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DNA polimerasi KOD Xtreme Hot Start

Ultra high fidelity dnapolymerase designed for the most challenging PCR applications including: crude sample PCR, amplification of long strand and highly GC-rich DNA templates.

• Sinonimo/i: High fidelity master mix, Hot start PCR, Hot start master mix
• Codice UNSPSC: 41105500
• NACRES: NA.85

Proprietà

• Livello qualitativo: 100
• Forma fisica: liquid
• impiego: sufficient for 200 reactions
• Caratteristiche: Difficult Templates/Specialty Enzymes PCR; High Fidelity PCR; dNTPs included; hotstart
• Produttore/marchio commerciale: Novagen^®
• Condizioni di stoccaggio: OK to freeze
• tecniche: PCR: suitable
• input: crude DNA
• Compatibilità: suitable for PCR
• Temperatura di conservazione: −20°C

Descrizione

Descrizione generale

*Prodotto da Toyobo e distribuito da EMD Millipore. Non disponibile presso Merck KGaA, Darmstadt, Germania in Giappone.

Nota: L′acquisto di questo prodotto include un′immunità dalle azioni giudiziarie ai sensi delle rivendicazioni di brevetto specificate nell′inserto della confezione per l′esclusivo utilizzo delle quantità di prodotto acquistate per finalità di ricerca interna dell′acquirente stesso. Nessun altro diritto brevettuale (come ad esempio i diritti di brevetto del processo della 5′ nucleasi) è conferito espressamente, implicitamente o per preclusione. Per ulteriori informazioni sull′acquisto di licenze, contattare il Responsabile delle Licenze, Applied Biosystems, 850 Lincoln Centre Drive, Foster City, California, 94404, USA.

La PCR prevede la replica di uno stampo di DNA tramite una DNA polimerasi termostabile. La processività, specificità e fedeltà della polimerasi usata possono influenzare efficienza, riproducibilità e resa della reazione di PCR. La PCR ad alta fedeltà utilizza una DNA polimerasi a basso tasso di errore che consente un alto grado di accuratezza nella replicazione del DNA di interesse. La fedeltà è critica quando è necessaria un′accurata amplificazione della sequenza del gene bersaglio, ad esempio in caso di sequenziamento diretto o di clonaggio per successiva espressione proteica. Una mutazione indesiderata potrebbe avere un impatto molto negativo sugli studi successivi. Le nostre analisi hanno dimostrato che gli enzimi KOD sono una scelta logica per una PCR rapida, accurata e ad alta resa. I nostri biologi molecolari lavorano per sviluppate e formulare polimerasi che offrano la massima specificità, fedeltà e resa durante l′ amplificazione della PCR. Inoltre l′ottimizzazione di tamponi, miscele madri e dei parametri di ciclizzazione facilita l′utilizzo e la riproducibilità dati.
Il kit con DNA polimerasi KOD Xtreme<TMSYMBOL></TMSYMBOL> Hot Start* contiene un enzima per PCR ottimizzato per l′amplificazione di templati di DNA lunghi o ricchi di GC, in campioni quali punte di coda di topo, tessuti vegetali e in applicazioni di biologia sintetica. L′esclusiva formulazione permette l′amplificazione di campioni poco processati; ottenendo un′amplificazione efficiente dei target della PCR anche in campioni grezzi. Il sistema comprende una DNA polimerasi KOD a ultra alta fedeltà complessata con due anticorpi monoclonali per consentire il termociclaggio hot start, oltre a un tampone 2X a formulazione speciale. La DNA polimerasi KOD Xtreme Hot Start amplifica in modo rapido e accurato target genomici e di DNA fagico/plasmidico, rispettivamente fino a 24 e 40 kbp. La DNA polimerasi KOD Xtreme Hot Start amplifica senza problemi anche i templati di DNA più difficili con un contenuto di GC fino al 90%. Ogni kit fornisce 200 U di DNA polimerasi KOD Xtreme Hot Start, un tampone ottimizzato e i dNTP sufficienti per 200 reazioni di amplificazione. La polimerasi produce amplificati di DNA con estremità piatte, idonei al clonaggio con i kit Novagen Perfectly Blunt<TMSYMBOL></TMSYMBOL> e LIC Vector. È possibile richiedere un campione gratuito.

Caratteristiche e vantaggi

• Ottimizzata per la massima riuscita della PCR, anche con i target più difficili.
• Fedeltà 10 volte più alta rispetto alle miscele Taq.
• Amplifica con la massima efficienza templati di DNA con contenuto di GC fino al 90%.
• Amplifica target genomici fino a 24 kbp.
• Amplifica target fago/Lambda fino a 40 kbp.
• Elimina il mispriming e la formazione di dimeri di primer.
• Comoda impostazione a temperatura ambiente compatibile con l′automazione.

Componenti

• 1× 200 U DNA polimerasi KOD Xtreme<TMSYMBOL></TMSYMBOL> Hot Start
• 3 × 1,7 mL tampone Xtreme 2X
• 2 × 1 mL dNTPs (2 mM ciascuno)

Attenzione

Tossicità: Irritante (B)

Definizione di unità

Un′unità è definita come la quantità di enzima che catalizza l′incorporazione di 10 nmol di dNTP in forma insolubile in acido in 30 minuti a 75 °C, in una reazione contenente 20 mM di Tris-HCl (pH 7,5 a 25 °C), 8 mM di MgCl₂, 7,5 mM di DTT, 50 µg/mL di BSA, 150 µM ciascuno di dATP, dCTP, dGTP e dTTP (una miscela di non marcati e [³H]dTTP) e 150 µg/mL di DNA attivato di timo di vitello.

Note legali

NOVAGEN is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

Informazioni sulla sicurezza

• Codice della classe di stoccaggio: 10 - Combustible liquids