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E1270

Sigma-Aldrich

Gel ECM from Engelbreth-Holm-Swarm murine sarcoma

liquid, BioReagent, suitable for cell culture

Synonyme(s) :

Matrice EHS

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About This Item

Numéro MDL:
MFCD00283131
Code UNSPSC :
12352207
Nomenclature NACRES :
NA.75

Gamme de produits

BioReagent

Niveau de qualité

300

Forme

liquid

Concentration

8-12 mg/mL

Technique(s)

cell culture | mammalian: suitable

Numéro d'accès UniProt

P02468
P02469
P10493
P19137
P43407
Q61001
Q61092
Q61789

Conditions d'expédition

dry ice

Température de stockage

−20°C

Informations sur le gène

mouse ... Lama1(16772) , Lama3(16774) , Lama5(16776) , Lamb1-1(16777) , Lamc1(226519) , Lamc2(16782) , Nid1(18073) , Sdc2(15529)

Application

Le gel ECM peut être utilisé avec des cellules épithéliales, des cellules endothéliales, des cellules musculaires, des cellules nerveuses et des cellules tumorales.

Actions biochimiques/physiologiques

Le gel ECM subit une polymérisation activée par la chaleur lorsqu'il est porté à une température de 20 à 40 °C, formant alors une membrane basale reconstituée. Les cellules PC12 forment des neurites en 2 jours lorsqu'elles sont cultivées sur une fine couche de gel ECM.

Chaque colonie de souris servant à la production de ce produit est testée en routine à la recherche de plusieurs pathogènes. Produit testé et trouvé négatif pour le LDEV.

Composants

Le gel ECM a été préparé avec une concentration en protéines de 8 à 12 mg/ml (dans du DMEM), et contient principalement de la laminine, plus du collagène de type IV, du protéoglycane de type sulfate d'héparine, de l′entactine ainsi que d′autres constituants mineurs. L′ajout de collagène de type IV au gel ECM augmente la polymérisation.

Le produit contient 50 mg/l de sulfate de gentamicine.

Attention

Pour un stockage à long terme, garder le produit à -20 °C. Le gel ECM peut être conservé entre 2 et 8 °C jusqu'à 72 heures.

Notes préparatoires

Ce produit est préparé à partir de sarcomes d′Engelbreth-Holm-Swarm de souris. Il est dialysé contre du chloroforme. Le gel doit être décongelé toute une nuit entre 2 et 8 °C avant emploi, puis disposé sur une plaque à puits en utilisant une plaque et des pipettes pré-refroidies entre 2 et 8 °C. Le gel peut également être dilué jusqu′à deux fois à l′aide de milieu de Eagle modifié par Dulbecco entre 2 et 8 °C, avant dépôt sur la plaque. Le produit gélifie en 5 minutes à 20 °C. En cas de manipulations prolongées, il convient de travailler à une température inférieure à 10 °C. Les cellules peuvent être déposées sur les plaques à la surface d′une fine couche de gel de 0,5 mm ou mises en culture à l′intérieur d′une couche de 1 mm. Pour une culture selon la seconde option, ajouter les cellules au gel avant étalement sur la plaque en se basant sur une densité recommandée de 3 à 4 x 104 cellules/ml. Pour dissocier les cellules de ce gel, utiliser une protéase dans du PBS sans calcium, magnésium ou EDTA, à une concentration de 0,6-2,4 unités/ml.

Souvent commandé avec ce produit

Réf. du produit
Description
Tarif

Code de la classe de stockage

12 - Non Combustible Liquids

Classe de danger pour l'eau (WGK)

WGK 3

Point d'éclair (°F)

Not applicable

Point d'éclair (°C)

Not applicable

Certificats d'analyse (COA)

Recherchez un Certificats d'analyse (COA) en saisissant le numéro de lot du produit. Les numéros de lot figurent sur l'étiquette du produit après les mots "Lot" ou "Batch".

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