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KAPA SYBR^® FAST One-Step

suitable for RT-PCR, 2 ×, Universal

• Synonym(e): SYBR, qPCR
• UNSPSC-Code: 41106300
• NACRES: NA.55

Eigenschaften

• Qualitätsniveau: 100
• Verwendung: sufficient for 100 reactions; sufficient for 1000 reactions; sufficient for 500 reactions
• Haltbarkeit: ≤6 mo.
• Leistungsmerkmale: dNTPs included: no; hotstart: no
• Verpackung: kit of 1 mL (100 x 20 μL rxn; KK4650); kit of 10 mL (1000 x 20 μL rxn; KK4652); kit of 5 mL (500 x 20 μL rxn; KK4651)
• Hersteller/Markenname: Roche
• Konzentration: 2 ×
• Methode(n): RT-PCR: suitable; qPCR: suitable
• Aufnahme: purified DNA
• Kompatibilität: for use with Agilent Mx3000P; for use with Agilent Mx3005P; for use with Agilent Mx4000; for use with Applied Biosystems^® 5700; for use with Applied Biosystems^® 7000; for use with Applied Biosystems^® 7300; for use with Applied Biosystems^® 7500; for use with Applied Biosystems^® 7700; for use with Applied Biosystems^® 7900HT; for use with Applied Biosystems^® ViiA 7; for use with QuantStudio^™; for use with StepOne^™; for use with StepOnePlus^™
• Nachweisverfahren: SYBR^® Green
• Lagertemp.: −20°C

Beschreibung

Allgemeine Beschreibung

Die KAPA SYBR FAST One-Step qRT-PCR-Kits wurden für eine optimale Leistung unter strengen Echtzeit-PCR-Reaktionsbedingungen entwickelt und zeigen enorme Verbesserungen der Sensitivität, Spezifität, Reaktionseffizienz und Fluoreszenz. Das Kit wurde für die schnelle RNA-Bestimmung in einem einzigen Schritt und mit einem einzigen Röhrchen optimiert. Die experimentelle Varianz und Kontamination wird dabei mit einem praktischen Echtzeit-PCR-Protokoll reduziert.

KAPA SYBR FAST One-Step qRT-PCR-Kits enthalten M-MuLV reverse Transkriptase, RNase-Hemmer und eine neuartige DNA-Polymerase, die durch gerichtete Evolution weiterentwickelt wurde.

Anwendung

KAPA SYBR^® FAST-One-Step

• Genexpressions-Analyse
• Detektion von Genen mit niedriger Kopienzahl
• Microarray-Validierung in der microRNA-Forschung
• Gen-Knock-Down-Validierungen
• Echtzeit-qRT-PCR (quantitative Reverse-Transkriptase-PCR)
• RNAi- und miRNA-Forschung

Leistungsmerkmale und Vorteile

Höhere Signal- und Reaktionseffizienz

• Konstant höhere Amplifikationseffizienz für eine genaue Echtzeit-PCR.
• Höhere Fluoreszenz, frühere Cq-Werte und verbesserte Reaktionseffizienz

Amplifikation über einen weiten Bereich von Ziellängen

• Robuste Leistung unabhängig von der Amplikon-Größe
• Verbesserte Sensitivität und Reproduzierbarkeit
• Zuverlässige Abfragen über einen weiten Bereich von RNA-Template-Konzentrationen.

Kurzanmerkungen:

• Dieses Kit enthält wildtypisches M-MuLV und ein technisch hergestelltes Enzym, das für die qPCR unter Verwendung der SYBR Green-I-Farbstoffchemie optimiert wurde.
• Der 2X-Master-Mix enthält einen proprietären Puffer. In Kombination mit dem neuartigen Enzym wird die Amplifikationseffizienz sowohl für GC- als auch für AT-reiche Targets verbessert.
• Nur mit genspezifischen Primern für Ein-Schritt-qRT-PCR.
• Eine optimale cDNA-Synthese wird bei 42° C in 5 Minuten erreicht.
• 3 Minuten bei 95° C sind ausreichend für RT-Inaktivierung und DNA-Polymerase-Aktivierung.
• Für einen 3-Schritt-Zyklus sind 20 s für das Primer-Annealing und 1 s für die Extension/Datenerfassung bei 72 °C zu verwenden.
• Das Reaktionsvolumen darf 25 μL nicht überschreiten.

Qualität

Alle Kit-Komponenten werden einer strengen funktionellen Qualitätskontrolle unterzogen, sind frei von nachweisbarer kontaminierender Exo- und Endonukleaseaktivität und erfüllen strenge Anforderungen hinsichtlich der DNA-Kontamination.

Angaben zur Herstellung

Stellen Sie stets sicher, dass die Komponenten vor der Verwendung vollständig aufgetaut und gut gemischt sind. KAPA SYBR^® FAST qPCR-Master-Mix (2X) gefriert möglicherweise auch bei einer Lagerung von -20 °C nicht vollständig. Der KAPA RT-Mix ist temperaturempfindlich und sollte bei -20° C gelagert und während der Verwendung auf Eis gelegt werden.

Der im KAPA SYBR FAST qPCR-Master-Mix (2X) enthaltene Farbstoff SYBR Green I und die ROX-/Fluorescein-Farbstoffe (je nach Kit-Konfiguration) sind lichtempfindlich. Direkte Lichteinwirkung über einen längeren Zeitraum führt zum Verlust der Intensität des Fluoreszenzsignals.

KAPA SYBR FAST qPCR Master Mix (2X) bleibt über 30 Gefrier-/Auftauzyklen hinweg stabil. Stellen Sie bei Nichtgebrauch der Reagenzien sicher, dass diese bei -20 °C vor Lichteinwirkung geschützt gelagert werden. Bei lichtgeschützter Lagerung sind die Reagenzien bei 4 °C für mindestens eine Woche lang stabil und können bei dieser Temperatur für den baldigen Gebrauch unter der Voraussetzung gelagert werden, dass sie nicht mit Mikroben und/oder Nukleasen kontaminiert werden.

Sonstige Hinweise

Nur für Forschungszwecke. Nicht zur Verwendung in diagnostischen Verfahren vorgesehen.

Rechtliche Hinweise

Applied Biosystems is a registered trademark of Applera Corporation or its subsidiaries in the US and/or certain other countries

QuantStudio is a trademark of IROA Technologies LLC

SYBR is a registered trademark of Life Technologies

StepOne is a trademark of Applera Corporation or its subsidiaries in the US and/or certain other countries

StepOnePlus is a trademark of Applera Corporation or its subsidiaries in the US and/or certain other countries

Nur Kit-Komponenten

• KAPA RT Mix
• dUTP
• KAPA SYBR^® FAST DNA Polymerase
• reaction buffer
• dNTPs
• SYBR^® Green I dye
• MgCl₂ 2.5 mM

Sicherheitshinweise

• Piktogramme: GHS08
• Signalwort: Warning
• H-Sätze: H371
• P-Sätze: P260 - P264 - P270 - P308 + P311 - P405 - P501
• Gefahreneinstufungen: STOT SE 2
• Lagerklassenschlüssel: 12 - Non Combustible Liquids
• WGK: WGK 1
• Flammpunkt (°F): does not flash
• Flammpunkt (°C): does not flash