KCQS07

KiCqStart^® One-Step Probe RT-qPCR ReadyMix^™

for Bio-Rad, Cepheid, Eppendorf, Illumina, Corbett, and Roche systems

• Synonym(e): KiCqStart^® One Step Probe RT-qPCR Readymix^™
• UNSPSC-Code: 41106300

Eigenschaften

• Form: liquid
• Verwendung: sufficient for 500 reactions
• Leistungsmerkmale: dNTPs included; hotstart
• Lagerbedingungen: protect from light
• Methode(n): qPCR: suitable
• Farbe: light blue
• Aufnahme: purified RNA
• Kompatibilität: Bio-Rad CFX384; Bio-Rad CFX96; Bio-Rad MJ Chromo4; Bio-Rad MJ Opticon 2; Bio-Rad MJ Opticon; Bio-Rad MiniOpticon; Eppendorf^® Mastercycler ep realplex2 s; Eppendorf^® Mastercycler ep realplex; Illumina Eco qPCR; Qiagen Corbett Rotor-Gene 3000; Qiagen Corbett Rotor-Gene 6000; Qiagen Corbett Rotor-Gene Q; Roche LightCycler 480
• Nachweisverfahren: probe-based
• Versandbedingung: dry ice
• Lagertemp.: −20°C

Beschreibung

Allgemeine Beschreibung

KiCqStart^® One-Step Probe RT-qPCR ReadyMix^™ ist ein gebrauchsfertiger, höchst empfindlicher Master-Mix für die quantitative Reverse-Transkription-PCR (RT-qPCR) von RNA-Templates, bei der Hybridisierungssonden als Nachweischemikalien, z. B. TaqMan^® 5′-Hydrolysesonden auf Echtzeit-PCR-Systemen (siehe Abschnitt Instrumentenkompatibilität zur Auswahl des für Ihr Instrument geeigneten Reagenz), eingesetzt werden. Erststrang-cDNA-Synthese und PCR-Amplifikation finden im selben Röhrchen ohne Öffnen zwischen den Verfahren statt. Er ist zur höchst empfindlichen Quantifizierung von RNA-Viren oder von RNA-Zielen geringer Abundanz sowie für durchsatzhohe Genexpressionsstudien ideal geeignet. Das System wurde im Hinblick auf maximale RT-PCR-Wirksamkeit, Sensitivität und Spezifität bei reduziertem Reaktionsvolumen und schnellen Zykluszeiten optimiert.

KiCqStart^® One-Step Probe RT-qPCR ReadyMix^™ enthält alle für die RT-qPCR erforderlichen Komponenten außer RNA-Template und Sonde. Das System ist mit allen dual-markierten Sondenchemien kompatibel. Die reverse Transkriptase ist ein technisch hergestelltes M-MLV mit reduzierter RNase-H-Aktivität und einer verbesserten Aktivität und Stabilität bei höheren Temperaturen. Durch Einsatz von höheren Temperaturen (50 bis 55 °C) für den Erststrang-Schritt einer einstufigen RT-qPCR wird eine höhere Spezifität für das Primer-Annealing und die Unterbrechung der RNA-Sekundärstruktur erreicht, die die cDNA-Synthese beeinträchtigen kann.

KiCqStart^® One-Step Probe RT-qPCR ReadyMix^™ ist PCR-Inhibitoren gegenüber höchst resistent. Eine wichtige Komponente des ReadyMix^™ ist eine ultrareine, höchst prozessive, thermostabile DNA-Polymerase, die mit monoklonalen Antikörpern hoher Avidität kombiniert ist. Dadurch wird ein extrem strikter automatischer Heißstart ermöglicht, der das Potenzial für Primer-Dimere und andere unspezifische PCR-Artefakte minimiert. Die hellblaue Farbe des inerten Farbstoffs vereinfacht den Reaktionsaufbau auf weißen oder durchsichtigen Platten und minimiert das Auftreten von Fehlern beim Pipettieren oder Mischen. Der Farbstoff beeinträchtigt weder die qPCR-Leistung noch die Stabilität des Produkts.

Anwendung

KiCqStart^® One-Step Probe RT-qPCR ReadyMix^™ wird wie folgt verwendet:

• bei der quantitativen Echtzeit-Polymerase-Kettenreaktion (qrt-PCR) für Genexpressionsstudien
• bei der zelltypspezifischen Transkriptanalyse zum Bestimmen des Ct-Werts
• beim Nachweis von SARS-CoV-2-RNA aus nasopharyngealen und oropharyngealen Abstrichen
• bei der Amplifikation von revers transkribierter cDNA

Leistungsmerkmale und Vorteile

• Testergebnisse innerhalb von 33 Minuten
• Höchst effiziente und empfindliche PCR-Ergebnisse in Echtzeit
• Wenig/keine Optimierung notwendig

Komponenten

2X Reaktionspuffer mit dATP, dCTP, dGTP, dTTP, Magnesiumchlorid, reverser Transkriptase, RNase-Inhibitor-Protein, Heißstart-DNA-Polymerase, inertem blauem qPCR-Farbstoff und Stabilisatoren

Verpackung:
500 Reaktionen* = 5 X 1-mL-Röhrchen
* Anzahl der Reaktionen auf Grundlage eines Volumens von 20 μL

Sonstige Hinweise

Verschiedene Echtzeit-PCR-Systeme nutzen verschiedene Strategien für die Normalisierung von Fluoreszenzsignalen und zur Korrektur optischer Abweichungen zwischen den Wells. Es ist entscheidend, das geeignete qPCR-Reagenz für Ihr spezifisches Instrument zu wählen. KiCqStart^® einstufiger RT-qPCR ReadyMix^™ für Sonden enthält keinen internen Referenzfarbstoff. Kompatible Instrumente sind:

• Bio-Rad^® CFX384^™
• Bio-Rad CFX96^™
• Bio-Rad MiniOpticon^™
• Bio-Rad/MJ Chromo4^™
• Bio-Rad/MJ Opticon 2
• Bio-Rad/MJ Opticon^™
• Cepheid SmartCycler^®
• Eppendorf Mastercycler^® ep realplex
• Eppendorf Mastercycler ep realplex2 s
• Illumina Eco qPCR
• Qiagen/Corbett Rotor-Gene^® 3000
• Qiagen/Corbett Rotor-Gene 6000• Qiagen/Corbett Rotor-Gene Q
• Roche LightCycler^® 480

Rechtliche Hinweise

Bio-Rad is a registered trademark of Bio-Rad Laboratories, Inc.

CFX384 is a trademark of Bio-Rad Laboratories, Inc.

CFX96 is a trademark of Bio-Rad Laboratories, Inc.

Chromo4 is a trademark of Bio-Rad Laboratories, Inc.

Eppendorf is a registered trademark of Eppendorf AG

KiCqStart is a registered trademark of QIAGEN Beverly Inc.

LightCycler is a registered trademark of Roche

Mastercycler is a registered trademark of Eppendorf AG

MiniOpticon is a trademark of Bio-Rad Laboratories, Inc.

Opticon is a trademark of Bio-Rad Laboratories, Inc.

ReadyMix is a trademark of Sigma-Aldrich Co. LLC

Rotor-Gene is a registered trademark of Qiagen GmbH

SmartCycler is a registered trademark of Cepheid, Inc.

TaqMan is a registered trademark of Roche Molecular Systems, Inc.

Sicherheitshinweise

• Lagerklassenschlüssel: 12 - Non Combustible Liquids
• WGK: WGK 3
• Flammpunkt (°F): Not applicable
• Flammpunkt (°C): Not applicable