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05-915

Sigma-Aldrich

Anticorpo anti-N- caderina, clone 13A9

culture supernatant, clone 13A9, Upstate®

Sinonimo/i:

Cadherin-2, CD325, CDw325, N-cadherin, Neural cadherin

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About This Item

Codice UNSPSC:
12352203
eCl@ss:
32160702
NACRES:
NA.41

Origine biologica

mouse

Livello qualitativo

Forma dell’anticorpo

culture supernatant

Tipo di anticorpo

primary antibodies

Clone

13A9, monoclonal

Reattività contro le specie

human

Confezionamento

antibody small pack of 25 μL

Produttore/marchio commerciale

Upstate®

tecniche

immunocytochemistry: suitable
immunohistochemistry: suitable
immunoprecipitation (IP): suitable
western blot: suitable

N° accesso NCBI

N° accesso UniProt

Condizioni di spedizione

ambient

modifica post-traduzionali bersaglio

unmodified

Informazioni sul gene

human ... CDH2(1000)

Descrizione generale

La caderina-2 (UniProt P19022; detta anche CD325, CDw325, N-caderina, caderina neurale) nell′uomo è codificata dal gene CDH2 (detto anche CDHN, NCAD) (Gene ID 1000). Le caderine costituiscono una famiglia di proteine di adesione cellulare calcio-dipendenti con ruoli importanti nello sviluppo embrionale e nel mantenimento della normale architettura tissutale. Le caderine sono composte da un dominio extracellulare (aa 160-724 della N-caderina umana) con cinque ripetizioni omologhe che mediano l′adesione, un unico dominio che attraversa la membrana (aa 725-745 della N-caderina umana) e un dominio citoplasmatico conservato (aa 746-906 della N-caderina umana) che interagisce con le catenine per legare le caderine del citoscheletro actinico. Inoltre, anche p120ctn, un substrato noto di Src, modula la forza dell′adesione caderina-dipendente interagendo con le caderine a livello del loro dominio juxtamembrana intracellulare. Le caderine sono sintetizzate sotto forma di precursori che devono subire scissione proteolitica per generare proteine mature funzionali. La proN-caderina (aa 1-906) neosintetizzata viene fosforilata e quindi modificata proteoliticamente prima di essere convogliata alla membrana citoplasmatica. Inoltre, la plakoglobina (gamma-catenina) e la beta-catenina si associano solo alla proN-caderina fosforilata, mentre p120ctn è in grado di associarsi a entrambe le sue forme, fosforilata e non fosforilata. La regione del segnale N-terminale e il propeptide (aa 1-25 e 26-159 della N-caderina umana) viene rimossa per proteolisi e, nel reticolo endoplasmatico o nell′apparato di Golgi, viene assemblato un complesso costituito dalla parte centrale della N-caderina centrale e dalla catenina che successivamente va a localizzarsi sulla membrana citoplasmatica dove può avvenire il legame al citoscheletro actinico.

Specificità

Il clone 13A9 riconosce la N-caderina ma non la P-, E- o M-caderina (Knudsen, K.A., et al. (1995). J. Cell Biol. 130(1):67-77).

Immunogeno

Epitopo: dominio citoplasmatico.
Proteine di fusione con MBP (maltose-binding protein) contenente l′intero dominio citoplasmatico della N-caderina umana espressa in batteri (Knudsen, K.A., et al. (1995). J. Cell Biol. 130(1):67-77).

Applicazioni

Analisi immunoistochimica: con un lotto rappresentativo è stata ottenuta l′immunocolorazione della matrice cellulare di placche aterosclerotiche stabili e della regione del cap fibroso ricca di cellule muscolari lisce vascolari (VSMC) da sezioni di tessuto di arteria carotide interna incluso in paraffina (Musumeci, G., et al. (2014). Histol. Histopathol. 29(6):707-719).
Immunoistochimica: un lotto rappresentativo ha rivelato una forte immunoreattività della N-caderina in tessuto di cancro del retto (RC) incluso in paraffina e positivo per metastasi linfonodali regionali (RLNM), una debole immunoreattività di tale proteina nell′RC negativo per RLNM, e assenza di immunoreattività nell′epitelio colorettale normale (Fan, X.J., et al. (2012). Br. J. Cancer. 106(11):1735-1741).
Immunoistochimica: un lotto rappresentativo ha rivelato immunoreattività della N-caderina in sezioni di tessuto di carcinoma epatocellulare (HCC) fissato in formalina e incluso in paraffina. È stata riscontrata una correlazione inversa significativa tra i livelli di espressione di RUNX3 e della N-caderina (Tanaka, S., et al. (2012). Int. J. Cancer. 131(11):2537-2546).
Western blotting: utilizzando un lotto rappresentativo è stato possibile rivelare la sovraregolazione (up-regulation) dell′espressione della N-caderina in cellule di carcinoma CCL185 dopo infezione transiente con il virus di Epstein-Barr (EBV). Il fenotipo simile a EMT (transizione epitelio-mesenchimale) è persistito anche dopo la perdita dei virus dopo sospensione della pressione selettiva sulla coltura (Queen, K.J., et al. (2013). Int. J. Cancer. 132(9):2076-2086).
Western blotting: un lotto rappresentativo ha permesso di rivelare la N-caderina in lisati delle linee cellulari di carcinoma epatocellulare (HCC) umano Hep3B, Huh7, HLF e SK-Hep1 (Tanaka, S., et al. (2012). Int. J. Cancer. 131(11):2537-2546).
Western blotting: con un lotto rappresentativo sono state rivelate le forme non modificata (pro-) e modificata (matura) della N-caderina in lisato di cellule HeLa (Wahl, J.K. 3rd., et al. (2003). J. Biol. Chem. 278(19):17269-17276).
Western blotting: con un lotto rappresentativo la N-caderina è stata rivelata nel lisato di fibroblasti umani WI-38, ma non nel lisato di cellule JAr di coriocarcinoma placentare (Knudsen, K.A., et al. (1995). J. Cell Biol. 130(1):67-77).
Immunocitochimica: un lotto rappresentativo ha rivelato una localizzazione prevalente dell′immunoreattività della N-caderina a livello dei contatti cellula-cellula dopo colorazione immunocitochimica fluorescente di cellule HeLa fissate in paraformaldeide all′1% e permeabilizzate con metanolo (Wahl, J.K. 3rd., et al. (2003). J. Biol. Chem. 278(19):17269-17276).
Immunocitochimica: con un lotto rappresentativo l′immunoreattività della N-caderina è risultata colocalizzata con quella della alfa- e della beta-catenina dopo colorazione immunocitochimica fluorescente di fibroblasti umani WI-38 (Knudsen, K.A., et al. (1995). J. Cell Biol. 130(1):67-77).
Immunoprecipitazione: Lotti rappresentativi hanno determinato l′immunoprecipitazione di alfa-catenina, beta-catenina e plakoglobina con la N-caderina in lisati di fibroblasti umani WI-38 e di cellule HeLa (Wahl, J.K. 3rd., et al. (2003). J. Biol. Chem. 278(19):17269-17276; Knudsen, K.A., et al. (1995). J. Cell Biol. 130(1):67-77).
Categoria di ricerca
Struttura cellulare
La rivelazione della N-caderina utilizzando questo anticorpo anti-N-caderina, clone 13A9, è convalidato per l′uso nelle analisi di immunocitochimica, immunoistochimica, immunoprecipitazione e Western blotting.
Sottocategoria di ricerca
Adesione (CAM)

Qualità

Valutata mediante Western blotting su lisato di cellule HeLa.

Saggio di Western blotting: una diluizione 1:1.000-5.000 di questo surnatante di colture di ibridoma ha rilevato la N-caderina nel lisato di cellule HeLa.

Descrizione del bersaglio

Visualizzato a circa 140 kDa. A causa della glicosilazione e della fosforilazione in fase post-traduzionale, le dimensioni delle bande target appaiono più ampie rispetto ai pesi molecolari calcolati di 82,03 kDa (forma matura) e 99,81/97,04 kDa (proforma dell′isoforma 1/2).

Linkage

Sostituisce: 04-1126

Stato fisico

Non purificato
Surnatante di colture di ibridoma produttrici di immunoglobuline monoclonali murine contenente azoturo di sodio 0,05% prima dell′aggiunta di glicerolo portato al 30%.

Stoccaggio e stabilità

A -20°C si conserva per 2 anni dalla data di spedizione. Suddividere in aliquote per evitare di scongelare e ricongelare ripetutamente. Per recuperare quanto più prodotto possibile, centrifugare il contenitore originale dopo lo scongelamento e prima di rimuovere il tappo.

Risultati analitici

Controllo
Lisato di cellule HeLa

Note legali

UPSTATE is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

Esclusione di responsabilità

Salvo diversa indicazione nel nostro catalogo o in altra documentazione fornita dall′azienda insieme al prodotto, i nostri prodotti sono destinati esclusivamente a scopi di ricerca e non devono essere utilizzati per altre finalità, inclusi a titolo esemplificativo ma non esaustivo, fini commerciali non autorizzati, applicazioni diagnostiche in vitro, usi terapeutici ex vivo o in vivo o qualsiasi altro tipo di assunzione o applicazione rivolta agli esseri umani o agli animali.

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