MAB1501

Anticorpo anti-actina, clone C4

ascites fluid, clone C4, Chemicon^®

• Sinonimo/i: Anticorpo anti-pan-actina
• Codice UNSPSC: 12352203
• eCl@ss: 32160702
• NACRES: NA.41

Proprietà

• Origine biologica: mouse
• Livello qualitativo: 100
• Forma dell’anticorpo: ascites fluid
• Tipo di anticorpo: primary antibodies
• Clone: C4, monoclonal
• Reattività contro le specie (prevista in base all’omologia): all
• Produttore/marchio commerciale: Chemicon^®
• tecniche: ELISA: suitable; immunocytochemistry: suitable; immunofluorescence: suitable; immunohistochemistry (formalin-fixed, paraffin-embedded sections): suitable; western blot: suitable
• Isotipo: IgG2bκ
• N° accesso NCBI: NP_001091.1
• N° accesso UniProt: P68133
• modifica post-traduzionali bersaglio: unmodified
• Informazioni sul gene: human ... ACTA1(58)

Descrizione

Descrizione generale

Le actine sono proteine eucariotiche che agiscono come elementi costitutivi di base, multifunzionali, dei microfilamenti del citoscheletro. Svolgono ruoli decisivi in un′ampia gamma di processi cellulari, inclusa la divisione cellulare, la migrazione cellulare, il rimodellamento della cromatina, la regolazione della trascrizione e il traffico vescicolare. Queste funzioni vengono attribuite alla loro capacità di formare filamenti in grado di assemblarsi e disassemblarsi rapidamente in base alle necessità della cellula. Nei mammiferi sono stati descritti almeno sei tipi differenti di actine. Le actine mostrano un′omologia complessiva della sequenza del 90% circa ma le isoforme non mostrano modelli di espressione spaziali, temporali e tessuto-specifici e l′omologia riscontrata nei loro residui 18 N-terminali è pari solo al 50-60%. Le actine beta e gamma, note anche come actine citoplasmatiche, sono molto conservate negli animali superiori ed espresse prevalentemente nelle cellule non muscolari nelle quali controllano la struttura cellulare. Esocitosi e mobilità, Sono proteine quasi identiche e differiscono solo per quattro aminoacidi nella regione N-terminale. Le altre quattro isoforme dell′actina di solito si trovano in tipi specifici di tessuto muscolare adulto. Le actine alfa-cardiaca e alfa-scheletrica sono espresse nei muscoli striati rispettivamente cardiaco e scheletrico. Le actine alfa e gamma si trovano soprattutto rispettivamente nel muscolo liscio vascolare e nei muscoli lisci enterici. È stato dimostrato che se legata al calcio, la beta-actina manifesta un comportamento più dinamico della gamma-actina, con tassi più elevati di polimerizzazione e depolimerizzazione. Inoltre, le actine beta e gamma possono copolimerizzare prontamente e i filamenti che ne derivano mostrano tassi di polimerizzazione e depolimerizzazione variabili in base al rapporto tra beta- e gamma-actina (Lessard, JL., et al. (1988). Cell Motility Cytoskeleton 10(3); 349-362.

Specificità

A oggi, tutte le specie animali e i tipi cellulari con una forma di actina reagiscono all′immunofluorescenza indiretta o all′immunofissazione, inclusa l′actina vegetale.

MAB1501 è un anticorpo pan-actinico che si lega a un epitopo in una regione dell′actina fortemente conservata e dunque reagisce con tutte e sei le isoforme dell′actina dei vertebrati (Lessard, 1988). Reagisce con la forma globulare (G) e con quella filamentosa (F) dell′actina e, in un rapporto fino a un anticorpo per due monomeri di actina, non interferisce con la polimerizzazione dell′actina mirata alla formazione di filamenti. Tuttavia, l′anticorpo non incrementa l′entità della polimerizzazione se usato con un rapporto inferiore tra anticorpo e actina. Oltre a marcare i miotubi, l′anti-actina colora i mioblasti e i fibroblasti. Anche se viene preparato come anticorpo anti-actina di muscolo di ventriglio di pollo, il clone C4 reagisce con le actine di tutti i vertebrati, oltre che con le actine di Dictyostelium discoideum e Physarum polycephalum (Lessard, 1988).

Immunogeno

Actina purificata di ventriglio di pollo (Lessard, 1988).

L′epitopo è conservato in tutte le actine conosciute.

Applicazioni

Categoria di ricerca
Struttura cellulare

Immunofluorescenza indiretta a 1:100:
Cellule in coltura tissutale: fissare in formaldeide, trattare con metanolo o acetone.
Miofibrille glicerinate: fissare le fibre in formaldeide, trattare con metanolo freddo. Colora intensamente le bande-I e le fibre da stress nei fibroblasti umani.
Sezioni del criostato (6 µm): congelare rapidamente in isopentano, vetrini trattati con gelatina e formaldeide.

Immunofissazione:
1:100-1:1.000 (Otey, 1987): su omogenati di muscolo sottoposti a SDS-PAGE, reagisce in modo relativamente uniforme con una proteina da 43 kDa presente nel tessuto scheletrico, cardiaco, di ventriglio e aortico. Reagisce con tutte le isoforme di actina individuate in queste preparazioni e mostra una reazione forte con l′alfa-actina presente nel muscolo scheletrico, cardiaco e arterioso.

Iodinazione (Lessard, 1979).

Saggio ELISA di legame in fase solida:
È stato dimostrato che una diluizione 1:800-1:1000 da un lotto precedente induce una reazione forte con l′actina citoplasmatica e mostra un legame significativo con le actine di ventriglio, scheletriche, arteriose e cardiache. Mostra anche un legame significativo con Dictyostelium discoidum e Physarum polycephalum.

ELISA:
induce una reazione forte con l′actina citoplasmatica e mostra un legame significativo con le actine di ventriglio, scheletriche, arteriose e cardiache. Mostra anche un legame significativo con Dictyostelium discoidum e Physarum polycephalum.

Le diluizioni di lavoro ottimali devono essere determinate dall′utente finale.

Rilevamento affidabile e specifico dell′actina con questo anticorpo anti-actina, clone C4. Forte di molteplici pubblicazioni, questo anticorpo è convalidato per l′uso in ELISA, IC, IF, IH, IH(P) e WB. Questo anticorpo monoclonale è disponibile anche come coniugato fluorescente.

Sottocategoria di ricerca
Trasmissione del segnale nel citoscheletro

Qualità

Valutato abitualmente con western blot su lisati di A431.

Analisi con western blot:
la diluizione 1:500 di questo lotto ha rilevato ACTIN su 10 ug di lisati di A431.

Descrizione del bersaglio

43 kDa

Linkage

Sostituisce: 04-1040

Stato fisico

Fluido ascitico monoclonale murino, con 0,01% di sodio azide.

Non purificato

Stoccaggio e stabilità

Stabile a -20 °C in aliquote non diluite per un massimo di 12 mesi dalla data di ricezione. Non conservare nella forma diluita. Evitare ripetuti cicli di congelamento e scongelamento.

Risultati analitici

Controllo
Lisato di cellule HeLa intere.

Altre note

Vincitore del CiteAb Award 2024 per i fornitori che hanno conseguito risultati nella ricerca sul Parkinson

Note legali

CHEMICON is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

Esclusione di responsabilità

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Informazioni sulla sicurezza

• Codice della classe di stoccaggio: 10 - Combustible liquids
• Classe di pericolosità dell'acqua (WGK): WGK 1
• Punto d’infiammabilità (°F): Not applicable
• Punto d’infiammabilità (°C): Not applicable