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Roche

Cocktails d′inhibiteurs de protéases cOmplete ULTRA, sans EDTA, pastilles EASYpack

Tablets supplied in foil blister packs.

Synonyme(s) :

inhibiteur de protéase

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About This Item

Code UNSPSC :
12352200

Forme

tablet

Conditionnement

pkg of 30 tablets (individually packed in foil blister packs)

Fabricant/nom de marque

Roche

Technique(s)

immunoblotting: suitable
western blot: suitable

Solubilité

water: soluble

Absorption

0.4 at 280 nm (1x solution)

Température de stockage

2-8°C

Description générale

Les protéines recombinantes peuvent être partiellement dégradées au cours de l′expression. Les produits de dégradation solubles sont co-purifiés et produisent une préparation de protéine non homogène, qui contient des fragments de protéine de différentes longueurs. Cependant, les métalloprotéases sont couramment présentes chez les bactéries (entre autres), et certains techniques nécessitent d′omettre l′EDTA.

Les pastilles cOmplete ULTRA Mini sans EDTA contiennent le cocktail d′inhibiteurs de protéases le plus puissant pour la protection optimale des protéines contre la dégradation. Elles sont fournies sous forme de pastilles en plaquettes alvéolées EASYpack, qui facilitent l′emploi – les pastilles peuvent être dispensées directement dans le tampon, une à la fois, en les poussant en dehors de la plaquette. Une pastille cOmplete ULTRA Mini sans EDTA suffit pour un volume de solution d′extraction de 10 ml.

Les pastilles cOmplete ULTRA Mini sans EDTA sont identiques aux pastilles cOmplete ULTRA Mini, la seule différence étant qu′elles ne contiennent pas d′EDTA ou d′autres agents chélateurs (EGTA, par exemple).

Spécificité

Inhibition des protéases à sérine, à cystéine et à acide aspartique. Pas d′inhibition des métalloprotéases.

Application

Les pastilles de cocktail d′inhibiteurs de protéases cOmplete ULTRA Mini sans EDTA, EASYpack, ont été utilisées comme composant
  • du tampon d′homogénéisation des échantillons de muscles pour la préparation d′échantillons pour immunoblotting
  • du tampon de radio-immunoprécipitation (RIPA) pour l′extraction de protéines à partir d′échantillons de cerveau pour analyse par Western blot
  • du tampon de lyse utilisé pour préparer des lysats des cellules rénales embryonnaires humaines 293 (HEK293) pour analyse par Western blot

Lors de la lyse des cellules et de la purification, les protéines cibles risquent d′être dégradées par des protéases naturellement présentes dans les cellules. Pour garantir la préparation de protéines de taille complète, les pastilles cOmplete ULTRA sont utilisées pour inhiber une vaste gamme de protéases. Les rapports d′inhibition de cette nouvelle formulation sont supérieurs, en raison de la gamme étendue d′inhibiteurs par rapport aux pastilles cOmplete standard.
Ce nouveau cocktail d′inhibiteurs de protéases inhibe désormais les protéases aspartiques en plus des sérine et cystéine protéases. Les pastilles cOmplete ULTRA ont été mises au point pour optimiser l′efficacité dans divers types cellulaires. Une performance optimale est garantie dans les lysats de bactéries, de levures, de cellules d′insectes et dans un éventail de lignées cellulaires d′eucaryotes supérieurs.
Ces pastilles ne contiennent pas d′EDTA, et de ce fait n′inhibent pas les métalloprotéinases.
Pour la purification de protéines comportant une étiquette de poly-histidine par chromatographie d′affinité sur ions métalliques immobilisés (IMAC), cette tablette sans EDTA est recommandée pour les applications utilisant des résines IMAC non compatibles avec l′EDTA. Une autre option consiste à utiliser une pastille cOmplete ULTRA Mini avec EDTA en combinaison avec le nouveau support de chromatographie compatible avec l′EDTA proposé par Roche, la résine de purification His-Tag cOmplete.

Caractéristiques et avantages

  • Protégez vos protéines d′intérêt.
Choisissez cOmplete ULTRA pour une inhibition encore plus efficace des protéases dans les lysats de cellules eucaryotes, bactériennes et de levure.
  • Ne vous contentez pas de moins.
Tirez parti de 7 inhibiteurs puissants de protéases – plus d′inhibiteurs que dans les autres pastilles sans EDTA.
  • Protégez vos échantillons contre une large gamme de protéases.
Obtenez une inhibition fiable des protéases à sérine, à cystéine et à acide aspartique.
  • Fourni en pastilles pratiques et sûres
Pas besoin de peser de petites quantités d′inhibiteurs individuels pouvant être nocifs. Il vous suffit de dispenser une pastille de la plaquette dans vos tampons.

Composants

Mélange breveté de plusieurs inhibiteurs de protéases présentant une large spécificité inhibitrice.

Forme physique

Pastilles sous blister packs. Chaque pastille suffit pour un volume de solution d′extraction de 10 ml.

Notes préparatoires

Concentration de travail : 1 pastille pour 10 ml de solution d′extraction
Solution de travail : Utilisation

Pousser la pastille délicatement en dehors de la plaquette à travers le papier aluminium à l′aide du pouce (pour éviter de briser la pastille, ne pas utiliser l′ongle).

Préparation de la solution de travail

Une pastille suffit à inhiber l′activité protéolytique dans 10 m de solution d′extraction. En cas d′activité protéolytique extrêmement élevée, il est recommandé d′utiliser 2 à 3 pastilles pour 10 ml de tampon d′extraction. Les pastilles peuvent être ajoutées directement au milieu d′extraction.

Solution mère (2x conc.)

Au lieu d′utiliser une pastille directement dans le lysat, une solution mère 2x peut être préparée selon la procédure suivante :
• Ajoutez une pastille cOmplete ULTRA Mini sans EDTA à 5 ml d′eau bidistillée dans un tube en PE ou PP.
• Mélangez au vortex pendant 3 min, jusqu′à ce que la pastille soit complètement dissoute.
• La solution mère est prête à utiliser, même si des particu­les très fines sont visibles. Ces particules n′ont aucun effet sur le pouvoir inhibiteur des pastilles.
• La solution mère est stable pendant 4 semaines entre 2 et 8 °C et au moins 4 semaines entre -15 et -25 °C.
• Lors du stockage de la solution mère 2x, les particules peuvent se sédimenter. Mélangez brièvement la solution mère au vortex

Conditions de stockage (solution de travail) : La solution mère dans l′eau est stable pendant 4 semaines entre 2 et 8 °C et au moins 4 semaines entre -15 et -25 °C.

Reconstitution

Soluble dans les tampons aqueux ou à ajouter directement au milieu d′extraction. Pour la solution mère, utiliser de l′eau uniquement.

Autres remarques

Produit destiné uniquement à la recherche en sciences de la vie. Ne pas utiliser dans des procédures de diagnostic.

Informations légales

cOmplete is a trademark of Roche

Pictogrammes

Corrosion

Mention d'avertissement

Danger

Mentions de danger

Classification des risques

Aquatic Chronic 3 - Eye Dam. 1 - Skin Corr. 1B

Code de la classe de stockage

8A - Combustible, corrosive hazardous materials

Classe de danger pour l'eau (WGK)

WGK 2

Point d'éclair (°F)

does not flash

Point d'éclair (°C)

does not flash


Certificats d'analyse (COA)

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