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生物源
rabbit
品質等級
無性繁殖
polyclonal
純化經由
using Protein A
物種活性
human, mouse
製造商/商標名
ChIPAb+
Upstate®
技術
ChIP: suitable
western blot: suitable
NCBI登錄號
UniProt登錄號
運輸包裝
dry ice
基因資訊
human ... H3F3B(3021)
一般說明
每批,
每次对全部ChIPAb+抗体的染色质沉淀进行单独验证。每个ChIPAb+抗体组均包含对照引物(通过qPCR对每个批次进行检测),以在基因座特异性环境下对IP结果进行生物学验证。提供了qPCR方案和引物序列,使研究人员能够在染色质环境中使用我们的抗体时验证ChIP方案。
每组还包括阴性对照抗体,以确保ChIP反应的特异性。ChIPAb+三甲基组蛋白H3(Lys27)组包括抗三甲基组蛋白H3(Lys27)抗体,阴性对照抗体(纯化的兔IgG)和qPCR引物,可扩增人α卫星的139 bp区域。三甲基组蛋白H3(Lys27)和阴性对照抗体以可扩展的“每个ChIP”反应大小提供,可用于功能上验证三甲基组蛋白H3(Lys27)相关染色质的沉淀。
每次对全部ChIPAb+抗体的染色质沉淀进行单独验证。每个ChIPAb+抗体组均包含对照引物(通过qPCR对每个批次进行检测),以在基因座特异性环境下对IP结果进行生物学验证。提供了qPCR方案和引物序列,使研究人员能够在染色质环境中使用我们的抗体时验证ChIP方案。
每组还包括阴性对照抗体,以确保ChIP反应的特异性。ChIPAb+三甲基组蛋白H3(Lys27)组包括抗三甲基组蛋白H3(Lys27)抗体,阴性对照抗体(纯化的兔IgG)和qPCR引物,可扩增人α卫星的139 bp区域。三甲基组蛋白H3(Lys27)和阴性对照抗体以可扩展的“每个ChIP”反应大小提供,可用于功能上验证三甲基组蛋白H3(Lys27)相关染色质的沉淀。
组蛋白的甲基化可以发生在两个不同的残基上:精氨酸或赖氨酸。组蛋白甲基化可以与转录激活或抑制相关,具体取决于甲基化残基。组蛋白H3的赖氨酸27可以通过不同的组蛋白甲基转移酶(例如,EZH2或NSD3)单甲基化、二甲基化或三甲基化(组蛋白H3单甲基Lys27、组蛋白H3二甲基Lys27或组蛋白H3三甲基Lys27)。该残基的甲基化主要与转录抑制有关。
特異性
三甲基组蛋白H3 (Lys27)
预计具有广泛的物种交叉反应性。
免疫原
KLH缀合合成的2X支肽,包含序列...AR(me3K)SAP...,其中me3K对应于人组蛋白H3残基27处的三甲基赖氨酸。
表位:三甲基Lys27
應用
三甲基组蛋白H3(Lys27)ChIP验证的抗体&引物组,包括ChIP级抗体 & 特异性对照PCR引物用于H3K27me3染色质免疫沉淀。
染色质免疫沉淀:
使用4 μg纯化的抗三甲基组蛋白H3(Lys27)抗体或正常兔IgG和Magna ChIP A试剂盒(目录号17-610)对从2x106 HeLa细胞制备的超声染色质进行染色质免疫沉淀。使用位于人GAPDH启动子侧翼的ChIP引物GAPDH和靶向人MyoD启动子的引物,通过qPCR验证了三甲基组蛋白H3(Lys27)相关DNA片段的成功富集。
关于实验详细信息,请参阅EZ-Magna ChIP A(目录号17-408)或EZChIP(目录号17-371)试剂盒方案。
蛋白质印迹分析:
重组组蛋白H3(泳道2)和HeLa细胞酸提取物(泳道1)通过电泳分离,转移到硝酸纤维素中,用1:5000稀释的抗三甲基组蛋白H3 Lys27(0.4 μg/mL)进行探测。
使用HRP偶联的山羊抗兔二抗和化学发光检测系统观察蛋白质(请参见图)。
使用4 μg纯化的抗三甲基组蛋白H3(Lys27)抗体或正常兔IgG和Magna ChIP A试剂盒(目录号17-610)对从2x106 HeLa细胞制备的超声染色质进行染色质免疫沉淀。使用位于人GAPDH启动子侧翼的ChIP引物GAPDH和靶向人MyoD启动子的引物,通过qPCR验证了三甲基组蛋白H3(Lys27)相关DNA片段的成功富集。
关于实验详细信息,请参阅EZ-Magna ChIP A(目录号17-408)或EZChIP(目录号17-371)试剂盒方案。
蛋白质印迹分析:
重组组蛋白H3(泳道2)和HeLa细胞酸提取物(泳道1)通过电泳分离,转移到硝酸纤维素中,用1:5000稀释的抗三甲基组蛋白H3 Lys27(0.4 μg/mL)进行探测。
使用HRP偶联的山羊抗兔二抗和化学发光检测系统观察蛋白质(请参见图)。
研究子类别
组蛋白
组蛋白
研究类别
表观遗传学&核功能
表观遗传学&核功能
包裝
25次测定/试剂盒,约4 μL/染色质免疫沉淀。
成分
抗三甲基组蛋白H3(Lys27)多克隆抗体,1小瓶
多克隆对照兔血清,1小瓶
人α-卫星引物组,1小瓶
多克隆对照兔血清,1小瓶
人α-卫星引物组,1小瓶
品質
染色质免疫沉淀:
使用4 μg纯化抗体或正常兔IgG和Magna ChIP® A试剂盒(目录号17-610)对从3x106 NIH3T3 L1细胞制备的超声染色质进行染色质免疫沉淀。使用ChIP引物人α-卫星通过qPCR验证了与三甲基组蛋白H3
(Lys27)相关的DNA片段的成功富集(请参见图)。
关于实验详细信息,请参阅EZ-Magna ChIP A(目录号17-408)或EZ-ChIP(目录号17-371)试剂盒方案。
使用4 μg纯化抗体或正常兔IgG和Magna ChIP® A试剂盒(目录号17-610)对从3x106 NIH3T3 L1细胞制备的超声染色质进行染色质免疫沉淀。使用ChIP引物人α-卫星通过qPCR验证了与三甲基组蛋白H3
(Lys27)相关的DNA片段的成功富集(请参见图)。
关于实验详细信息,请参阅EZ-Magna ChIP A(目录号17-408)或EZ-ChIP(目录号17-371)试剂盒方案。
標靶描述
17 kDa
外觀
抗-三甲基组蛋白H3(Lys9)(兔多克隆IgG)。一小瓶含有100 μg蛋白A纯化IgG,溶于100 μL缓冲液中,缓冲液含有0.1 M Tris-甘氨酸(pH 7.4)、0.15 M NaCl和0.05%叠氮化钠。储存于-20°C。
正常兔IgG。一瓶含125 μg纯化兔IgG,溶于125 μL储存缓冲液(含0.1%叠氮化钠)。储存于-20°C。
ChIP引物人α-卫星。一个小瓶含有75 μL 5 μM人α卫星特异性的对照引物。储存于-20°C。
对于:CTG CAC TAC CTG AAG AGG AC
REV: GAT GGT TCA ACA CTC TTA CA
正常兔IgG。一瓶含125 μg纯化兔IgG,溶于125 μL储存缓冲液(含0.1%叠氮化钠)。储存于-20°C。
ChIP引物人α-卫星。一个小瓶含有75 μL 5 μM人α卫星特异性的对照引物。储存于-20°C。
对于:CTG CAC TAC CTG AAG AGG AC
REV: GAT GGT TCA ACA CTC TTA CA
儲存和穩定性
自发货之日起在-20°C下保存1年
分析報告
对照
1小瓶,含有75 μL的5 μM人α卫星特异性对照引物。储存于-20°C。
用于:CTG CAC TAC CTG AAG AGG AC
REV: GAT GGT TCA ACA CTC TTA CA
1小瓶,含有75 μL的5 μM人α卫星特异性对照引物。储存于-20°C。
用于:CTG CAC TAC CTG AAG AGG AC
REV: GAT GGT TCA ACA CTC TTA CA
法律資訊
MAGNA CHIP is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
UPSTATE is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
免責聲明
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儲存類別代碼
12 - Non Combustible Liquids
閃點(°F)
Not applicable
閃點(°C)
Not applicable
Long noncoding RNA-mediated maintenance of DNA methylation and transcriptional gene silencing.
Development null
Transgene- and locus-dependent imprinting reveals allele-specific chromosome conformations.
Proceedings of the National Academy of Sciences of the USA null
Genome-wide bovine H3K27me3 modifications and the regulatory effects on genes expressions in peripheral blood lymphocytes.
Testing null
Extensive co-operation between the Epstein-Barr virus EBNA3 proteins in the manipulation of host gene expression and epigenetic chromatin modification.
Testing null
Temporal dynamics and developmental memory of 3D chromatin architecture at Hox gene loci.
eLife null
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