P5147

Protease aus Streptomyces griseus

Type XIV, ≥3.5 units/mg solid, powder

• Synonym(e): Actinase E, Pronase E aus Streptomyces griseus
• CAS-Nummer: 9036-06-0
• EG-Nummer: 232-909-5
• MDL-Nummer: MFCD00132092
• UNSPSC-Code: 12352204
• eCl@ss: 32160410
• NACRES: NA.54

Eigenschaften

• Biologische Quelle: Streptomyces griseus
• Qualitätsniveau: 200
• Typ: Type XIV
• Form: powder
• Spezifische Aktivität: ≥3.5 units/mg solid
• Löslichkeit: 10 mM NaAc (pH 7.5) and 5 mM CaAc: soluble 0.2 mg/mL at 37 °C, clear, colorless to tan
• Versandbedingung: wet ice
• Lagertemp.: −20°C

Beschreibung

Spezifität

Eine Mischung aus mindestens drei proteolytischen Aktivitäten, einschließlich einer extrazellulären Serinprotease. Im Allgemeinen weisen Serinproteasen eine Vielzahl von Substratspezifitäten auf. Man nimmt an, dass diese durch ein aktives Zentrum vermittelt werden, das aus einem Asp-, einem His- und einem Ser-Rest im Molekül besteht. Dieses Enzym hydrolysiert bevorzugt Peptidbindungen auf der Carboxylseite von Glutamin- oder Asparaginsäure.

Anwendung

Das Enzym von Sigma wird für den Verdau und die Analyse von Antithrombin-Heparin-Komplexen verwendet. Es wurde ebenfalls für die Isolierung von enzymresistenter Stärke verwendet.

Dieses Enzym ist in einem höheren pH-Wert-Bereich aktiver als die bekannte alkalische Protease und zeigt sogar in 0,2 N NaOH-Lösung proteolytische Aktivität. Dieses Enzym ist für die Proteolyse von unlöslichen Proteinen und für die Strukturanalyse von Proteinen geeignet.

Protease aus Streptomyces griseus wird verwendet:

• für den Verdau von Nucleus pulposus (NP)-Gewebe
• bei der Katalyse der asymmetrischen Ein-Topf-Mannich-Reaktion
• zur Entproteinisierung von Stärke
• zum Verdau von Hirnschnitten für die Zelldissoziation

Protease ist ein Enzym, das Proteine durch Hydrolyse von Peptidbindungen abbaut. Protease wird zum Abbau von Proteinen, zur Untersuchung von Proteasehemmern und zur Untersuchung der Kinetik der thermischen Inaktivierung verwendet. Protease wird bei Nukleinsäureisolierungsverfahren während der Inkubation eingesetzt. Protease aus Streptomyces griseus wird für kristallographische und kinetische Untersuchungen des kovalenten Komplexes aus Tetrapeptidaldehyden und Serinproteasen verwendet.

Protease wird typischerweise in Verfahren zur Nukleinsäureisolierung mit einer Inkubationszeit von 0,5–3,0 Stunden unter Zusatz von 0,2%igem Natriumdodecylsulfat und 10 mM EDTA eingesetzt.

Biochem./physiol. Wirkung

Dieses Produkt ist ein Gemisch aus mindestens drei caseinolytischen Aktivitäten und einer Aminopeptidase-Aktivität. Die folgenden caseinolytischen Enzyme wurden aufgezählt: Streptomyces griseus Protease A, Streptomyces griseus Protease B und Streptomyces griseus Trypsin. Dieses Produkt eignet sich für den umfangreichen oder vollständigen Proteinabbau. Dieses Protease-Gemisch ist hochunspezifisch und kann Casein zu >70 % als Monoaminosäuren verdauen.

Protease katabolisiert Proteine durch Hydrolyse von Peptidbindungen. Proteasen werden durch Serin-Aktivstelleninhibitoren wie Phenylmethylsulfonylfluorid (PMSF) und Diisopropylfluorphosphat inaktiviert. Protease aus Streptomyces griseus ist ein Gemisch aus mindestens drei proteolytischen Aktivitäten, einschließlich einer extrazellulären Serinprotease. Serinproteasen weisen ein breites Spektrum an Substratspezifitäten auf, die vermutlich durch eine Aktivstelle vermittelt werden, die aus einem Asp-, einem His- und einem Ser-Rest im Molekül besteht. Dieses Enzym hydrolysiert bevorzugt Peptidbindungen auf der Carboxyl-Seite von Glutamin- oder Asparaginsäure.

Leistungsmerkmale und Vorteile

• Äußerst stabil im pH-Bereich von 5,0 bis 9,0; mit Peak-Aktivität bei pH 8,8
• Mit vielen DNA- und RNA-Isolationspuffern kompatibel
• Breite Substratspezifität

Qualität

Enthält Calciumacetat.

Physikalische Eigenschaften

Vollständig inaktiviert durch Erwärmen bei 80 °C für 15–20 Minuten.

Einheitendefinition

Eine Einheit hydrolysiert die Caseinmenge, die eine Färbung entsprechend 1,0 μmol (181 μg) Tyrosin pro min bei pH 7,5 und 37 °C produziert (Farbe vom Folin-Ciocalteu Reagenz).

Angaben zur Herstellung

Aus dem Flüssigmedium einer Kultur von S. griseus isoliert.

Sicherheitshinweise

• Piktogramme: GHS08,GHS07
• Signalwort: Danger
• H-Sätze: H315,H319,H334,H335
• P-Sätze: P261 - P264 - P271 - P280 - P302 + P352 - P305 + P351 + P338
• Gefahreneinstufungen: Eye Irrit. 2 - Resp. Sens. 1 - Skin Irrit. 2 - STOT SE 3
• Zielorgane: Respiratory system
• Lagerklassenschlüssel: 11 - Combustible Solids
• WGK: WGK 2
• Flammpunkt (°F): Not applicable
• Flammpunkt (°C): Not applicable
• Persönliche Schutzausrüstung: Eyeshields, Gloves, type N95 (US)