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11796828001

Roche

Kit per la preparazione di templati per PCR High Pure

pkg of 100 purifications, suitable for DNA extraction

Sinonimo/i:

Estrazione del DNA

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About This Item

Codice UNSPSC:
41105500

impiego

sufficient for 100 purifications

Livello qualitativo

Produttore/marchio commerciale

Roche

Confezionamento

pkg of 100 purifications

tecniche

DNA extraction: suitable

Descrizione generale

Isolamento di DNA genomico con resa da bassa a media.

Kit per la preparazione di templati per PCR High Pure; Istruzioni per l′uso

Gli acidi nucleici si legano alla superficie della lana di vetro in presenza di un sale caotropico (guanidina HCl). Questo permette alla provetta filtrante High Pure di immobilizzare specificamente gli acidi nucleici (DNA e RNA) mentre vengono liberati dai contaminanti.

Nota: È incluso uno speciale tampone per la rimozione degli inibitori che consente l′utilizzo di materiale di campioni eparinizzati (100 U/mL di eparina). Questo tampone aumenta la sensibilità e la riproducibilità dei saggi eseguiti con l′acido nucleico isolato, anche quando il campione contiene eparina.

Capacità: Le provette filtranti per centrifuga High Pure contengono fino a un volume di campione di 700 μL.

Applicazioni

Il kit per la preparazione di templati per PCR High Pure purifica gli acidi nucleici di svariati materiali dei campioni, inclusi sangue intero, cellule coltivate e tessuti. Gli acidi nucleici isolati possono essere utilizzati per:
  • PCR per templati lunghi
  • PCR quantitativa in tempo reale
  • Rilevamento di SNP
  • Metodica Southern blot
  • Clonazione
Il kit per la preparazione di templati per PCR High Pure è stato utilizzato nell′estrazione del DNA genomico da campioni di sangue intero, campioni di lesioni cervicali, tessuti delle mucose gastriche e linee cellulari di carcinoma cervicale.

Caratteristiche e vantaggi

Il kit per la preparazione di templati per PCR High Pure purifica gli acidi nucleici di svariati materiali campionati, inclusi campioni di sangue intero, cellule coltivate e tessuti. I batteri e il lievito richiedono uno specifico trattamento pre-lisi con lisozima o liticasi.
  • Massima riduzione della perdita di DNA grazie al kit che rimuove i contaminanti senza precipitazione e altri passaggi di manipolazione che degradano il DNA.
  • Recupero di DNA con elevato peso molecolare (da 30 a 50 kb) idoneo alla PCR per templati lunghi.
  • Migliore affidabilità e riproducibilità nelle applicazioni successive (PCR quantitativa in tempo reale).
  • La preparazione simultanea di diversi templati per PCR accelera le operazioni e potenzia la flessibilità.
  • Si elimina l′uso di composti organici pericolosi quali il cloruro di cesio, il fenolo, il cloroformio e il bromuro di etidio.

Componenti

  • Tampone per la lisi dei tessuti
  • Tampone legante
  • Proteinasi K per PCR ricombinante
  • Tampone per la rimozione degli inibitori
  • Tampone di lavaggio
  • Tampone di eluizione
  • Provette filtranti High Pure
  • Provette di raccolta

Qualità

Il DNA viene isolato da 25 mg di timo di vitello, 1 x 106 cellule K562 e 200 μl di sangue intero EDTA. La resa viene misurata tramite densità ottica per i campioni di tessuti e cellule. La qualità dell′acido nucleico è controllata in una PCR a lungo raggio Expand con un prodotto di amplificazione da 9,3 kb per il DNA derivato dalle cellule. La PCR sullo strumento LightCycler® viene eseguita su campioni per la ricerca sul sangue umano utilizzando kit per il fattore V di Leiden e la ciclosporina A.

Principio

Le cellule del sangue e i tessuti vengono lisati mediante una breve incubazione con uno speciale tampone di lisi e la proteinasi K, in presenza di un sale caotropico come la guanidina HCl che inattiva immediatamente tutte le nucleasi. Gli acidi nucleici cellulari si legano selettivamente a speciali fibre di vetro pre-inserite nella provetta filtrante per purificazione High Pure. L′acido nucleico legato viene purificato in una serie di rapidi passaggi di lavaggio e centrifugazione per rimuovere i componenti cellulari contaminanti. Infine, l′eluizione con poco sale rilascia l′acido nucleico dalla fibra di vetro. Questo semplice metodo elimina la necessità di effettuare le estrazioni con un solvente organico e la precipitazione del DNA, consentendo la rapida purificazione simultanea di molti campioni.

Note legali

LightCycler is a registered trademark of Roche

Avvertenze

Danger

Classi di pericolo

Acute Tox. 4 - Acute Tox. 4 Oral - Eye Dam. 1 - Resp. Sens. 1 - Skin Irrit. 2 Inhalation - Skin Sens. 1 - STOT SE 3

Organi bersaglio

Respiratory system

Codice della classe di stoccaggio

12 - Non Combustible Liquids

Classe di pericolosità dell'acqua (WGK)

WGK 2

Punto d’infiammabilità (°F)

does not flash

Punto d’infiammabilità (°C)

does not flash


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