S4438

SYBR^® Green JumpStart^™ Taq ReadyMix^™

for quantitative PCR, MgCI₂ in buffer

• Sinónimos: Hot start PCR master mix, sybr green PCR master mix, sybr green qPCR
• Número MDL: MFCD03458666
• Código UNSPSC: 41106300
• NACRES: NA.55

Propiedades

• Nivel de calidad: 200
• formulario: liquid
• uso: sufficient for 100 reactions; sufficient for 20 reactions; sufficient for 500 reactions
• Características: dNTPs included; hotstart
• concentración: 1.25 units/reaction (50 μL reaction volume)
• técnicas: qPCR: suitable
• entrada: purified DNA
• idoneidad: suitable for (quantitative PCR)
• aplicaciones: agriculture
• compatibilidad: ABI 7000; ABI 7300; ABI 7500 Fast; ABI 7500; ABI 7700; ABI 7900 HT Fast; ABI 7900 HT; ABI 7900; ABI StepOne; ABI StepOnePlus; ABI ViiA 7 ; Bio-Rad CFX384; Bio-Rad CFX96; Bio-Rad MJ Chromo4; Bio-Rad MJ Opticon 2 ; Bio-Rad MJ Opticon; Bio-Rad MiniOpticon; Bio-Rad MyiQ; Bio-Rad iCycler iQ; Bio-Rad iQ 5; Cepheid SmartCycler; Eppendorf^® Mastercycler ep realplex ; Eppendorf^® Mastercycler ep realplex2 S; Illumina Eco qPCR; Qiagen Corbett Rotor-Gene 3000; Qiagen Corbett Rotor-Gene 6000; Qiagen Corbett Rotor-Gene Q; Roche LightCycler 480 ; Strategene Mx3000P; Strategene Mx3005P; Strategene Mx4000; for use with ABI 5700
• método de detección: SYBR^® Green
• Condiciones de envío: wet ice
• temp. de almacenamiento: −20°C

Descripción

Descripción general

La mezcla SYBR^® Green JumpStart^™ Taq ReadyMix^™ combina los mayores rendimientos del anticuerpo JumpStart Taq para PCR de inicio en caliente con SYBR Green y la comodidad de una disolución ReadyMix lista para usar. Esta mezcla lista para usar de SYBR Green I, ADN polimerasa Taq JumpStart, desoxinucleótidos puros al 99 % y tampón de reacción se suministra en una concentración x2 para facilitar su uso. Sólo tiene que añadir 25 μl de la mezcla ×2 a la plantilla de ADN, los cebadores y el agua. El anticuerpo JumpStart Taq inactiva la ADN polimerasa a temperatura ambiente. Cuando la temperatura se eleva por encima de 70 °C en la primera etapa de desnaturalización del proceso de ciclado, el complejo se disocia y la polimerasa se vuelve completamente activa. La ADN polimerasa Taq JumpStart evita la amplificación inespecífica lo que produce valores de C_T más precisos.

SYBR^® Green I es ideal para la cuantificación de cualquier secuencia de ADN. El colorante se une al ADN bicatenario y la detección se controla midiendo el aumento de florescencia durante el ciclo.

Aplicación

SYBR^® Green JumpStart^™ Taq ReadyMix^™ se ha utilizado:

• en PCR cuantitativa (qPCR) para amplificar una única área de conservación de todas las variantes de la proteína básica mielina (mbp), SRY-Box 10 (sox10), y los genes de la β-actina
• en PCR cuantitativa en tiempo real para detectar la acumulación del producto de la PCR en cada ciclo de amplificación
• en amplificaciones sistemáticas mediante qPCR de la plantilla de ADN y ADNc
• para amplificación de ARN mediante PCR-transcripción inversa cuantitativa en tiempo real (qRT-PCR)

Características y beneficios

• Ofrece los beneficios de la PCR de inicio en caliente con inactivación con anticuerpos y detección mediante SYBR Green en una mezcla preparada ideal para aplicaciones de gran rendimiento; sólo se requieren los cebadores y la plantilla
• La ADN polimerasa Taq JumpStart^™ evita la amplificación de productos inespecíficos, lo que produce una mayor eficiencia y un mayor rendimiento del producto deseado.
• La mezcla lista para usar SYBR^® Green JumpStart^™ Taq ReadyMix para qPCR con SYBR está formulada con MgCl₂ o envasada con un vial independiente para facilitar la optimización. Las mezclas ReadyMix son compatibles con equipos que funcionan con tubos y con placas.
• Esta mezcla maestra permite la uniformidad de una reacción a la siguiente
• Diseñada para minimizar la contaminación
• Dímeros del cebador reducidos
• Reducción del tiempo de configuración en comparación con los métodos manual o de cera HotStart^®
• Permite la configuración a temperatura ambiente y contiene un colorante fluorescente, que es ideal para aplicaciones de qPCR

Envase

El volumen de reacción predeterminado es de 50 μl

20RXN se envasa como 1 X 500 μl
100RXN se envasa como 1 X 2,5 ml
400RXN se envasa como 1 X 2,5 ml
500RXN se envasa como 1 X 12,5 ml

Principio

La mezcla maestra SYBR Green JumpStart Taq ReadyMix se recomienda para experimentos de amplificación en tiempo real de un solo producto y también puede utilizarse para la optimización de la PCR antes de la fabricación de las sondas marcadas con fluorescencia. No se recomienda utilizar sondas marcadas con fluorescencia con el colorante SYBR Green I.

El SYBR Green I, un colorante fluorescente de unión al ADN de uso habitual, se une a todo el ADN bicatenario y la detección se controla midiendo el aumento de la florescencia durante el ciclo. El SYBR Green I tiene un máximo de excitación en 494 nm y de emisión en 521 nm. La configuración del equipo para el colorante de referencia ROX es satisfactoria para la medición del colorante de referencia para PCR cuantitativa. La especificidad de la detección mediante QPCR con SYBR de Sigma aumenta notablemente por la incorporación de una polimerasa Taq de inicio en caliente, la JumpStart Taq.

Información legal

El empleo de este producto está cubierto por una o más de las siguientes patentes estadounidenses y las correspondientes reivindicaciones de patente fuera de los Estados Unidos: 5,994,056 y 6,171,785.. La adquisición de este producto incluye una inmunidad limitada intransferible contra pleitos según las reivindicaciones de patentes anteriores para utilizar sólo esta cantidad de producto para la propia investigación interna del comprador. No se transfiere expresamente, por implicación ni por estoppel derecho alguno sobre otra reivindicación de patente (como las reivindicaciones de aparato o de sistema de la patente estadounidense nº 6,814,934) ni derecho de realización de servicios comerciales de ningún tipo, entre otros, informar de los resultados de las actividades del comprador por un precio u otra consideración comercial. Este producto está indicado solo para investigación. Los usos diagnósticos bajo patentes de Roche requiere una licencia aparte de Roche. Para más información sobre las licencias de compra, contacte con el Director de Licencias, Applied Biosystems, 850 Lincoln Centre Drive, Foster City, California 94404, EE.UU.

Eppendorf is a registered trademark of Eppendorf AG

HOTSTART is a registered trademark of Molecular BioProducts, Inc.

JumpStart is a trademark of Sigma-Aldrich Co. LLC

ReadyMix is a trademark of Sigma-Aldrich Co. LLC

SYBR is a registered trademark of Life Technologies

Información de seguridad

• Pictogramas: GHS07,GHS09
• Palabra de señalización: Warning
• Frases de peligro: H315,H317,H319,H410
• Consejos de prudencia: P261 - P264 - P273 - P280 - P302 + P352 - P305 + P351 + P338
• Clasificaciones de peligro: Aquatic Acute 1 - Aquatic Chronic 1 - Eye Irrit. 2 - Skin Irrit. 2 - Skin Sens. 1
• Código de clase de almacenamiento: 10 - Combustible liquids
• Punto de inflamabilidad (°F): Not applicable
• Punto de inflamabilidad (°C): Not applicable