso UniProt
applicazioni
research pathology
Condizioni di spedizione
dry ice
Temperatura di conservazione
−20°C
modifica post-traduzionali bersaglio
unmodified
Informazioni sul gene
human ... ACTB(60)
mouse ... Actb(11461)
rat ... Actb(81822)
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Descrizione generale
Il gene ACTB (β-actina) è mappato nel cromosoma umano 7p22.1. La β-actina è la proteina più abbondante tra quelle presenti nel nel citoplasma. L′ACTB è espressa diffusamente. L′actina è una delle proteine eucariotiche più conservate ed è espressa nei mammiferi e negli uccelli. Quattro isoforme di actina sono marcatori di differenziazione dei tessuti muscolari, mentre le altre due sono presenti in quasi tutte le cellule. L′anticorpo anti-β-actina monoclonale murino (isotipo IgG1 murino) è derivato dall′ibridoma AC-15 prodotto dalla fusione di cellule di mieloma murino e splenociti di topi BALB/c immunizzati con un peptide N-terminale sintetico lievemente modificato della beta-actina citoplasmatica Ac-Asp-Asp-Asp-Ile-Ala-Ala-Leu-Val-Ile-Asp-Asn-Gly-Ser-Gly-Lys, coniugato con KLH.
Nella colorazione delle criosezioni di tessuti ultrasottili di ventrigli di pollo, l′anticorpo marca i corpi densi, i canali longitudinali che collegano i corpi densi consecutivi (che sono occupati anche dalla desmina) e la placca densa associata alla membrana. Non colora i muscoli cardiaci e scheletrici adulti, si può osservare una lieve colorazione dovuta a contaminazioni del campione con cellule non muscolari o nel caso venga utilizzato tessuto embrionale.
Nella colorazione delle criosezioni di tessuti ultrasottili di ventrigli di pollo, l′anticorpo marca i corpi densi, i canali longitudinali che collegano i corpi densi consecutivi (che sono occupati anche dalla desmina) e la placca densa associata alla membrana. Non colora i muscoli cardiaci e scheletrici adulti, si può osservare una lieve colorazione dovuta a contaminazioni del campione con cellule non muscolari o nel caso venga utilizzato tessuto embrionale.
Nella colorazione delle criosezioni di tessuti ultrasottili di ventrigli di pollo, l′anticorpo marca i corpi densi, i canali longitudinali che collegano i corpi densi consecutivi che sono occupati anche dalla desmina, e la placca densa associata alla membrana. Non colora i muscoli cardiaci e scheletrici adulti, tranne che per alcune tracce che sono dovute alla contaminazione del campione con cellule non muscolari o che possono comparire se si utilizzano tessuti embrionali.
Specificità
L′anticorpo anti-β-actina monoclonale murino 1, 2 riconosce un epitopo situato sull′estremità N-terminale dell′isoforma β dell′actina.
Immunogeno
peptide N-terminale lievemente modificato della β-actina citoplasmatica, Ac-Asp-Asp-Asp-Ile-Ala-Ala-Leu-Val-Ile-Asp-Asn-Gly-Ser-Gly-Lys, coniugato a KLH.
Applicazioni
Le actine presenti in cellule provenienti da varie specie e tessuti presentano proprietà immunologiche e fisiche molto simili. Di conseguenza, non è stato facile produrre antisieri potenti contro questa proteina. Pertanto, la disponibilità di anticorpi monoclonali contro la β-actina rappresenta uno strumento utile e specifico per lo studio della distribuzione intracellulare della -actina e degli aspetti statici e dinamici del citoscheletro.
L′anticorpo anti-beta-actina monoclonale può essere utilizzato per analisi di microarray, analisi con immunofluorescenza indiretta e analisi immunoistochimiche. È stato inoltre adoperato per analisi immunocitochimiche a 10-40 μg/mL con fibroblasti di prepuzio umano. L′anticorpo è stato utilizzato anche per analisi con metodica Western blot a 0,5-1 μg/mL con un estratto cellulare di fibroblasti di prepuzio umano o fibroblasti di pollo.
Può essere adoperato per colorare sezioni congelate fissate in acetone, preparati per microscopio elettronico ed esperimenti con microiniezioni. Come fissativi, si possono utilizzare anche B5, methacarn, etanolo o soluzione di Bouin. L′epitopo riconosciuto dall′anticorpo è resistente alla fissazione in formalina e all′inclusione in paraffina.
È stato adoperato nell′immunofissazione.
L′anticorpo anti-beta-actina monoclonale può essere utilizzato per analisi di microarray, analisi con immunofluorescenza indiretta e analisi immunoistochimiche. È stato inoltre adoperato per analisi immunocitochimiche a 10-40 μg/mL con fibroblasti di prepuzio umano. L′anticorpo è stato utilizzato anche per analisi con metodica Western blot a 0,5-1 μg/mL con un estratto cellulare di fibroblasti di prepuzio umano o fibroblasti di pollo.
Può essere adoperato per colorare sezioni congelate fissate in acetone, preparati per microscopio elettronico ed esperimenti con microiniezioni. Come fissativi, si possono utilizzare anche B5, methacarn, etanolo o soluzione di Bouin. L′epitopo riconosciuto dall′anticorpo è resistente alla fissazione in formalina e all′inclusione in paraffina.
È stato adoperato nell′immunofissazione.
L′anti-actina murina monoclonale è stata utilizzata come controllo di caricamento per l′analisi con metodica Western blot di lisati di proteine epatiche di ratto.
L′anticorpo anti-actina murino monoclonale è stato utilizzato come controllo di caricamento per l′analisi con metodica Western blot di proteine immunoprecipitate da co-colture di gangli della radice dorsale di ratto.
L′anticorpo anti-beta-actina monoclonale può essere utilizzato per analisi di microarray, analisi con immunofluorescenza indiretta e analisi immunoistochimiche. È stato inoltre adoperato per analisi immunocitochimiche a 10-40 μg/mL con fibroblasti di prepuzio umano. L′anticorpo è stato utilizzato anche per analisi con metodica Western blot a 0,5-1 μg/mL con un estratto cellulare di fibroblasti di prepuzio umano o fibroblasti di pollo.
Può essere adoperato per colorare sezioni congelate fissate in acetone, preparati per microscopio elettronico ed esperimenti con microiniezioni. Si possono utilizzare come fissativi la soluzione B5 o le soluzioni di etanolo, di metacam o di Bouin. L′epitopo riconosciuto dall′anticorpo è resistente alla fissazione in formalina e all′inclusione in paraffina.
Può essere adoperato per colorare sezioni congelate fissate in acetone, preparati per microscopio elettronico ed esperimenti con microiniezioni. Si possono utilizzare come fissativi la soluzione B5 o le soluzioni di etanolo, di metacam o di Bouin. L′epitopo riconosciuto dall′anticorpo è resistente alla fissazione in formalina e all′inclusione in paraffina.
Azioni biochim/fisiol
Le due principali proteine citoscheletriche coinvolte nella motilità cellulare sono l′actina e la miosina. L′actina e la miosina sono costituenti di molti tipi di cellule e sono implicate in una miriade di processi cellulari, tra cui la locomozione, la secrezione, la ciclosi, la fagocitosi e la citochinesi.
L′ACTB (β-actina) ha un ruolo cruciale nell′organogenesi, specialmente per quanto concerne lo sviluppo del cervello, dei reni e del cuore. È responsabile del mantenimento della proliferazione, della migrazione e della forma cellulare. La proteina dell′actina è essenziale per la formazione delle piastrine mature. β−L′actina è fondamentale per lo sviluppo embrionale. La sovraregolazione della β-actina stimola le protrusioni della membrana e favorisce la motilità cellulare. La proteina codificata β-actina media la migrazione dei fibroblasti nel topo, controllando così la tensione dei tessuti connettivi.
L′actina è una proteina citoscheletrica che regola la motilità, la secrezione, la fagocitosi e la citochinesi cellulare. La regione NH2-terminale dell′actina può funzionare da antigene. Questo terminale può anche modulare le interazioni dell′actina e può associarsi a proteine quali la miosina.
L′ACTB (β-actina) ha un ruolo cruciale nell′organogenesi, specialmente per quanto concerne lo sviluppo del cervello, dei reni e del cuore. È responsabile del mantenimento della proliferazione, della migrazione e della forma cellulare. La proteina dell′actina è essenziale per la formazione delle piastrine mature. β−L′actina è fondamentale per lo sviluppo embrionale. La sovraregolazione della β-actina stimola le protrusioni della membrana e favorisce la motilità cellulare. La proteina codificata β-actina media la migrazione dei fibroblasti nel topo, controllando così la tensione dei tessuti connettivi.
L′actina è una proteina citoscheletrica che regola la motilità, la secrezione, la fagocitosi e la citochinesi cellulare. La regione NH2-terminale dell′actina può funzionare da antigene. Questo terminale può anche modulare le interazioni dell′actina e può associarsi a proteine quali la miosina.
Stato fisico
Soluzione in 0,01 M di tampone fosfato salino, pH 7,4, contenente 15 mM di azoturo di sodio.
Nota sulla preparazione
Conservazione e stabilità: Per l′uso continuo, conservare a 2-8 °C al massimo per un mese. Se si desidera prolungare la conservazione, la soluzione può essere congelata in aliquote di lavoro a -20 °C. Si raccomanda di evitare cicli ripetuti di congelamento e scongelamento e la conservazione in freezer “frost free”. Se la soluzione risulta lievemente torbida dopo un lungo periodo di conservazione, centrifugarla per chiarificarla prima dell′uso. I campioni delle diluizioni di lavoro vanno eliminati se non vengono utilizzati entro 12 ore.
Altre note
Per visionare una guida alla selezione degli anticorpi anti-actina, visitare www.sigmaaldrich.com/actin.
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N° Catalogo
Descrizione
Determinazione del prezzo
Codice della classe di stoccaggio
10 - Combustible liquids
Classe di pericolosità dell'acqua (WGK)
WGK 3
Punto d’infiammabilità (°F)
Not applicable
Punto d’infiammabilità (°C)
Not applicable
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