MABT824

Anticorpo anti-gamma-actina/ACTG1, clone 2A3

clone 2A3, from mouse

• Sinonimo/i: Actin, cytoplasmic 2, gamma-Actin
• Codice UNSPSC: 12352203
• eCl@ss: 32160702
• NACRES: NA.41

Proprietà

• Origine biologica: mouse
• Livello qualitativo: 100
• Forma dell’anticorpo: purified immunoglobulin
• Tipo di anticorpo: primary antibodies
• Clone: 2A3, monoclonal
• Reattività contro le specie: mouse, rat, human, chicken
• Reattività contro le specie (prevista in base all’omologia): mammals (based on 100% sequence homology)
• tecniche: immunocytochemistry: suitable; western blot: suitable
• Isotipo: IgG2bκ
• N° accesso NCBI: NP_001605.1
• N° accesso UniProt: P63261
• Condizioni di spedizione: wet ice
• modifica post-traduzionali bersaglio: unmodified
• Informazioni sul gene: human ... ACTG1(71)

Descrizione

Descrizione generale

L′actina citoplasmatica 2 (UniProt P63261; denominata anche gamma-actina) nell′uomo è codificata dal gene ACTG1 (noto anche con i nomi ACTG, BRWS2, DFNA20, DFNA26) (Gene ID 71). Le actine, tra le proteine più conservate negli eucarioti, sono proteine globulari multifunzionali che si organizzano a costituire gli elementi di base dei microfilamenti del citoscheletro. Sono noti sei tipi di actina: alfa-actina della muscolatura scheletrica codificata dal gene ACTA1, alfa-actina della muscolatura liscia codificata dal gene ACTA2, beta-actina citoplasmatica codificata dal gene ACTB, alfa-actina del muscolo cardiaco codificata dal gene ACTC1, gamma-actina citoplasmatica codificata dal gene ACTG1 e gamma-actina della muscolatura liscia codificata dal gene ACTG2 (detto anche ACTA3). Sebbene l′omologia di sequenza delle actine in generale sia >90%, le isoforme sono caratterizzate da pattern diversi di espressione spaziale, temporale e tessuto-specifica, e i loro 18 residui N-terminali sono identici solo per il 50-60%. Si ritiene che le β e γ-actine citoplasmatiche siano presenti in tutte le cellule, mentre le altre quattro isoforme di actina di solito si trovano in specifici tipi di tessuto muscolare nell′adulto. A seconda delle condizioni ioniche o dell′interazione con le proteine a cui si legano, le actine assumono svariati stati strutturali. L′actina si organizza in strutture oligomeriche o polimeriche a seconda della conformazione assunta dalla sua molecola.

Specificità

Il clone 2A3 ha permesso di rivelare il peptide N-terminale della gamma-actina citoplasmatica coniugato con BSA ma non i peptidi N-terminali coniugati con BSA derivati da 5 altri tipi di actina (Dugina, V., et al. (2009). J. Cell Sci. 122(Pt 16):2980-2988).

Immunogeno

Epitopo: vicino all′estremità N-terminale.

Peptide lineare coniugato con KLH corrispondente alla sequenza N-terminale della gamma-actina/ACTG1 umana.

Applicazioni

Categoria di ricerca
Struttura cellulare

Questo anticorpo anti-gamma-actina/ACTG1, clone 2A3, è stato convalidato per l′uso nei saggi di Western blotting.

Sotto categoria di ricerca
Citoscheletro

Western blotting: un lotto rappresentativo alla concentrazione di 0,5 µg/mL ha permesso di rilevare la gamma-actina/ACTG1 in 10 µg di lisato di cellule NIH/3T3.
Immunocitochimica: un lotto rappresentativo alla concentrazione di 5,0 µg/mL ha permesso di rivelare la gamma-actina/ACTG1 in cellule HUVEC, A431 e HeLa.
Western blotting: con un lotto rappresentativo è stata riscontrata la modulazione negativa (down-regulation) dei livelli citoplasmatici di gamma-actina in cellule endoteliali microvascolari cerebrali umane D3 (hCMEC/D3) stimolate (con A23187, TRAP-6, TNF, LPS o IFN-γ) così come nelle loro microparticelle (MP) rispetto ai livelli riscontrati nelle stesse cellule e MP non stimolate (Latham, S.L., et al. (2013). FASEB J. 27(2):672-683).
Western blotting: un lotto rappresentativo ha evidenziato la down-regulation mediata da siRNA della gamma-actina citoplasmatica in cellule di carcinoma polmonare umano A549 (Miazza, V., et al. (2011). Virology. 410(1):7-16).
Western blotting: utilizzando un lotto rappresentativo, è stato possibile rivelare la gamma-actina citoplasmatica, ma non la beta-actina, dopo separazione mediante elettroforesi su gel 2-D di actine purificate da ventrigli di pollo o di estratti proteici totali di fibroblasti sottocutanei umani (HSCF), cellule MDCK canine e tessuto aortico di ratto (Dugina, V., et al. (2009). J. Cell Sci. 122(Pt 16):2980-2988).
Western blotting: un lotto rappresentativo ha riconosciuto il peptide N-terminale della gamma-actina citoplasmatica coniugato con BSA ma non i peptidi N-terminali coniugati con BSA derivati da 5 altri tipi di actina (Dugina, V., et al. (2009). J. Cell Sci. 122(Pt 16):2980-2988).
Immunocitochimica: un lotto rappresentativo ha individuato la localizzazione della γ-actina stimolata da TNF nelle fibre dello stress spesse, intensamente colorate, concentrate apicalmente in una rete sotto la membrana citoplasmatica nelle cellule endoteliali microvascolari cerebrali umane D3 (hCMEC/D3) (Latham, S.L., et al. (2013). FASEB J. 27(2):672-683).
Immunocitochimica: un lotto rappresentativo ha riscontrato una disposizione citoscheletrica simile della γ-actina in cellule endoteliali microvascolari cerebrali umane D3 (hCMEC/D3) trattate e non trattate con l′inibitore della Rho-chinasi Y-27632 (Latham, S.L., et al. (2013). FASEB J. 27(2):672-683).
Immunocitochimica: mediante colorazione immunocitochimica fluorescente, un lotto rappresentativo ha permesso di riscontrare una radicale redistribuzione subcellulare della gamma-actina dopo infezione con virus Sendai di cellule epiteliali di rene di cane Madin-Darby (MDCK) polarizzate trattate con metanolo e fissate in paraformaldeide (Miazza, V., et al. (2011). Virology. 410(1):7-16).
Immunocitochimica: mediante immunocitochimica in fluorescenza, un lotto rappresentativo ha rivelato una localizzazione subcellulare della gamma-actina citoplasmatica distinta da quella della beta-actina, sia nelle cellule in diffusione che in quelle ferme di fibroblasti sottocutanei umani HSCF, cheratinociti umani HaCaT, fibroblasti embrionali umani WI38 e cellule di rene di cane Madin-Darby (MDCK) trattate con metanolo e fissate in paraformaldeide (Dugina, V., et al. (2009). J. Cell Sci. 122(Pt 16):2980-2988).

Qualità

Valutata mediante Western blotting su lisato di cellule HeLa.

Saggio di Western blotting: una concentrazione pari a 0,5 µg/mL di questo anticorpo ha rivelato la gamma-actina/ACTG1 in 10 µg di lisato di cellule HeLa.

Descrizione del bersaglio

Visualizzato a ~39-45 kDa. In alcuni lisati possono apparire bande non caratterizzate.

Stato fisico

Anticorpo monoclonale purificato di topo (IgG2bκ) in tampone contenente Tris-glicina 0,1 M (pH 7,4), NaCl 150 mM e azoturo di sodio 0,05%.

Formato: purificato

Purificato con proteina G

Stoccaggio e stabilità

Stabile per 1 anno a 2-8 °C dalla data di ricevimento.

Altre note

Concentrazione: fare riferimento alla scheda tecnica specifica del lotto.

Esclusione di responsabilità

Salvo diversa indicazione nel nostro catalogo o in altra documentazione fornita dall′azienda insieme al prodotto, i nostri prodotti sono destinati esclusivamente a scopi di ricerca e non devono essere utilizzati per altre finalità, inclusi a titolo esemplificativo ma non esaustivo, fini commerciali non autorizzati, applicazioni diagnostiche in vitro, usi terapeutici ex vivo o in vivo o qualsiasi altro tipo di assunzione o applicazione rivolta agli esseri umani o agli animali.

Informazioni sulla sicurezza

• Codice della classe di stoccaggio: 12 - Non Combustible Liquids
• Classe di pericolosità dell'acqua (WGK): WGK 1
• Punto d’infiammabilità (°F): Not applicable
• Punto d’infiammabilità (°C): Not applicable