ECM103

Human Laminin

MILLICOAT^® Human Laminin Coated Strips (96-Wells), suitable for cell culture

• Sinonimo/i: Formerly under the CytoMatrix ™ brand name.
• Codice UNSPSC: 12352202
• eCl@ss: 32161000
• NACRES: NA.75

Proprietà

• product name: Strisce rivestite di laminina umana Millicoat^® (96 pozzetti), 96-well plate coated with human laminin used for cell adhesion studies.
• Livello qualitativo: 100
• Reattività contro le specie: human
• Produttore/marchio commerciale: Chemicon^®; Millicoat^®
• tecniche: activity assay: suitable; cell based assay: suitable
• input: sample type neural stem cell(s); sample type hematopoietic stem cell(s); sample type: mouse embryonic stem cell(s); sample type mesenchymal stem cell(s); sample type induced pluripotent stem cell(s); sample type: human embryonic stem cell(s); sample type pancreatic stem cell(s); sample type epithelial cells
• N° accesso NCBI: NM_002291.1
• N° accesso UniProt: P07942
• Metodo di rivelazione: colorimetric
• Condizioni di spedizione: wet ice

Descrizione

Descrizione generale

L′adesione cellulare riveste un ruolo centrale nella comunicazione tra le cellule e nella loro regolazione ed è di importanza fondamentale nello sviluppo e nel mantenimento dei tessuti. Un campo di interesse per i ricercatori è rappresentato dai processi di adesione, migrazione e invasione di molti diversi tipi cellulari su svariate proteine che compongono la matrice extracellulare (ECM). Le strisce di adesione cellulare Millicoat sono fornite come strisce rimovibili da 12 x 8 pozzetti in un telaio per piastre, per una maggiore praticità e flessibilità nella progettazione dei saggi. I pozzetti delle file A - G sono stati rivestiti con laminina umana. La riga H di ciascuna striscia è rivestita con BSA, che funge da controllo negativo del test. Le cellule vengono seminate sul substrato rivestito. Successivamente, le cellule aderenti vengono fissate e colorate. L′adesione cellulare relativa si calcola utilizzando misurazioni di assorbanza.

Applicazioni

Categoria di ricerca
Struttura cellulare

Procedura:

NOTA: I tempi e le prestazioni ottimali del saggio possono variare a seconda delle linee cellulari, ma in genere possono essere ottenuti utilizzando colture cellulari subconfluenti nel saggio descritto di seguito. Le colture subconfluenti possono essere ottenute dividendo le cellule da 1 a 2 giorni prima dell'esecuzione del test.

1. Reidratare le strisce con 200 mL di PBS per pozzetto per almeno 15 minuti a temperatura ambiente. Rimuovere il PBS dalle strisce reidratate.

2. Preparare una sospensione monocellulare, preferibilmente utilizzando un tampone di dissociazione non enzimatico. La densità cellulare ottimale può essere determinata mediante titolazione delle cellule. Un intervallo di partenza comune è compreso tra 1x10E05 e 1x10E07 cellule/mL.

3. Aggiungere 100 mL della sospensione cellulare diluita in ogni pozzetto. Incubare la piastra per 37 °C per 1 ora nell'incubatore a CO2. Lavare delicatamente la piastra 2-3 volte con PBS contenente Ca2+/Mg2+ (200 mL/pozzetto).

4. Aggiungere 100 mL di cristalvioletto allo 0,2% in etanolo al 10% in ogni pozzetto. Incubare per 5 minuti a temperatura ambiente. Rimuovere il colorante dai pozzetti. Lavare delicatamente la piastra 3 volte con PBS (300 mL/pozzetto).

5. Aggiungere 100 mL di tampone di solubilizzazione (una miscela 50/50 di NaH2PO4 0,1M a pH 4,5 e 50% di etanolo) a ciascun pozzetto. Lasciare incubare le strisce e agitare delicatamente a temperatura ambiente fino alla completa solubilizzazione del colorante legato alle cellule; ci vorranno circa 5 minuti.

6. Determinare l'assorbanza a 540 - 570 nm utilizzando un lettore di micropiastre.

Confezionamento

96 pozzetti

Stoccaggio e stabilità

Può essere conservato a 2-8 °C nella busta di alluminio per almeno 3 mesi. Le strisce inutilizzate possono essere nuovamente riposte e conservate nella busta laminata. Accertarsi che l′essiccante sia sempre nella busta e che questa sia correttamente sigillata.

Note legali

CHEMICON is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

MILLICOAT is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

Esclusione di responsabilità

Salvo diversa indicazione nel nostro catalogo o in altra documentazione fornita dall′azienda insieme al prodotto, i nostri prodotti sono destinati esclusivamente a scopi di ricerca e non devono essere utilizzati per altre finalità, inclusi a titolo esemplificativo ma non esaustivo, fini commerciali non autorizzati, applicazioni diagnostiche in vitro, usi terapeutici ex vivo o in vivo o qualsiasi altro tipo di assunzione o applicazione rivolta agli esseri umani o agli animali.

Informazioni sulla sicurezza

• Codice della classe di stoccaggio: 11 - Combustible Solids
• Classe di pericolosità dell'acqua (WGK): WGK 3
• Punto d’infiammabilità (°F): Not applicable
• Punto d’infiammabilità (°C): Not applicable