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HTS142M

Sigma-Aldrich

ChemiScreen 膜制剂
重组人EP4前列腺素受体

Human EP4 GPCR membrane preparation for Radioligand binding Assays & GTPγS binding.

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About This Item

分類程式碼代碼:
41106514
eCl@ss:
32161000
NACRES:
NA.41

生物源

human

品質等級

重組細胞

expressed in Chem-1 cells

製造商/商標名

ChemiScreen
Chemicon®

技術

ligand binding assay: suitable (GTPγS)
radioligand binding assay (RLBA): suitable

NCBI登錄號

UniProt登錄號

運輸包裝

dry ice

基因資訊

一般說明

人EP4
前列腺素是由环氧合酶作用,经异构酶和合成进一步修饰而产生的一系列花生四烯酸代谢产物。 细胞在合成后迅速分泌前列腺素,随后前列腺素与8个GPCR家族结合以发挥其生物学作用(Narumiya and FitzGerald, 2001)。 前列腺素PGE2引起疼痛,血管舒张,T细胞免疫抑制,骨骼重塑并促进癌变。 四个相关的GPCR,EP1,EP2,EP3和EP4,各自与PGE2结合,但是每个受体的不同G蛋白偶联状态导致不同的生物学作用。 EP4主要与Gs偶联以增加细胞内cAMP水平。 在新生儿发育期间,EP4参与动脉导管的闭合,这是将循环从胎盘转换到肺所需的过程(Nguyen et al.,1997)。 此外,EP4通过促进成骨发生介导PGE2诱导的骨形成,选择性EP4激动剂正在被评估为骨质疏松症的潜在治疗方法(Yoshida et al.,2002)。 Chemicon′s EP4膜制剂是由我们专有的稳定重组细胞系制成的粗制膜制剂,可确保高水平的GPCR表面表达;因此,它们是用前列腺素E2筛选EP4各种相互作用拮抗剂的理想HTS工具。 膜制剂对[3H]-前列腺素E2的Kd为1.27-1.85 nM。 使用5 µg/孔的EP4膜制剂和1.5 nM[3H]-前列腺素E2,可获得大于3倍的信背比。

應用

放射性配体结合测定和GTPγS结合。

生化/生理作用

GPCR 类别:A
蛋白质靶标:EP4
靶标亚家族:前列腺素类

品質

质量标准:
信号:使用不同量的EP4膜制备物在竞争结合试验中获得的背景和特异性结合值:
10µ g/孔
信号:背景3.9
特异性结合(cpm)643


1单位=10 µg膜制备物
Bmax:16.1 pmol/mg
Kd: 1.57 nM

規格

诱导条件
将膜与放射性配体和未标记竞争剂(检测浓度见图1和2)在非结合96孔板的结合缓冲液中混合,并培养1-2小时。过滤前,用0.33%聚乙烯亚胺包被GF/C 96孔滤板30分钟,然后用50mM HEPES,pH值7.4,0.5%BSA洗涤。 将结合反应物转移到滤板上,并用洗涤缓冲液洗涤3次(每次洗涤每孔1 mL)。 将平板干燥并计数。

结合缓冲液:50 mM Hepes,pH值7.4,5 mM MgCl2,1 mM CaCl2,0.2%BSA,过滤并储存在4°C
放射性配体:[3H]前列腺素E2(Perkin Elmer#NET428)
洗涤缓冲液:50 mM Hepes,pH值7.4,500mM NaCl,0.1%BSA,过滤并在4°C下保存。

外觀

一个包装包含足以进行至少200次测定(单位)的膜,其中单位是产生大于3倍信号:背景的膜量,具有在1.5 nM的3H标记的前列腺素E2。

包装缓冲液中的液体:50 mM Tris pH值7.4、10%甘油和1%BSA,不含防腐剂。
包装方法:将膜蛋白在包装缓冲液中调节至指定的浓度,快速冷冻,并保存在-80°C下。

儲存和穩定性

在 -70°C 下可冷冻保存长达 2年。 请勿冷冻和解冻。

法律資訊

CHEMICON is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

免責聲明

除非我们的产品目录或产品附带的其他公司文档另有说明,否则我们的产品仅供研究使用,不得用于任何其他目的,包括但不限于未经授权的商业用途、体外诊断用途、离体或体内治疗用途或任何类型的消费或应用于人类或动物。

儲存類別代碼

12 - Non Combustible Liquids

水污染物質分類(WGK)

WGK 2

閃點(°F)

Not applicable

閃點(°C)

Not applicable


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M Nguyen et al.
Nature, 390(6655), 78-81 (1997-11-18)
Survival of newborn placental mammals depends on closure of the ductus arteriosus (DA), an arterial connection in the fetus which directs blood away from the pulmonary circulation and towards the placenta where oxygenation occurs. Here we show that morphological changes
Stimulation of bone formation and prevention of bone loss by prostaglandin E EP4 receptor activation
Yoshida, Keiji, et al
Proceedings of the National Academy of Sciences of the USA, 99, 4580-4585 (2002)
Genetic and pharmacological analysis of prostanoid receptor function.
S Narumiya et al.
The Journal of clinical investigation, 108(1), 25-30 (2001-07-04)

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