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CAS9D10ARFPP

Sigma-Aldrich

CMV-CAS9D10A-2A-RFP Plasmid

Sinónimos:

CAS9D10A Plasmid

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About This Item

Código UNSPSC:
41106609
NACRES:
NA.51

recombinante

expressed in E. coli

Nivel de calidad

200

envase

vial of 50 μL

concentración

20 ng/μL in TE buffer; DNA (1μg of plasmid DNA)

Promotor

Promoter name: CMV

gen reportero

RFP

Selección

kanamycin

Condiciones de envío

dry ice

temp. de almacenamiento

−20°C

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Descripción general

The Cas9-D10A nickase plasmid co-expressing RFP uses the CMV promoter for strong transient expression of Cas9-D10A. Alternate promoters can be substituted by replacement of CMV using MluI and NheI. Also, the Cas9D10A expression plasmids can be linearized using XbaI for T7-based mRNA production.

Aplicación

Functional Genomics
Use of Paired Cas9 Nickase + RFP for:
  • Creation of gene knockouts in multiple cell lines
  • Complete knockout of genes not amenable to RNAi
  • Creation of knock-in cell lines with promoters, fusion tags or reporters integrated into endogenous genes

Componentes

1 vial containing 1ug of Cas9-D10A Nickase-RFP plasmid.

Please note, this product does not contain any guide RNA sequence. A pair of gRNA plasmids must be purchased separately through the Custom CRISPR paired nickase product tab.

Forma física

2 ug of Sigma Cas9-D10A nickase-RFP plasmid

Otras notas

The type II CRISPR/Cas system from the bacterium Streptococcus pyogenes has been engineered to function in eukaryotic systems using two molecular components: a single Cas9 protein and a non-coding guide RNA (gRNA). The Cas9 endonuclease can be programmed with a single gRNA, directing a DNA double-strand break (DSB) at a desired genomic location. Similar to DSBs induced by zinc finger nucleases (ZFNs), the cell then activates endogenous DNA repair processes, either non-homologous end joining (NHEJ) or homology-directed repair (HDR), to heal the targeted DSB. RFP is co-expressed from the same mRNA as the Cas9 nickase protein via a 2A peptide linkage, enabling tracking of transfection efficiency and enrichment of genome editing activity in cell populations via fluorescence activated cell sorting (FACS).

Información legal

CRISPR Use License Agreement

Código de clase de almacenamiento

10 - Combustible liquids

Clase de riesgo para el agua (WGK)

nwg

Punto de inflamabilidad (°F)

Not applicable

Punto de inflamabilidad (°C)

Not applicable

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