PRON-RO
Roche
Pronase
from Streptomyces griseus
Synonym(e):
Unspezifische Protease
Anmeldenzur Ansicht organisationsspezifischer und vertraglich vereinbarter Preise
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About This Item
Empfohlene Produkte
Biologische Quelle
Streptomyces griseus
Qualitätsniveau
Sterilität
non-sterile
Form
lyophilized powder
Verpackung
pkg of 1 g (10165921001)
pkg of 5 g (11459643001)
Hersteller/Markenname
Roche
Konzentration
0.5-2 mg/mL
Parameter
35-40 °C optimum reaction temp.
Methode(n)
DNA extraction: suitable
Farbe
white
Optimaler pH-Wert
7.0-8.0
pH-Bereich
6.0-9.0
Löslichkeit
water: soluble 10-20 g/L
Eignung
suitable for molecular biology
NCBI-Hinterlegungsnummer
Anwendung(en)
life science and biopharma
Fremdaktivität
Deoxyribonuclease <0.002 U/mg ( based on lyoph.)
Ribonuclease <0.002 U/mg ( based on lyoph.)
Lagertemp.
2-8°C
Angaben zum Gen
Streptomyces griseus ... SGR_RS27460(6214424)
Allgemeine Beschreibung
Bei 40 °C mit Casein als Substrat, pH 7,5, entspricht ca. 1270 PU/mg oder ca. 25 PUK/mg
Spezifität
Pronase weist eine breite Spezifität auf und spaltet fast alle Proteine in deren Aminosäuren auf; löst Carboxylsäuren und Alkohole auf.
Anwendung
Pronase kann für eine vollständige Hydrolyse von Proteinen in Forschungsanwendungen verwendet werden. Pronase wird für den Abbau von Proteinen bei der Isolierung von DNA und RNA verwendet, z. B. bei der Extraktion von Phagen-DNA oder Isolierung von Plasmid-DNA. Eine Selbstverdauung der Pronase vor der Verwendung ist nicht notwendig. Es wird auch in der Histochemie und in Zellkulturen für die Gewebedissoziation in Verbindung mit Collagenase und Trypsin sowie für die Produktion von Glykopeptiden aus aufgereinigten Glykoproteinen verwendet. Auch für die Dechorionation von Zebrafischembryonen wurde es verwendet.
Biochem./physiol. Wirkung
Pronase besitzt eine weitreichende Spezifität. Daher wird sie häufig verwendet, wenn ein umfassender oder vollständiger Abbau von Proteinen erforderlich ist. Zu den Anwendungen gehören die Proteinanalyse in Zellorganellen, die Entfernung von Proteinen während der DNA- und RNA-Isolierung sowie die Produktion von Proteinhydrolysaten für die Aminosäureanalyse. Darüber hinaus übertrifft Pronase Trypsin in seiner Fähigkeit, fibroblastische Zelllinien zu dispergieren, was sowohl bei der Ablösung des Monolayers als auch bei der Erstellung von Einzelzellsuspensionen entscheidend ist.
Einheitendefinition
Bei +40 °C und einem pH-Wert von 7,5 beschleunigt eine Einheit der unspezifischen Proteasenaktivität die Freisetzung von folin-positiven Aminosäuren und Peptiden aus Casein. Für eine Einheit (U) wird 1 μmol/min Tyrosin freigesetzt und für die Einheit „PU“ gilt ein Wert von 1 μg/Minute (1 U = 181 PU); für die Einheit „PUK“ gilt 0,1/Minute (gemessen wird die Änderung der Extinktion von Molybdänblau, welches durch die Reaktion mit dem Folin-Reagenz unter Bedingungen wie 1 PUK = 50 PU entsteht).
Angaben zur Herstellung
Stabilisatoren: Schützende Wirkung von Calciumionen
Die Präparation enthält 20 % Calciumacetat zur Erhaltung der Stabilität. Nach Maßgabe der aktuellen Qualitätskontrollverfahren ist sie frei von Stärke. Die Aktivität der verdünnten Lösung, die 0,01 – 0,1 M Calcium enthielt, war bei einem neutralen pH-Wert und einer Temperatur von 4 bis 8 °C über 24 Stunden stabil. Geringe Mengen Calcium schützen die Pronase auch vor einer Hitzeinaktivierung.
Arbeitskonzentration: 0,5 bis 2 mg/ml
Arbeitslösung: Lösungsmittel in destilliertem Wasser wird empfohlen.
Zur Herstellung der Stammlösung wird Pronasepulver in destilliertes Wasser gegeben (10 bis 20 mg/ml).
Lagerbedingungen (Arbeitslösung): -15 bis -25 °C
Die Präparation enthält 20 % Calciumacetat zur Erhaltung der Stabilität. Nach Maßgabe der aktuellen Qualitätskontrollverfahren ist sie frei von Stärke. Die Aktivität der verdünnten Lösung, die 0,01 – 0,1 M Calcium enthielt, war bei einem neutralen pH-Wert und einer Temperatur von 4 bis 8 °C über 24 Stunden stabil. Geringe Mengen Calcium schützen die Pronase auch vor einer Hitzeinaktivierung.
Arbeitskonzentration: 0,5 bis 2 mg/ml
Arbeitslösung: Lösungsmittel in destilliertem Wasser wird empfohlen.
Zur Herstellung der Stammlösung wird Pronasepulver in destilliertes Wasser gegeben (10 bis 20 mg/ml).
Lagerbedingungen (Arbeitslösung): -15 bis -25 °C
Rekonstituierung
Das Lyophilisat ist in Wasser löslich (10 bis 20 mg/ml).
Lagerung und Haltbarkeit
Trocken lagern
Sonstige Hinweise
Nur für die Life-Science-Forschung. Nicht zur Verwendung in diagnostischen Verfahren vorgesehen.
Signalwort
Danger
H-Sätze
Gefahreneinstufungen
Eye Irrit. 2 - Resp. Sens. 1 - Skin Irrit. 2 - STOT SE 3
Zielorgane
Respiratory system
Lagerklassenschlüssel
11 - Combustible Solids
WGK
WGK 1
Flammpunkt (°F)
does not flash
Flammpunkt (°C)
does not flash
Analysenzertifikate (COA)
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