N8264

Nukleosidphosphorylase aus Mikroorganismen

lyophilized powder, ≥10 units/mg protein

• Synonym(e): Nukleosidphosphorylase bacterial, PNP, Purinnukleosid:Orthophosphatribosyltransferase, Purinnukleosidphosphorylase
• CAS-Nummer: 9030-21-1
• EC-Nummer: 2.4.2.1 (BRENDA, IUBMB)
• EG-Nummer: 232-857-3
• MDL-Nummer: MFCD00131739
• UNSPSC-Code: 12352204

Eigenschaften

• Form: lyophilized powder
• Spezifische Aktivität: ≥10 units/mg protein
• Mol-Gew.: ~120 kDa
• Zusammensetzung: Protein, 40-80%
• Lagertemp.: −20°C
• InChI: 1S/C10H12N4O4/c15-2-6-7(16)8(17)10(18-6)14-4-13-5-1-11-3-12-9(5)14/h1,3-4,6-8,10,15-17H,2H2/t6-,7-,8-,10-/m1/s1
• InChIKey: MRWXACSTFXYYMV-FDDDBJFASA-N

Beschreibung

Allgemeine Beschreibung

Nukleosidphosphorylase ist ein wesentliches Enzym für die Biosynthese von Nukleosiden.

Nukleosidphosphorylasen sind trimer und haben eine Molekülmasse von etwa 100 kDa. Jedes Monomer besteht aus einem gemischten β-Faltblatt, das von 8 α-Helices umgeben ist, und einer Purinbindungsstelle in der hydrophoben Tasche.

Anwendung

Nukleosidphosphorylase aus Mikroorganismen wird wie folgt verwendet:

• im Phosphopentomutase-Assay zur Adenosinsynthese
• zur Umwandlung von 7-Methylthioguanosin zu 7-Methylthioguanin
• bei der Synthese von Zytokinen in lyophilisierten Baumwollpflanzenproben

Nukleosidphosphorylase wird in gekuppelten Enzymsystemen zum Messen der Proteindephosphorylierung verwendet.

Biochem./physiol. Wirkung

Dieses Enzym ist nützlich für den enzymatischen Nachweis von anorganischem Phosphor, 5′-Nukleotidase und Adenosindeaminase, wenn es mit Xanthinoxidase (XTO-212) und Uricase (UAO-201, UAO-211) gekuppelt wird. Purinnukleosidphosphorylase kann sowohl die Phosphorolyse als auch Synthese von Purindesoxy- und Ribonukleosiden durchführen. Es wurde außerdem festgestellt, dass membranassoziierte Nukleosidphosphorylasen eine transmembrane Orientierung mit ihren Basen und Ribose-1-P-Bindungsstellen an gegenüberliegenden Seiten der Membran aufweisen können.

Nukleosidphosphorylase katalysiert die Synthese von Nukleosidderivaten.

Katalysiert die folgende Reaktion:Purinnukleosid + Phosphat = Purin + alpha-D-Ribose-1-Phosphat

Physikalische Eigenschaften

Isoelektrischer Punkt: 4,1 +/- 0,1
Michaelis-Konstanten: 6,4 x 10^-5 M (Inosin), 3,2x10^-4 M (Pi)
Inhibitoren: p-Chlormercuribenzoat, SDS, Hg⁺⁺, Ag⁺ Optimaler pH-Wert: 7,5–8,0
Optimale Temperatur: 65 °C
pH-Stabilität: pH-Wert 6,0-9,0 (30 °C, 16 Std.)
Wärmestabilität: unter 60 °C (pH-Wert 7,7, 30 Min.)

Einheitendefinition

Eine Einheit löst je Min. bei einem pH-Wert von 7,4 und 25 °C die Phosphorolyse von 1,0 μmol Inosin zu Hypoxanthin und Ribose-1-phosphat aus.

Physikalische Form

Das lyophilisierte Pulver enthält Natriumgluconat, Mannitol und EDTA.

Sicherheitshinweise

• Lagerklassenschlüssel: 11 - Combustible Solids
• WGK: WGK 3
• Flammpunkt (°F): Not applicable
• Flammpunkt (°C): Not applicable
• Persönliche Schutzausrüstung: Eyeshields, Gloves, type N95 (US)