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Taq ADN polymérase JumpStart^™

without MgCl₂

• Synonyme(s) : hot start DNA polymerase, hot start PCR
• Numéro MDL: MFCD00166026
• Code UNSPSC : 12352204
• Nomenclature NACRES : NA.55

Propriétés

• Niveau de qualité: 300
• Forme: liquid
• Utilisation: sufficient for 1500 reactions; sufficient for 250 reactions; sufficient for 50 reactions
• Caractéristiques: dNTPs included: no; hotstart
• Concentration: 2.5 units/μL
• Technique(s): PCR: suitable
• Couleur: colorless
• Entrée: purified DNA
• Adéquation: suitable for PCR
• Application(s): agriculture
• Conditions d'expédition: wet ice
• Température de stockage: −20°C

Description

Description générale

L'activité Taq polymérase est inactivée par la présence de l'anticorps anti-Taq JumpStart^™, anticorps monoclonal qui neutralise la Taq ADN polymérase. L'inactivation par un anticorps constitue un moyen simple et efficace de réaliser une PCR ("Polymerase Chain Reaction", amplification en chaîne par polymérase) à démarrage à chaud. La PCR à démarrage à chaud permet d'améliorer considérablement les résultats de l'amplification de l'ADN, en limitant la formation de produits d'amplification non spécifiques et de dimères d'amorces artéfactuels. En PCR, la Taq polymérase JumpStart^™ est inactive à basse température (température ambiante). Lorsque la température passe au-dessus de 70 °C pendant la première étape de dénaturation du thermocyclage, le complexe se dissocie et la polymérase devient totalement active.

Application

La Taq polymérase JumpStart^™ a été utilisée dans les applications suivantes :

• amplification par PCR de l'ADN d'échantillons d'herbier
• constituant d'un mélange pour RAPD-PCR (amplification aléatoire d'ADN polymorphique couplée à une PCR)
• amplification et détection d'une mutation ponctuelle dans l'exon 19 de l'EGFR grâce à des lignées de cellules cancéreuses spécifiques
• PCR quantitative en temps réel
• PCR de matrices d'ADNc ou d'ADN génomique complexes
• PCR de cibles à très faible nombre de copies
• PCR d'un grand nombre de cycles thermiques (> 35) et de plusieurs couples d'amorces dans un même tube réactionnel

• Pour les amplifications par PCR nécessitant une amplification non spécifique limitée
• Pour les PCR multiplex
• Pour la réduction des dimères d'amorces

Caractéristiques et avantages

• Réduit l'amplification non spécifique
• Accroît le rendement et la spécificité des PCR
• Réduit le temps de mise en place par rapport aux techniques à démarrage à chaud manuelles ou à billes de cire
• Temps d'activation inférieur à 1 minute

Conditionnement

La Taq ADN polymérase JumpStart est livrée avec un tampon de réaction 10 × disponible avec ou sans MgCl_2. Le tampon 10 × sans magnésium est fourni avec un tube de MgCl₂ 25 mM séparé à des fins d'optimisation.

Produit fourni avec un tampon de réaction 10 × sans MgCl_{2. Un tube de MgCl2 25 mM est fourni à part.}

Autres remarques

La Taq ADN polymérase JumpStart de Sigma est une enzyme à démarrage à chaud inactivée par des anticorps conçue pour limiter l'amplification non spécifique tout en augmentant le rendement du produit cible. Lorsque la température de la réaction atteint 70 °C, la Taq ADN polymérase se réactive et la spécificité et le rendement de la PCR augmentent. Ce complexe anticorps/enzyme assure une mise en place simple et pratique tout en limitant les risques de contamination par rapport aux techniques à démarrage à chaud manuelles. L'enzyme peut également être ajoutée lors de la préparation du mélange maître pour une meilleure constance des performances d'une réaction à l'autre.

Pour en savoir plus sur les enzymes Taq JumpStart, rendez-vous sur www.sigma-aldrich.com/hotstart.

Définition de l'unité

Une unité intègre 10 nmol de dNTP totaux dans de l'ADN précipitable à l'acide en 30 minutes à 74 °C.

Informations légales

L'utilisation de ce produit est protégée par un ou plusieurs des brevets américains suivants et par des revendications de brevets équivalentes en dehors des États-Unis : US 8 404 464 et US 7 972 828. L'acheteur de ce produit bénéficie d'une immunité de juridiction limitée et incessible au titre des revendications de brevets susmentionnées.

L'utilisation de ces anticorps est autorisée à des fins de recherche in vitro au titre des brevets américains n° 5 338 671 et n° 5 587 287 et des brevets équivalents dans les autres pays.

JumpStart is a trademark of Sigma-Aldrich Co. LLC

Informations sur la sécurité

• Code de la classe de stockage: 10 - Combustible liquids
• Point d'éclair (°F): Not applicable
• Point d'éclair (°C): Not applicable