ECM205
Kit de criblage MEC Millicoat®, avec ECM101-ECM105 (1 de chaque)
Millicoat®, pkg of 96-well plate(s) (for fibronectin, vitronectin, laminin, collagen I & collagen IV)
Synonyme(s) :
Formerly under the CytoMatrix brand name.
About This Item
Produits recommandés
Espèces réactives
human
Niveau de qualité
Fabricant/nom de marque
Chemicon®
Millicoat®
Conditionnement
pkg of 96-well plate(s) (for fibronectin, vitronectin, laminin, collagen I & collagen IV)
Technique(s)
activity assay: suitable
cell based assay: suitable
Entrée
sample type neural stem cell(s)
sample type: human embryonic stem cell(s)
sample type: mouse embryonic stem cell(s)
sample type epithelial cells
sample type hematopoietic stem cell(s)
sample type pancreatic stem cell(s)
sample type induced pluripotent stem cell(s)
sample type mesenchymal stem cell(s)
Méthode de détection
colorimetric
Conditions d'expédition
wet ice
Description générale
Application
Structure cellulaire
REMARQUE : Les performances de l'essai sont optimales avec les cultures cellulaires n'ayant pas encore atteint la confluence. Pour ce faire, diviser les cellules 1 à 2 jours avant de réaliser l'essai.
1. Réhydrater les barrettes avec 200 ml de PBS par puits pendant au moins 15 minutes à température ambiante. Retirer le PBS des barrettes réhydratées.
2. Préparer une suspension de cellules individuelles, de préférence avec un tampon de dissociation non enzymatique. La densité cellulaire optimale peut être déterminée par titrage des cellules. La plage de départ habituellement utilisée se situe entre 1x10E05 et 1x10E07 cellules/ml.
3. Ajouter à chaque puits 100 ml de la suspension de cellules diluée. Incuber la plaque à 37 °C pendant 1 heure dans un incubateur à CO2. Laver délicatement la plaque à 3 reprises avec du PBS contenant des ions Ca2+/Mg2+ (200 ml/puits).
4. Ajouter à chaque puits 100 ml de cristal violet à 0,2 % dans de l'éthanol à 10 %. Incuber pendant 5 minutes à température ambiante. Retirer le colorant des puits. Laver délicatement la plaque à 3 reprises avec du PBS (300 ml/puits).
5. Ajouter à chaque puits 100 ml de tampon de solubilisation (mélange 50/50 de NaH2PO 0,1 M à pH 4,5 et d'éthanol à 50 %). Laisser les barrettes incuber à température ambiante et les secouer doucement jusqu'à ce que le colorant fixé aux cellules soit complètement solubilisé (cela prend environ 5 minutes).
6. Déterminer l'absorbance à 540-570 nm sur un lecteur de microplaque.
Stockage et stabilité
Informations légales
Clause de non-responsabilité
Code de la classe de stockage
11 - Combustible Solids
Certificats d'analyse (COA)
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Articles
Extracellular matrix proteins such as laminin, collagen, and fibronectin can be used as cell attachment substrates in cell culture.
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This page covers the ECM coating protocols developed for four types of ECMs on Millicell®-CM inserts, Collagen Type 1, Fibronectin, Laminin, and Matrigel.
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