17-10489
Set ChIPAb+ per il recettore androgenico - Anticorpi convalidati per ChIP e set di primer
from rabbit, purified by affinity chromatography
Sinonimo/i:
Dihydrotestosterone receptor, Nuclear receptor subfamily 3 group C member 4, DHTR, NR3C4, AR
About This Item
Prodotti consigliati
Origine biologica
rabbit
Livello qualitativo
Clone
polyclonal
Purificato mediante
affinity chromatography
Reattività contro le specie
rat, amphibian, bovine, human, mouse, chicken
Produttore/marchio commerciale
ChIPAb+
Upstate®
tecniche
ChIP: suitable
immunohistochemistry: suitable
immunoprecipitation (IP): suitable
western blot: suitable
N° accesso NCBI
N° accesso UniProt
Condizioni di spedizione
dry ice
Descrizione generale
Il set ChIPAb+ per il recettore androgenico comprende l′anticorpo anti-recettore androgenico, IgG di coniglio normale e i primer di controllo che amplificano una regione di 85 pb della regione enhancer dell′antigene specifico prostatico umano (PSA). L′anticorpo anti-recettore androgenico e i controlli negativi sono forniti in un formato di reazione "per ChIP" scalabile e possono essere utilizzati per convalidare funzionalmente la precipitazione della cromatina associata al recettore androgenico.
Specificità
Immunogeno
Applicazioni
cellule LNCaP sono state deprivate di ormoni per 72 ore, quindi indotte per una notte con CI-4AS-1 1 µM. La ChIP è stata effettuata con ~1e5 equivalenti di cellule per IP utilizzando 1 µg di IgG di coniglio normale (N° Comp PP64B) o 1 µg di anti-recettore androgenico (N° Comp. CS207339) e il kit Magna ChIP HiSens (N° Cat. 17-10460). La riuscita dell′immunoprecipitazione dei frammenti di DNA associati al recettore androgenico è stata confermata mediante qPCR utilizzando i primer per ChIP specifici per il PSA (N° Comp. CS207340) come locus positivo e per il promotore del gene GAPDH (N° Comp. 22-004) come locus negativo. I dati sono presentati come input percentuale di ciascun campione IP rispetto all′input di cromatina per ciascun amplicone e campione ChIP come indicato.
Per i dettagli sperimentali, consultare i protocolli del kit Magna ChIP HiSens (N° Cat. 17-10460) o del kit EZ-MagnaChIP HiSens (N° Cat. 17-10461).
Immunoprecipitazione della cromatina:
cellule LNCaP sono state deprivate di ormoni per 72 ore, quindi indotte per una notte con mezzo disperdente (non trattate) o con CI-4AS-1 1 µM (trattate). La ChIP è stata effettuata con ~ 1e5 equivalenti di cellule per IP utilizzando 3 µg di IgG di coniglio normale (N° Comp PP64B) o 3 µg di anti-recettore androgenico (N° Comp. CS207339) e il kit Magna ChIP HiSens (N° Cat. 17-10460). La riuscita dell′immunoprecipitazione dei frammenti di DNA associati al recettore androgenico è stata confermata mediante qPCR utilizzando i primer per ChIP specifici per il PSA (N° Comp. CS207340) come locus positivo; il locus negativo era il set di primer HNRP2AB1. Sono riportati i calcoli della delta delta Ct che rende conto dell′arricchimento in numero di volte nel locus positivo rispetto al locus negativo.
Per i dettagli sperimentali, consultare i protocolli del kit MagnaChIP HiSens (N° Cat. 17-10460) o del kit EZ-MagnaChIP HiSens (N° Cat. 17-10461).
Saggio di Western Blotting:
Una diluizione 1:200-1:500 di questo anticorpo ha rivelato il recettore degli androgeni in lisati in tampone per RIPA di 20 μg di cellule LNCaP umane.
Immunoprecipitazione:
un lotto rappresentativo ha immunoprecipitato il recettore per gli androgeni da 500 μg di lisato di cellule LNCaP in tampone per RIPA.
Immunocitochimica:
una diluizione 1:50 di un lotto rappresentativo ha prodotto immunocolorazione positiva per il recettore per gli androgeni in cellule LNCaP fissate con formaldeide al 2%/ acido acetico al 5% e permeabilizzate con Triton X-100 allo 0,1%.
Epigenetica & funzione nucleare
Fattori di trascrizione
Confezionamento
Qualità
la cromatina sonicata preparata da cellule LNCaP deprivate di ormoni (72H), poi indotte (CI-4AS-1 1 µM) per una notte (~1e5 equivalenti di cellule per IP) sono state sottoposte a immunoprecipitazione della cromatina utilizzando 1 µg di IgG di coniglio normale (N° Comp. PP64B) o 1 µg di anti-recettore androgenico (N° Comp. CS207339) e il kit Magna ChIP® HiSens (N° Cat. 17-10460). La riuscita dell′immunoprecipitazione dei frammenti di DNA associati al recettore androgenico è stata confermata mediante qPCR utilizzando i primer per ChIP specifici per il PSA (N° Comp. CS207340).
Per i dettagli sperimentali consultare il protocollo del kit MagnaChIP HiSens (N° Cat. 17-10460) o del kit EZ-MagnaChIP HiSens (N° Cat. 17-10461).
Stato fisico
IgG di coniglio normale, N° Comp. PP64B. Un flaconcino contenente 125 µg (1,0 µg/ µL) di IgG di coniglio in 125 µL di tampone di conservazione con lo 0,05% di azoturo di sodio. Conservare a -20°C.
Primer per ChIP, PSA. N° Comp. CS207340. Una microprovetta contenente 75 μL di ciascun primer specifico per la regione enhancer dell′antigene specifico prostatico umano 5 μM. (chr19:51354179+51354263, build hg19) Conservare a -20°C.
FOR: 5’ GCC TGG ATC TGA GAG AGA TAT CAT C 3’
REV: 5’ ACA CCT TTT TTT TTC TGG ATT GTT G 3’
Stoccaggio e stabilità
Risultati analitici
Include IgG di coniglio normale e i primer specifici per la regione enhancer dell′antigene specifico prostatico umano (PSA).
Note legali
Esclusione di responsabilità
Codice della classe di stoccaggio
10 - Combustible liquids
Certificati d'analisi (COA)
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