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Proteinasa K from Tritirachium album

Highly active serine protease that exhibits broad cleavage specificity on native and denatured proteins and is widely used in the purification of DNA and RNA.

• Sinónimos: Endopeptidasa K
• Número de CAS: 39450-01-6
• Comisión internacional de enzimas: 3.4.21.64 (BRENDA, IUBMB)
• Número MDL: MFCD00132129
• Código UNSPSC: 12352202
• NACRES: NA.85

Propiedades

• Nivel de calidad: 400
• formulario: solid
• mol peso: 28.93 kDa
• fabricante / nombre comercial: Novagen^®
• condiciones de almacenamiento: OK to freeze
• técnicas: DNA extraction: suitable
• Condiciones de envío: wet ice
• temp. de almacenamiento: 2-8°C

Descripción

Descripción general

Proteinase K is a highly active 28,904-Daserine protease isolated from the fungusTritirachium album. The enzyme exhibitsbroad cleavage specificity on native anddenatured proteins and is widely used in thepurification of DNA and RNA. Its activityis increased in the presence of denaturantssuch as SDS (1%) and elevated temperature(50-60°C). The recommended workingconcentration is 50-100 µg/ml for proteinremoval and enzyme inactivation, and up to2 mg/ml for tissue treatment. The Proteinase K,Lyophilized powder can be prepared as a20 mg/ml stock solution in water and storedin aliquots at -20°C. The enzyme is alsoavailable as a ready-to-use concentrated stocksolution (600 mAU/ml) that is convenientfor routine use in most applications. 1 mgof Proteinase K is the equivalent of 30 mAU(AU = Anson unit). The Novagen ProteinaseK products are free of detectable DNase andRNase

Aplicación

Útil para la inactivación proteolítica de nucleasas durante el aislamiento de ADN y ARN.
Elimina las endotoxinas que se unen a las proteínas catiónicas como la lisozima y la ribonucleasa A.
Se ha comunicado que es útil para el aislamiento de mitocondrias hepáticas, de levadura y de frijol mung
Determinación de la localización de las enzimas en las membranas
Tratamiento de cortes de tejido incluidos en parafina para exponer los sitios de unión de antígenos para el marcado con anticuerpos.
Digestión de proteínas de muestras de tejido cerebral para investigación de los priones en las encefalopatías espongiformes transmisibles (EET).

Acciones bioquímicas o fisiológicas

La proteinasa K es una serín proteasa estable y muy reactiva. La evidencia procedente de estudios de la estructura cristalina y molecular indica que la enzima pertenece a la familia subtilisina con una tríada catalítica en el sitio activo (ASP³⁹-HIS⁶⁹-ser²²⁴). Es estable en una amplia variedad de entornos: pH, sales amortiguadoras, detergentes (SDS) y temperatura. En presencia de SDS al 0,1 - 0,5 %, la proteinasa K conserva su actividad y digerirá una variedad de proteínas y nucleasas en preparaciones de ADN sin comprometer la integridad del ADN aislado.

Advertencia

Toxicity: Harmful (C)

Definición de unidad

One AU (AU = Anson unit) is defined as the amount of enzyme that liberates 1.0 µmol (181 µg) of tyrosine from casein per minute at pH 7.5 at 37°C.

Información legal

NOVAGEN is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

Información de seguridad

• Pictogramas: GHS08,GHS07
• Palabra de señalización: Danger
• Frases de peligro: H315,H319,H334,H335
• Consejos de prudencia: P261 - P264 - P271 - P280 - P302 + P352 - P305 + P351 + P338
• Clasificaciones de peligro: Eye Irrit. 2 - Resp. Sens. 1 - Skin Irrit. 2 - STOT SE 3
• Órganos de actuación: Respiratory system
• Código de clase de almacenamiento: 11 - Combustible Solids
• Clase de riesgo para el agua (WGK): WGK 1
• Punto de inflamabilidad (°F): Not applicable
• Punto de inflamabilidad (°C): Not applicable