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KCQS08

Sigma-Aldrich

KiCqStart® One-Step Probe RT-qPCR ReadyMix™, ROX Low™

with Low ROX for ABI and Stratagene instruments

Synonym(e):

KiCqStart® One Step Probe RT-qPCR Readymix™

Anmeldenzur Ansicht organisationsspezifischer und vertraglich vereinbarter Preise
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About This Item

UNSPSC-Code:
41106300
NACRES:
NA.55

Form

liquid

Verwendung

sufficient for 500 reactions

Leistungsmerkmale

dNTPs included
hotstart

Lagerbedingungen

protect from light

Methode(n)

qPCR: suitable

Farbe

light blue

Aufnahme

purified RNA

Kompatibilität

ABI 7500 Fast
 ABI 7500
 ABI QuantStudio
 ABI ViiA 7
 Agilent AriaMx
 Douglas Scientific IntelliQube
 Qiagen Corbett Rotor-Gene Q
 Strategene Mx3000P
 Strategene Mx3005P
 Strategene Mx4000

Nachweisverfahren

probe-based

Versandbedingung

dry ice

Lagertemp.

−20°C

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Allgemeine Beschreibung

KiCqStart® One-Step Probe RT-qPCR ReadyMix™ ist ein gebrauchsfertiger, hochempfindlicher Master-Mix zur quantitativen Reverse-Transkriptase-PCR (RT-qPCR) von RNA-Templates mittels Hybridisierungssonden-Nachweischemikalien wie z. B. TaqMan® 5′-Hydrolysesonden bei Einsatz von Echtzeit-PCR-Systemen (Informationen zur Auswahl der geeigneten Reagenz für Ihre Maschine finden Sie im Abschnitt zur Gerätekompatibilität). Erststrang-cDNA-Synthese und PCR-Amplifikation werden im selben Röhrchen durchgeführt, ohne dass das Röhrchen zwischen den Verfahren geöffnet werden muss. Es eignet sich ideal zur hochempfindlichen Quantifizierung von RNA-Viren oder niedrig abundanten RNA-Zielen sowie für Genexpressionsstudien mit hohem Durchsatz. Das System wurde so optimiert, dass es bei der RT-PCR maximale Effizienz, Sensitivität und Spezifität mit geringeren Reaktionsvolumen und kürzeren Durchlaufzeiten aufweist.

KiCqStart® One-Step Probe RT-qPCR ReadyMix™ enthält alle zur RT-qPCR benötigten Bestandteile mit Ausnahme von RNA-Template und RNA-Sonde. Es ist mit allen doppelt markierten Sondenchemikalien kompatibel. Die reverse Transkriptase ist ein modifiziertes M-MLV mit reduzierter RNase-H-Aktivität und verbesserter Aktivität und Stabilität bei hohen Temperaturen. Der Einsatz hoher Temperaturen (50 bis 55 °C) beim Erststrangschritt der einstufigen RT-qPCR führt zu einer höheren Spezifität für das Primer-Annealing und zu einer Unterbrechung der RNA-Sekundärstruktur, die die cDNA-Synthese beeinträchtigen kann.

KiCqStart® One-Step Probe RT-qPCR ReadyMix™ ist höchst resistent gegenüber PCR-Hemmern. Ein wichtiger Bestandteil von ReadyMix™ ist eine hochreine, hochprozessive und wärmebeständige DNA-Polymerase, die mit hochaviden monoklonalen Antikörpern kombiniert ist. Dadurch wird ein extrem starker automatischer Heißstart erzielt, der die Möglichkeit von Primer-Dimeren und anderen nichtspezifischen PCR-Artefakten stark reduziert. Die hellblaue Farbe des Inertfarbstoffs vereinfacht die Mischung der Reagenzien in weißen oder farblosen Platten und trägt dazu bei, Pipettier- und Mischfehler zu reduzieren. Der Farbstoff hat keinen Einfluss auf die qPCR-Leistung oder die Stabilität des Produkts.

Anwendung

Verschiedene Echtzeit-PCR-Systeme nutzen verschiedene Strategien für die Normalisierung von Fluoreszenzsignalen und die Korrektur optischer Variationen zwischen den Wells. Es ist äußerst wichtig, das geeignete qPCR-Reagenz für Ihr spezifisches Gerät zu wählen. KiCqStart® One-Step Probe RT-qPCR ReadyMix™ enthält keinen internen Referenzfarbstoff. Kompatible Geräte sind u. a.:
  • Applied Biosystems® 7500
  • Applied Biosystems 7500 Fast
  • Applied Biosystems ViiA 7
  • Applied Biosystems QuantStudio
  • Agilent® AriaMx
  • Douglas Scientific IntelliQube
  • QIAGEN® Rotor-Gene® Q
  • Stratagene Mx3000P®
  • Stratagene Mx3005P®
  • Stratagene Mx4000™

Leistungsmerkmale und Vorteile

  • Assay-Ergebnisse in nur 33 Minuten
  • Hocheffiziente und empfindliche Echtzeit-PCR-Ergebnisse
  • Wenig bis keine Optimierung erforderlich

Komponenten

2x Reaktionspuffer mit dATP, dCTP, dGTP, dTTP, Magnesiumchlorid, reverser Transkriptase, RNase-Inhibitorprotein, Heißstart-DNA-Polymerase, ROX-Referenzfarbstoff, blauem qPCR-Inertfarbstoff und Stabilisatoren

Verpackung:
500 Reaktionen* = 5 x 1-mL-Röhrchen
* Anzahl der Reaktionen auf Grundlage eines Volumens von 20 μL

Rechtliche Hinweise

Agilent is a registered trademark of Agilent Technologies, Inc.
Applied Biosystems is a registered trademark of Applera Corporation or its subsidiaries in the US and/or certain other countries
KiCqStart is a registered trademark of QIAGEN Beverly Inc.
Mx3000P is a registered trademark of Agilent Technologies, Inc.
Mx3005P is a registered trademark of Agilent Technologies, Inc.
Mx4000 is a trademark of Agilent Technologies, Inc.
Qiagen is a registered trademark of Qiagen Group
ROX is a trademark of Applera Corporation or its subsidiaries in the US and/or certain other countries
ReadyMix is a trademark of Sigma-Aldrich Co. LLC
Rotor-Gene is a registered trademark of Qiagen GmbH
TaqMan is a registered trademark of Roche Molecular Systems, Inc.

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Lagerklassenschlüssel

10 - Combustible liquids

WGK

WGK 3

Flammpunkt (°F)

Not applicable

Flammpunkt (°C)

Not applicable

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Tyler J Kirby et al.
Physiological genomics, 48(2), 145-153 (2015-12-17)
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Tyler J Kirby et al.
Molecular biology of the cell, 27(5), 788-798 (2016-01-15)
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KiCqStart™ One-Step Probe RT-qPCR ReadyMix™

KiCqStart One-Step Probe RT-qPCR ReadyMix is a ready-to-use, highly sensitive master mix for reverse transcription quantitative PCR (RT-qPCR) of RNA templates using hybridization probe detection chemistries such as TaqMan 5'-hydrolysis probes on real-time PCR systems.

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