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DNA- & RNA-Aufreinigung

Struktur der DNA - es werden verschiedene Methoden für die DNA-Aufreinigung verwendet.

Die Extraktion von DNA und RNA ist eine grundlegende Methode in der Molekularbiologie. Hochwertige, hochreine Nukleinsäure ist wichtig für zahlreiche Forschungs- und klinische Anwendungen. Die Nukleinsäureaufreinigung ist ein erster Schritt in vielen molekularbiologischen und genomischen Arbeitsabläufen. 

DNA- und RNA-Proben werden oftmals aus Rohpräparaten gewonnen. Genomische DNA, Plasmid-DNA und Gesamt-RNA können aus verschiedenen Quellen extrahiert werden. Dazu gehören Bakterien- und Säugerzellen, Pflanzengewebe, Schimmelpilzgewebe, Säugergewebe, Blut, Plasma, Serum, Viren, Wangen- und Nasenabstriche, Gelmatrizen, PCR und andere enzymatische Reaktionen. Die Isolierung von Nukleinsäure aus diesen Proben beinhaltet oftmals eine Lyse von Zellmembranen oder Probenhomogenisierung, gefolgt von der Entfernung von Proteinen, Enzymen, Detergenzien, Salzen und Lipiden. 

Gebräuchliche Methoden umfassen:

  • Alkalische Extraktion
  • Phenol-Chloroform-Extraktion
  • Cäsiumchlorid(CsCl)-Dichtegradientenzentrifugation
  • Oligo(dT)-Zellulose-Chromatographie
  • Kieselsäure-Matrices
  • Glas-Beads
  • Kieselgur
  • Anionenaustauschchromatographie
  • Größenausschlusschromatographie


Die beste Aufreinigungsmethode wird durch die abschließende Anwendung bestimmt. Zu den Downstream-Anwendungen gehören PCR, qPCR, Restriktionsverdau, Ligation, Klonierung, Genotypisierung, Genexpressionsanalyse, Next Generation Sequencing (NGS) und Northern/Southern Blots.


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