COLLA-RO
Roche
Collagenase A
from Clostridium histolyticum
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About This Item
Biologische Quelle
Clostridium histolyticum
Qualitätsniveau
Sterilität
non-sterile
Form
lyophilized
Spezifische Aktivität
>0.15 U/mg lyophilizate (Collagenase activity)
Verpackung
pkg of 100 mg (10103578001)
pkg of 2.5 g (11088793001)
pkg of 500 mg (10103586001)
Hersteller/Markenname
Roche
Konzentration
1 mg/mL (0.1%, w/v)
Farbe
brown
Optimaler pH-Wert
6.0-8.0
Löslichkeit
water: soluble
Eignung
suitable for PCR
NCBI-Hinterlegungsnummer
UniProt-Hinterlegungsnummer
Anwendung(en)
cell analysis
life science and biopharma
sample preparation
Fremdaktivität
Clostripain 9.489 U/mg
Proteases 6.067 U/mg (Azocoll )
Trypsin 0.144 U/mg (with BAEE)
Lagertemp.
2-8°C
Angaben zum Gen
Clostridium histolyticum ... COLA_1(1668506084)
Allgemeine Beschreibung
Collagenase ist eine Protease, die das Dreifachhelix-Protein Collagen spaltet. Clostridium histolyticum produziert sechs Collagenasetypen: α, β, γ, δ, ε und λ. Diese Collagenasen sind gegen Bindegewebe aktiv und zeigen eine stärkere Reaktivität gegenüber Gelatine als Collagen. Collagenase aus Clostridium histolyticum weist eine sehr starke Aktivität auf, da es Collagen von beiden Enden bei Temperaturen von nur 4-10 °C verdaut.
Spezifität
Collagenase baut natives Collagen ab. Clostripain, trypsinähnliche Enzyme und neutrale Proteasen bauen ebenfalls andere Proteine ab.
Enzymaktivität:
Collagenaseaktivität: >0,15 U/mg (nach Wünsch) (+25 °C, 4-Phenyl-azobenzyl-oxycarbonyl-Pro-Leu-Gly-Pro-D-Arg als Substrat)
Kontaminierende Enzymaktivitäten: Trypsin, Clostripain und neutrale proteolytische Aktivität
Collagenase A weist ein ausgeglichenes Verhältnis von Enzymaktivitäten auf.
Enzymaktivität:
Collagenaseaktivität: >0,15 U/mg (nach Wünsch) (+25 °C, 4-Phenyl-azobenzyl-oxycarbonyl-Pro-Leu-Gly-Pro-D-Arg als Substrat)
Kontaminierende Enzymaktivitäten: Trypsin, Clostripain und neutrale proteolytische Aktivität
Collagenase A weist ein ausgeglichenes Verhältnis von Enzymaktivitäten auf.
Anwendung
Kollagenase aus C. histolyticum findet häufig Verwendung:
- Bei der Disaggregation zahlreicher Gewebetypen (z. B. Lunge, Herz, Muskel, Knochen, Fettgewebe, Leber, Niere, Knorpel, Brustdrüse, Plazenta, Blutgefäße, Gehirn, Tumoren, Nabelschnur)
- Bei der Herstellung von Einzelzellsuspensionen zur Etablierung primärer Zellkultursysteme. Kollagenase A wird empfohlen, wenn Ausbeute, Viabilität und Funktionalität entscheidende Faktoren darstellen.
- Zur Präparation von Zellen aus vielen Gewebetypen, darunter Hepatozyten, Adipozyten, Pankreasinselzellen, Epithelzellen, Muskelzellen, Endothelzellen usw. Es sollte jedoch bei jeder Enzymcharge empirisch ermittelt werden, ob sie für den Aufschluss eines bestimmten Gewebes geeignet ist.
Einheitendefinition
Definition der Einheit: Collagenase von Roche wird in Wünsch-Einheiten (1 μmol Produkt wird pro Minute bei +25 °C mit Wünsch-Substrat gebildet) getestet.
Die Collagenase-Aktivität wird häufig in Mandl-Einheiten angegeben (1 μmol Leucin wird in 5 Stunden bei +37 °C aus Collagen freigesetzt).
Leider gibt es keinen einheitlichen Umrechnungsfaktor zwischen den beiden Aktivitätseinheiten, weil die Mandl-Einheit zum Teil von der nicht definierbaren Variable der Konzentration kontaminierender Proteasen in der Collagenasezubereitung abhängt. Eine reinere Collagenasezubereitung ergäbe somit eine geringere spezifische Aktivität in Mandl-Einheiten als eine Rohzubereitung. Für Clostridium-Zubereitungen sind üblicherweise Umrechnungsfaktoren von ca. 1:1800 angegeben (z.B. enthielt eine bestimmte Charge Clostridium-Collagenase ca. 0,15 Wünsch-U/mg und 250 Mandl-U/mg).
Die Collagenase-Aktivität wird häufig in Mandl-Einheiten angegeben (1 μmol Leucin wird in 5 Stunden bei +37 °C aus Collagen freigesetzt).
Leider gibt es keinen einheitlichen Umrechnungsfaktor zwischen den beiden Aktivitätseinheiten, weil die Mandl-Einheit zum Teil von der nicht definierbaren Variable der Konzentration kontaminierender Proteasen in der Collagenasezubereitung abhängt. Eine reinere Collagenasezubereitung ergäbe somit eine geringere spezifische Aktivität in Mandl-Einheiten als eine Rohzubereitung. Für Clostridium-Zubereitungen sind üblicherweise Umrechnungsfaktoren von ca. 1:1800 angegeben (z.B. enthielt eine bestimmte Charge Clostridium-Collagenase ca. 0,15 Wünsch-U/mg und 250 Mandl-U/mg).
Inhalt
Lyophilisat, nicht steril
Lyophilisat, nicht steril
Angaben zur Herstellung
Aktivator: Ca2+
Inhibitoren:
Collagenase-Inhibitoren: EDTA, EGTA, Cys, His, DTT, 2-Mercaptoethanol
Collagenase wird durch Serum nicht gehemmt.
Clostripain-Inhibitoren: TLCK
Trypsin-Inhibitoren: Aprotinin, Trypsin-Inhibitor (Eiklar, Sojabohnen), Serum
Arbeitskonzentration: 0,5 bis 2,5 mg/ml
Lagerbedingungen (Arbeitslösung): -15 bis -25 °C
Roche empfiehlt, nur die Lyophilisatmenge zu rekonstituieren, die für die sofortige Anwendung benötigt wird. Die rekonstituierte Lösung kann bei -15 bis -25 °C bis zu einer Woche aufbewahrt werden. Wiederholtes Einfrieren und Auftauen ist zu vermeiden, da die Aktivität nach der Rekonstituierung abnimmt.
Inhibitoren:
Collagenase-Inhibitoren: EDTA, EGTA, Cys, His, DTT, 2-Mercaptoethanol
Collagenase wird durch Serum nicht gehemmt.
Clostripain-Inhibitoren: TLCK
Trypsin-Inhibitoren: Aprotinin, Trypsin-Inhibitor (Eiklar, Sojabohnen), Serum
Arbeitskonzentration: 0,5 bis 2,5 mg/ml
Lagerbedingungen (Arbeitslösung): -15 bis -25 °C
Roche empfiehlt, nur die Lyophilisatmenge zu rekonstituieren, die für die sofortige Anwendung benötigt wird. Die rekonstituierte Lösung kann bei -15 bis -25 °C bis zu einer Woche aufbewahrt werden. Wiederholtes Einfrieren und Auftauen ist zu vermeiden, da die Aktivität nach der Rekonstituierung abnimmt.
Rekonstituierung
Rekonstituierung in jeder ausgeglichenen Salzlösung (z.B. HBSS)
Lagerung und Haltbarkeit
Behälter dicht verschlossen an einem trockenen und gut belüfteten Ort aufbewahren.
Sonstige Hinweise
Nur für die Life-Science-Forschung. Nicht zur Verwendung in diagnostischen Verfahren vorgesehen.
Versandbedingungen können variieren
Signalwort
Danger
H-Sätze
Gefahreneinstufungen
Eye Irrit. 2 - Resp. Sens. 1 - Skin Irrit. 2 - STOT SE 3
Zielorgane
Respiratory system
Lagerklassenschlüssel
11 - Combustible Solids
WGK
WGK 1
Flammpunkt (°F)
does not flash
Flammpunkt (°C)
does not flash
Analysenzertifikate (COA)
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