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SCT149

Sigma-Aldrich

Saggio della luciferasi per la determinazione della vitalità cellulare sulla base dell′ATP

A highly sensitive firefly luciferase cell based assay for quantifying ATP in cell cultures used to measure cell viability.

Sinonimo/i:

Luminescent Cell Viability Assay, Cell Toxcity Assay, Bioluminescent Cell Viability Assay

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About This Item

Codice UNSPSC:
12352207
NACRES:
NA.47

tecniche

cell based assay: suitable

Metodo di rivelazione

chemiluminescent

Condizioni di spedizione

ambient

Descrizione generale

L′adenosina trifosfato (ATP) è una molecola presente in tutte le cellule metabolicamente attive; grazie a questa caratteristica, la misura dell′ATP può essere utilizzata per determinare il numero di cellule vitali in base alla quantità di ATP disponibile. Il saggio della luciferasi per la determinazione della vitalità cellulare sulla base dell′ATP costituisce un metodo coerente e molto sensibile per la quantificazione dell'ATP nelle colture cellulari. Questo kit sfrutta la capacità dell′enzima luciferasi di lucciola di ossidare la D-luciferina in presenza di ATP, con conseguente produzione di luce, per valutare la quantità di ATP disponibile nelle colture cellulari. La procedura del saggio prevede una singola aggiunta della miscela di reagenti per la rivelazione dell'ATP direttamente nelle cellule in coltura su terreno supplementato con siero. Non sono necessarie ulteriori operazioni come il lavaggio delle cellule, la rimozione del terreno né diversi trasferimenti con la pipetta. Il kit può essere utilizzato per rivelare quantità piccole a livello di singola cellula o di 0,01 picomoli di ATP. Il segnale prodotto è lineare in un intervallo di 6 ordini di grandezza. Rapportando la quantità di ATP con il numero di cellule vitali, il saggio si presta a svariate applicazioni che vanno dalla determinazione del numero di cellule vitali, ai saggi di proliferazione e di citotossicità.

Il saggio della luciferasi per la determinazione della vitalità cellulare sulla base dell′ATP è un test basato sulla luminescenza di tipo "flash", concepito per la rivelazione in singoli campioni mediante l'uso di un luminometro a campione singolo o di un luminometro dotato di iniettore per piastre a 96 pozzetti. Il segnale di luminescenza generato è stabile per circa 1 minuto.

Applicazioni

Categoria della ricerca
Segnalazione cellulare
Saggio ad elevata sensibilità che utilizza la luciferasi di lucciola per quantificare l'ATP nelle colture cellulari, ai fini di misurare la vitalità cellulare.
Saggio di vitalità cellulare
Sottocategoria di ricerca
Colorante per cellule vive

Componenti

1) D-luciferina (CS224519): 4 x 10 mg

2) Luciferasi di lucciola (CS224520): 5 x 200 µ

3) Tampone per il dosaggio dell′ATP (CS224521): 1 x 10 mL

4) ATP, 2µM (CS224522): 1 x 100 µL

Stato fisico

Liquido

Stoccaggio e stabilità

Conservare il kit per il saggio della luciferasi a -80 °C. Evitare ripetuti cicli di congelamento e scongelamento. Il prodotto è stabile per almeno sei mesi dalla data di ricevimento se conservato secondo le indicazioni.

Esclusione di responsabilità

Salvo diversa indicazione nel nostro catalogo o in altra documentazione fornita dall′azienda insieme al prodotto, i nostri prodotti sono destinati esclusivamente a scopi di ricerca e non devono essere utilizzati per altre finalità, inclusi a titolo esemplificativo ma non esaustivo, fini commerciali non autorizzati, applicazioni diagnostiche in vitro, usi terapeutici ex vivo o in vivo o qualsiasi altro tipo di assunzione o applicazione rivolta agli esseri umani o agli animali.

Codice della classe di stoccaggio

10 - Combustible liquids


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Firefly luciferase is a widely used bioluminescent reporter for studying gene regulation and function. It is a very sensitive genetic reporter due to the absence of endogenous luciferase activity in mammalian cells or tissues.

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