539480
Protéinase K from Tritirachium album
Synonyme(s) :
Endopeptidase K
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About This Item
Numéro CAS:
Numéro MDL:
Code UNSPSC :
12352202
Nomenclature NACRES :
NA.21
Produits recommandés
Forme
lyophilized solid
Niveau de qualité
Activité spécifique
≥30 mAnson units/mg dry wt
≥40 mAnson units/mg protein
Poids mol.
28.93 kDa
Fabricant/nom de marque
Calbiochem®
Conditions de stockage
OK to freeze
Couleur
white
Solubilité
50 mM Tris-HCl, 2 mM calcium acetate, pH 8.0: soluble
Activité étrangère
DNase, none detected (nicking activity with pBR322, incubation for 6 h at 37°C)
RNase, none detected (ribonuclease activity with MS2 RNA detected after incubation for 6 h at 37°C)
Conditions d'expédition
ambient
Température de stockage
2-8°C
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Description générale
Il s′agit d′une sérine protéase qui présente une forte activité protéolytique sur un grand nombre de protéines natives et dénaturées de haut poids moléculaire. Du fait de son inactivation protéolytique rapide des nucléases endogènes, elle peut être utilisée pour l′isolement d′ARNm et d′ADN de haut poids moléculaire. Elle clive préférentiellement les liaisons voisines du groupe carbonyle des acides aminés hydrophobes N-substitués, aliphatiques et aromatiques. Elle est inhibée par le DFP, Hg2+ et le PMSF. Elle n′est pas inactivée par les chélateurs de métaux, les réactifs sulfhydrylés, le TLCK ou le TPCK.
Application
Utile pour l′inactivation protéolytique des nucléases lors de l′isolement de l′ADN et de l′ARN.
Élimine les endotoxines qui se lient aux protéines cationiques telles que le lysozyme et la ribonucléase A.
S′est avéré utile pour l′isolement des mitochondries hépatiques, de levure et de haricot mungo.
Détermination de la localisation des enzymes sur les membranes.
Traitement des coupes de tissus incluses en paraffine pour exposer les sites de liaison à l′antigène pour le marquage par anticorps.
Digestion des protéines des échantillons de tissu cérébral pour la recherche sur les prions responsables des encéphalopathies spongiformes transmissibles (EST).
Élimine les endotoxines qui se lient aux protéines cationiques telles que le lysozyme et la ribonucléase A.
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Digestion des protéines des échantillons de tissu cérébral pour la recherche sur les prions responsables des encéphalopathies spongiformes transmissibles (EST).
Actions biochimiques/physiologiques
La protéinase K est une sérine protéase très stable et hautement réactive. Des études de cristallographie et de structure moléculaires ont indiqué que cette enzyme appartient à la famille des subtilisines, présentant une triade catalytique au site actif (Asp39-His69-Ser224). Elle est stable dans un vaste éventail d′environnements : pH, sels de tampon, détergents (SDS) et température. En présence de 0,1 à 0,5 % de SDS, la protéinase K reste active et peut digérer diverses protéines et nucléases dans les préparations d′ADN, sans compromettre l′intégrité de l′ADN isolé.
Avertissement
Toxicité : irritant (B)
Définition de l'unité
Une unité mAnson est définie comme la quantité d'enzyme permettant de libérer 1,0 µmol d'acides aminés sensibles au réactif de Folin (quantité calculée sous forme de tyrosine) par minute à 37 °C et pH 7,5.
Forme physique
Produit lyophilisé à partir de l'acétate de calcium
Reconstitution
Après reconstitution, conserver au réfrigérateur (à 4 °C). Les solutions mères préparées dans du Tris-HCl 50 mM avec de l'acétate de calcium 2 mM et à pH 8,0 sont stables jusqu'à 1 an à 4 °C.
Autres remarques
Watazu, Y., et al. 1993. J. Lab. Clin. Anal. 7, 81.
Lebherz, H.G., et al. 1986. Biochem. J.233, 51.
Ebeling, W., et al. 1974. Eur. J. Biochem.47, 91.
Lebherz, H.G., et al. 1986. Biochem. J.233, 51.
Ebeling, W., et al. 1974. Eur. J. Biochem.47, 91.
Informations légales
CALBIOCHEM is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
Mention d'avertissement
Danger
Mentions de danger
Conseils de prudence
Classification des risques
Eye Irrit. 2 - Resp. Sens. 1 - Skin Irrit. 2 - STOT SE 3
Organes cibles
Respiratory system
Code de la classe de stockage
11 - Combustible Solids
Classe de danger pour l'eau (WGK)
WGK 1
Point d'éclair (°F)
Not applicable
Point d'éclair (°C)
Not applicable
Certificats d'analyse (COA)
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