(ELISA) Saggio di immunoadsorbimento enzimatico

Metodi di rivelazione nei saggi ELISA

I metodi ELISA diretti prevedono un antigene immobilizzato, legato alla superficie di una piastra direttamente o indirettamente tramite un anticorpo di cattura, seguito da un anticorpo primario specifico per l’antigene e coniugato con un enzima e, infine, dal substrato di rivelazione. Il metodo di rivelazione indiretto più comunemente impiegato comprende sia un anticorpo primario non coniugato che un anticorpo secondario coniugato, specifico per la rivelazione dell’anticorpo primario. La rivelazione indiretta ha il vantaggio di una maggiore immunoreattività con l’antigene bersaglio perché l’enzima coniugato è presente solo sull’anticorpo secondario. Oltre ai metodi diretti e indiretti, l’ELISA a cattura (sandwich) fa uso di un ulteriore anticorpo cattura-antigene inizialmente attaccato alla superficie della micropiastra, seguito da due anticorpi, uno primario e uno secondario coniugato a un enzima con modalità simili al metodo indiretto precedentemente descritto.