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Roche

生物素RNA标记混合物

sufficient for 20 reactions (transcription), pkg of 40 μL, solution

别名:

生物素

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About This Item

分類程式碼代碼:
41105500

形狀

solution

品質等級

100

用途

sufficient for 20 reactions (transcription)

包裝

pkg of 40 μL

製造商／商標名

Roche

雜質

Ribonuclease, none detected

顏色

colorless

溶解度

water: miscible

儲存溫度

−20°C

相关类别

一般說明

用于生物素-16-UTP标记RNA的便捷核苷酸混合物。

特異性

热灭活：添加2 μl 0.2 M EDTA (pH 8.0)以终止反应。

應用

生物素RNA标记混合物已用于通过生物素-16-UTP与SP6、T7和T3 RNA聚合酶体外转录的RNA标记。
生物素标记RNA还应用于一系列杂交技术：
  • DNA印迹
  • RNA印迹
  • 斑点印迹
  • 菌落及菌斑清除
  • RNA酶保护试验
  • 原位杂交
  • 微阵列杂交
  • RNA pull down试验

特點和優勢

组份
10x 浓缩液包含: ATP、CTP、GTP各10mM，6.5mM UTP，3.5mM生物素-16-UTP，pH 7.5

品質

结合DIG RNA标记试剂盒进行了功能检测。

原則

生物素标记的、确定长度的单链RNA探针通过体外转录产生。生物素-16-UTP通过SP6、T7和T3 RNA聚合酶以大约每20到25个核苷酸的间隔插入转录产物中，转录条件如下所述。生物素RNA标记混合物专为Roche SP6、T7和T3 RNA聚合酶设计，随附优化的转录缓冲液。

準備報告

试验时间：135分钟

样品材料
  • 线性化质粒DNA：待转录的DNA将会被克隆至含有SP6，T7或T3 RNA聚合酶启动子并相邻于多接头的合适转录载体的多接头位点。对于′流失′转录本的合成，质粒是通过限制性酶进行线性化的。应使用限制性酶生成的5′-突出；应避免3′突出。线性化模板DNA应采用酚氯仿萃取和乙醇沉淀法纯化，以避免RNase污染。为′完成′转录，使用了环状质粒DNA
  • PCR产物：含有RNA聚合酶启动子序列的PCR片段，也可以作为转录模板。推荐在转录前通过凝胶电泳纯化正确的PCR片段。
  • 标记效率：μ通过1μg线性模板DNA和RNA聚合酶进行标准标记反应，产生大约10μg全长生物素标记RNA。在斑点试验中，联用抗生物素-AP与化学发光底物CSPD可检测低至0.3pg的生物素标记RNA。

其他說明

仅用于生命科学研究。不可用于诊断。

儲存類別代碼

12 - Non Combustible Liquids

水污染物質分類（WGK）

WGK 1

閃點（°F）

does not flash

閃點（°C）

does not flash

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