MABN750

Anticorpo anti-VANGL2, clone 2G4

clone 2G4, from rat

• Sinonimo/i: Vang-like protein 2, Loop-tail-associated protein, Loop-tail protein 1, Strabismus 1, Van Gogh-like protein 2
• Codice UNSPSC: 12352203
• eCl@ss: 32160702
• NACRES: NA.41

Proprietà

• Origine biologica: rat
• Livello qualitativo: 100
• Forma dell’anticorpo: purified immunoglobulin
• Tipo di anticorpo: primary antibodies
• Clone: 2G4, monoclonal
• Reattività contro le specie: human, mouse
• Reattività contro le specie (prevista in base all’omologia): rat (based on 100% sequence homology), bovine (based on 100% sequence homology)
• tecniche: ELISA: suitable; immunofluorescence: suitable; immunoprecipitation (IP): suitable; western blot: suitable
• Isotipo: IgG2aκ
• N° accesso NCBI: NP_277044
• N° accesso UniProt: Q91ZD4
• Condizioni di spedizione: ambient
• modifica post-traduzionali bersaglio: unmodified
• Informazioni sul gene: human ... VANGL2(57216) ; mouse ... Vangl2(93840)

Descrizione

Descrizione generale

La proteina Vang-like 2 (UniProt Q91ZD4; denominata anche Loop-tail-associated protein, Loop-tail protein 1, Van Gogh-like protein 2) nelle specie murine è codificata dal gene Vangl2 (chiamato anche Lpp1, Ltap, Stb1, Stbm) (Gene ID 93840). Nel mammifero le proteine del tipo Van Gogh (VANGL1 & VANGL2) sono ortologhe delle proteine di Drosophila codificate dal gene Vangl/Strabismus, originariamente identificato come gene del core responsabile della polarità planare delle cellule (PCP). VANGL1 & VANGL2 sono proteine della via di WNT/PCP, che è cruciale per la regolazione della polarità cellulare e dei movimenti direzionali che intervengono nella morfogenesi tissutale e nello sviluppo embrionale. La PCP interviene nella chiusura del tubo neurale, nell′orientamento del fascio di stereocilia delle cellule sensoriali dell′orecchio interno e delle cilia mobili del nodo embrionale, oltre che nella divisione cellulare asimmetrica. Negli embrioni umani con difetti del tubo neurale (NTD) gravi sono state identificate mutazioni missenso di VANGL1 e VANGL2. Similmente, nei topi la mutazione omozigote loop-tail omozigote (Lp/Lp) causa difetti di morfogenesi e modellamento in numerosi tessuti, come nel caso della forma più grave di difetto del tubo neurale (craniorachischisi). VANGL1 e VANGL2, entrambe proteine di membrana caratterizzate da 4 domini transmembrana (aa 109-129, 148-168, 179-199 a 218-238 in VANGL2 murina) e con estremità N- e C-terminali citoplasmatiche (aa 1-108 e 239-521 in VANGL2 murina), mostrano pattern di espressione sovrapponibili, ma non identici, nel cervello di topo. Entrambe le proteine possono formare omo- o eterodimeri, originando complessi differenti durante l′embriogenesi.

Specificità

Il clone 2G4 riconosce specificamente VANGL2 ma non VANGL1. Utilizzando il clone 2G4, è stata evidenziata la modulazione negativa (down-regulation) del gene VANGL2 mediata da siRNA specifico per VANGL2 in cellule di carcinoma mammario umano SK-BR-7 (Belotti, E., et al. (2012). PLoS One. 7(9):e46213).

Immunogeno

Il frammento N-terminale di VANGL2 ricombinante marcato con tag GST è conservato al 100% nelle specie umana, murina e di ratto.

Applicazioni

Analisi ELISA: il clone 2G4, ottenuto dal surnatante di una coltura di ibridoma, ha permesso di rivelare in modo specifico il frammento N-terminale della proteina di fusione VANGL2-GST, ma non di VANGL1 (Belotti, E., et al. (2012). PLoS One. 7(9):e46213).

Immunofluorescenza: un lotto rappresentativo ha rivelato la co-localizzazione dell′immunoreattività di VANGL2 e di VANGL1 a livello della membrana cellulare dei fasci di stereocilia delle cellule sensoriali mediante immunoistochimica in fluorescenza di sezioni “whole mount” di coclea fissate in paraformaldeide 4%. Nelle sezioni tissutali di topi con mutazione omozigote di Vangl2 Looptail (Lp/Lp) l′espressione di VANGL2 è risultata drasticamente ridotta (Belotti, E., et al. (2012). PLoS One. 7(9):e46213).

Immunoprecipitazione: con un lotto rappresentativo è stata ottenuta l′immunoprecipitazione sia della forma endogena di VANGL2 sia del frammento N-terminale della proteina di fusione VANGL2-GST, ma non di VANGL1, da cellule di carcinoma mammario umano SK-BR-7 trattate con siRNA specifico per VANGL2 (Belotti, E., et al. (2012). PLoS One. 7(9):e46213).

Western blotting: con un lotto rappresentativo è stata rivelata (fluorescenza gialla) la presenza della proteina VANGL2 sia endogena che esogena marcata con tag Venus in cellule di leucemia linfocitica cronica (CLL) MEC1 transfettate (Kaucká, M., et al. (2015). Cell Commun Signal. 13:2).

Western blotting: con un lotto rappresentativo è stata ottenuta l′a rivelazione sia della forma endogena di VANGL2 sia del frammento N-terminale della proteina di fusione VANGL2-GST, ma non di VANGL1, in un lisato di cellule di carcinoma mammario umano SK-BR-7 trattate con siRNA specifico per VANGL2 (Belotti, E., et al. (2012). PLoS One. 7(9):e46213).

Western blotting: un lotto rappresentativo ha permesso di rivelare livelli superiori di espressione della proteina VANGL2 nel tessuto cerebrale e polmonare rispetto a quello renale nel topo. Nei topi portatori di mutazione eterozigote di Vangl2 Looptail (Lp) l′espressione di VANGL2 a livello cocleare risulta ridotta e tale diminuzione è ancora più marcata nei topi con mutazione omozigote (Lp/Lp) (Belotti, E., et al. (2012). PLoS One. 7(9):e46213).

Categoria di ricerca
Neuroscienze

L′anticorpo anti-VANGL2, clone 2G4, N° Cat. MABN750, è un anticorpo monoclonale di ratto altamente specifico diretto contro la proteina VANGL2 ed è stato testato in saggi di ELISA, immunofluorescenza, immunoprecipitazione e Western blotting.

Qualità

Valutata mediante Western blotting su lisato di tessuto cerebrale di topo.

Western blotting: una diluizione 1:500 di questo anticorpo ha rilevato VANGL2 in 10 µg di lisato di tessuto cerebrale di topo.

Descrizione del bersaglio

Visualizzato a circa 60 kDa. Calcolato a 59,71 kDa (uomo) e 59,77 (ratto & topo). In alcuni lisati possono essere osservate bande non caratterizzate.

Stato fisico

Formato: purificato

IgG2a purificate di ratto in tampone contenente Tris-glicina (pH 7,4) 0,1 M, NaCl 150 mM con azoturo di sodio 0,05%.

Purificato con proteina G.

Stoccaggio e stabilità

Stabile per 1 anno a 2-8 °C dalla data di ricevimento.

Altre note

Concentrazione: fare riferimento alla scheda tecnica specifica del lotto.

Esclusione di responsabilità

Salvo diversa indicazione nel nostro catalogo o in altra documentazione fornita dall′azienda insieme al prodotto, i nostri prodotti sono destinati esclusivamente a scopi di ricerca e non devono essere utilizzati per altre finalità, inclusi a titolo esemplificativo ma non esaustivo, fini commerciali non autorizzati, applicazioni diagnostiche in vitro, usi terapeutici ex vivo o in vivo o qualsiasi altro tipo di assunzione o applicazione rivolta agli esseri umani o agli animali.

Informazioni sulla sicurezza

• Codice della classe di stoccaggio: 12 - Non Combustible Liquids
• Classe di pericolosità dell'acqua (WGK): WGK 1
• Punto d’infiammabilità (°F): Not applicable
• Punto d’infiammabilità (°C): Not applicable