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一般說明
SILu™Mab 是重组的、稳定的同位素标记的人单克隆抗体，其中掺入 [13C6，15N4]-精氨酸和 [13C6，15N2]-赖氨酸。SILuMab 在 CHO 细胞中表达，其经设计用作单克隆抗体生物分析的通用内标。由于 SILuMab 与候选抗体在 Fc 区中的共有序列重叠，因此它具有通用性，不需要生产候选抗体特异性内标。SILuMab 是具有 λ 轻链的 IgG1 抗体，但包含其他 IgG 同种型共有的肽序列。
應用
SILu™MAB 稳定同位素标记的通用人单克隆抗体标准品已用于自动抗体从头测序的比较研究中。
特點和優勢
通用肽序列定位
DTLMISR重链（IgG1、IgG2、IgG3、IgG4）
FNWYVDGVEVHNAK重链（IgG1）
VVSVLTVLHQDWLNGK重链（IgG1、IgG3、IgG4）
NQVSLTCLVK重链（IgG1、IgG2、IgG3、IgG4）
GFYPSDIAVEWESNGQPENNYK重链（IgG1、IgG4）
AGVETTTPSK重链（λ）
YAASSYLSLTPEQWK重链（λ）
DTLMISR重链（IgG1、IgG2、IgG3、IgG4）
FNWYVDGVEVHNAK重链（IgG1）
VVSVLTVLHQDWLNGK重链（IgG1、IgG3、IgG4）
NQVSLTCLVK重链（IgG1、IgG2、IgG3、IgG4）
GFYPSDIAVEWESNGQPENNYK重链（IgG1、IgG4）
AGVETTTPSK重链（λ）
YAASSYLSLTPEQWK重链（λ）
SILuMab 已通过基于 MRM 的 LC-MS/MS 被验证为定量复杂生物基质中相关生物治疗药物的内标。
- SILuMab 产生从 0.1 μg/mL 到 1000 μg/mL 的可重复的线性曲线，而没有富集或耗尽。
- 在同一目标衍生的多个肽之间观察到良好的一致性。
- 通过质谱确定标记掺入率 >98%。
- 通过肽图谱确认序列覆盖。
外觀
以含有磷酸盐缓冲盐水的冻干粉形式提供
準備報告
SILuMab 设计经过优化，可以用作定量单克隆抗体和 Fc 融合治疗的内标。由于与候选抗体在 Fc 区的通用序列重叠，因此 SILuMab 具有通用性，从而不需要产生候选抗体特异性内标。
利用含有稳定同位素标记的氨基酸的富集培养基生产的是 13C6, 15N4-标记的精氨酸和 13C6, 15N2-标记的赖氨酸
重構
当使用 0.1％ 的甲酸重悬冻干产品时，SILuMab 的回收率最高。用其他溶剂重悬可能会降低回收率。重悬后不要冷冻。
程序
程序
- 将小瓶以约 10,000 x g 的速度短暂离心，在小瓶底部收集产品。
- 向小瓶中添加 500 μL 含 0.1％ 甲酸的纯净水。
- 轻轻颠倒样品瓶至少 5 次 混合内容物。
- 让小瓶在室温下静置至少 15 分钟，然后颠倒重复混匀。
分析報告
SILuMab 重链
EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCVASGFTLNNYDMHWVRQGIGKGLEWVSKI
GTAGDRYYAGSVKGRFTISRENAKDSLYLQMNSLRVGDAAVYYCARGAGRW
APLGAFDIWGQGTMVTVSS|ASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYF
PEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVN
HKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISR
TPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRV
VSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPS
RDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFL
YSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPG
SILuMab 轻链
QSALTQPRSVSGSPGQSVTISCTGTSSDIGGYNFVSWYQQHPGKAPKLMIY
DATKRPSGVPDRFSGSKSGNTASLTISGLQAEDEADYYCCSYAGDYTPGV
VFGGGTKLTVL|GQPKAAPSVTLFPPSSEELQANKATLVCLISDFYPGAVTV
AWKADSSPVKAGVETTTPSKQSNNKYAASSYLSLTPEQWKSHRSYSCQ
VTHEGSTVEKTVAPTECS
靶标重叠区域加了下划线
EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCVASGFTLNNYDMHWVRQGIGKGLEWVSKI
GTAGDRYYAGSVKGRFTISRENAKDSLYLQMNSLRVGDAAVYYCARGAGRW
APLGAFDIWGQGTMVTVSS|ASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYF
PEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVN
HKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISR
TPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRV
VSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPS
RDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFL
YSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPG
SILuMab 轻链
QSALTQPRSVSGSPGQSVTISCTGTSSDIGGYNFVSWYQQHPGKAPKLMIY
DATKRPSGVPDRFSGSKSGNTASLTISGLQAEDEADYYCCSYAGDYTPGV
VFGGGTKLTVL|GQPKAAPSVTLFPPSSEELQANKATLVCLISDFYPGAVTV
AWKADSSPVKAGVETTTPSKQSNNKYAASSYLSLTPEQWKSHRSYSCQ
VTHEGSTVEKTVAPTECS
靶标重叠区域加了下划线
根据A280 使用 1.4 的消光系数（E0.1%）测定的蛋白质含量确定包装规格
法律資訊
本产品已根据美国专利号 7,396,688 和 E. I. du Pont de Nemours and Company 的国外子公司许可使用。购买本产品将给买方不可转让的权利，将购买的数量的产品仅用于研发，包括第三方服务。买方不得将本产品，使用本产品或其组件制造的组件或材料出售或转让给第三方。有关排除用途的许可证的信息可从以下网站获得：E. I. du Pont de Nemours and Company；参加者：商业发展副主任；杜邦实验站 E268；200 Powdermill Rd； Wilmington，DE 19803；1-877-881-9787（语音），1-302-695-1437（传真），licensing@dupont.com。
SILu is a trademark of Sigma-Aldrich Co. LLC
儲存類別代碼
11 - Combustible Solids
水污染物質分類（WGK）
WGK 3
閃點（°F）
Not applicable
閃點（°C）
Not applicable
Qian Zhang et al.
Analytical chemistry, 86(17), 8776-8784 (2014-07-11)
Quantitation of therapeutic monoclonal antibodies (mAb) using liquid chromatography-tandem mass spectrometry (LC-MS/MS) for pharmacokinetic (PK) studies is becoming an essential complement to traditional antibody-based ligand binding assays (LBA). Here we show an automated method to perform LC-MS/MS-based quantitation, with IgG1
Sandor Schokker et al.
mAbs, 12(1), 1795492-1795492 (2020-08-04)
Given the increasing use of combination therapy with multiple monoclonal antibodies (mAbs), there is a clinical need for multiplexing assays. For the frequently co-administered anti-human epidermal growth factor receptor 2 (HER2) mAbs trastuzumab and pertuzumab, we developed a high-throughput and
Xi Qiu et al.
Bioanalysis, 10(13), 1055-1067 (2018-07-05)
Sample extraction using immuno-affinity capture coupled with LC-high-resolution mass spectrometer has recently emerged as a novel approach for the determination of concentrations of large molecules at intact level in biological matrix. In the current work, different data processing strategies for
Liyun Zhang et al.
Bioanalysis, 10(13), 1039-1054 (2018-06-29)
The requirements for developing antibody biotherapeutics benefit from understanding the nature and relevant aspects of the entire molecule. The method presented herein employs on-line multidimensional LC-quadrupole time-of-flight (QTOF)-MS for the quantitative determination of an antibody isolated from biological samples while
Automated Antibody De Novo Sequencing and Its Utility in Biopharmaceutical Discovery.
Sen K I, et al.
Journal of the American Society For Mass Spectrometry, 28(5), 803-810 (2017)
我们的科学家团队拥有各种研究领域经验，包括生命科学、材料科学、化学合成、色谱、分析及许多其他领域.
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