ELONGN-RO

Expand^™ Long Range dNTPack

suitable for PCR, hotstart: no, Long Range PCR

• Synonym(e): Long Range-PCR, Long Template-PCR, Nukleotid Gemische und Sets, PCR-Enzyme
• EC-Nummer: 2.7.7.7 (BRENDA, IUBMB)
• UNSPSC-Code: 41106300

Eigenschaften

• Verwendung: sufficient for ≤1000 reactions (04829069001); sufficient for ≤200 reactions (04829042001); sufficient for >50 reactions (04829034001)
• Qualitätsniveau: 100
• Leistungsmerkmale: Long Range PCR; dNTPs included; hotstart: no
• Verpackung: pkg of 3,500 U (04829069001 [5x700 U]); pkg of 175 U (04829034001); pkg of 700 U (04829042001)
• Hersteller/Markenname: Roche
• Parameter: 68 °C optimum reaction temp.
• Methode(n): PCR: suitable
• Aufnahme: purified DNA
• Lagertemp.: −20°C

Beschreibung

Allgemeine Beschreibung

Das optimierte Expand Long Range dNTPack ist die zweite Generation des Expand Long Template PCR-Systems und auf eine konstante Amplifikation von PCR-Produkten von 5 kb bis zu 25 kb aus genomischer DNA (bzw. von bis zu 40 kb aus λ DNA-Templates) ausgerichtet. Der enthaltene Puffer kann für alle PCR-Produktgrößen verwendet werden. Für eine ggf. erforderliche Optimierung sind zudem ein Puffer ohne MgCl₂ und separate Flaschen mit MgCl₂ und DMSO im Lieferumfang enthalten. Das Expand Long Range dNTPack enthält ein spezielles Enzymgemisch, das aus thermostabiler Taq-DNA-Polymerase und einer thermostabilen DNA-Polymerase mit Korrekturleseaktivität besteht. Dieses leistungsstarke Polymerasegemisch erzeugt eine hohe Ausbeute an PCR-Produkt. Durch die inhärente 3′–′5 Exonuklease-Aktivität der Korrekturlese-Polymerase kopiert das Expand Long Range dNTPack die DNA dreimal genauer als die Taq-DNA-Polymerase.

Spezifität

Hitzeinaktivierung: > 92 °C

Anwendung

Das Expand Long Range dNTPack ist optimiert für eine effiziente Amplifikation von langen genomischen DNA-Fragmenten von 5 kb bis 25 kb und zeichnet sich zudem durch eine dreimal höhere Genauigkeit als Taq-DNA-Polymerase aus. Das Expand Long Range dNTPack eignet sich ideal für:

• Genomkartierungen und -sequenzierungen
• Contig-Konstruktionen
• Charakterisierungen geklonter Sequenzen in Lambda-Phagen oder Kosmiden
• Klonierungen und Analysen von eukaryotischen Genen
• Schnelle Ermittlung und Klonierung kompletter Gene aus genomischer DNA- oder einer cDNA-Sequenz als Ausgangsmaterial
• Zweistufige RT-PCR

Das speziell entwickelte Pufferset, die hochreine PCR-Nukleotidmischung und die optimierte Mischung thermostabiler DNA-Polymerasen eignen sich für folgende Anwendungen:

• PCR
• Amplifikation großer Fragmente
• RT-PCR

Das Expand 20kb PLUS PCR-System, dNTPack wird für Amplikongrößen zwischen 20 und 35 kb empfohlen.

Leistungsmerkmale und Vorteile

Das Expand Long Range PCR-System eignet sich besonders für die Genomkartierung und -sequenzierung, Contig-Konstruktionen, die Charakterisierung geklonter Sequenzen in Lambda-Phagen oder Kosmiden sowie für die Klonierung und Analyse eukaryotischer Gene.
Mit den enthaltenen Reaktionspuffern können DNA-Fragmente zwischen 5 und 20 kb aus humangenomischer DNA und Fragmente von 40 kb aus λDNA amplifiziert werden.
Verwenden Sie 3,75 U für eine 50-μl-Standard-PCR.
Jeder dNTPack enthält 10 mM additivfreie Natriumsalz-Nukleotide als gebrauchsfertige Mischung.

• Amplifikation von langen Templates

von bis zu 25 kb mit hoher Spezifität, Ausbeute und höherer Genauigkeit.

• Zeit- und Ressourcenersparnis.

Ein Puffer, der sich mit der DMSO- und MgCl₂-Lösung weiter verfeinern lässt.

• Für alle Anwendungen mit langen Templates geeignet.

Hohe Ausbeute der gewünschten Fragmente.

• Kosteneffizient.

Einsatz der praktischen Fertiglösung von dNTPs in PCR-Qualität.

Verpackung

1 Kit mit 6 Komponenten

Qualität

Jede Charge wird mit humangenomischer DNA und spezifischen Primern für ein 9 kb-, 12 kb- und 15 kb-Fragment einem PCR-Funktionstest unterzogen. Das Enzymgemisch wird gemäß den aktuellen Qualitätskontrollverfahren auf die Abwesenheit kontaminierender Aktivitäten, darunter Endo- und Exonukleasen und Nicking-Aktivität, getestet.

Einheitendefinition

Volumenaktivität: 5 U/μl

Angaben zur Herstellung

Arbeitskonzentration: Standardenzymkonzentration: 3,5 U pro 50 μl Reaktion

Sonstige Hinweise

Nur für die Life-Science-Forschung. Nicht zur Verwendung in diagnostischen Verfahren vorgesehen.

Rechtliche Hinweise

Die Verwendung dieses Produkts unterliegt US-Patentansprüchen und entsprechenden Patentansprüchen außerhalb der USA. Der Erwerb dieses Produkts umfasst eine beschränkte, nicht übertragbare Immunität gegenüber Rechtsschutzverfahren gemäß den oben genannten Patentansprüchen für den ausschließlichen Gebrauch dieser Menge des Produktes für eigene interne Forschungsanwendungen des Käufers. Es wird weder ausdrücklich noch implizit oder durch Rechtsverwirkung ein Rechtsanspruch unter anderen Patentsprüchen, ein Rechtsanspruch zur Erbringung kommerzieller Leistungen jeglicher Art übertragen, einschließlich, aber nicht beschränkt auf, das Berichten der Ergebnisse aus den Aktivitäten des Käufers gegen Entgelt oder andere kommerzielle Gegenleistungen. Dieses Produkt ist nur für Forschungszwecke vorgesehen. Diagnostische Verwendungen nach Roche-Patentansprüchen erfordern eine gesonderte Lizenz von Roche. Weitere Informationen über den Erwerb von Lizenzen erhalten Sie vom Director of Licensing, Applied Biosystems, 850 Lincoln Centre Drive, Foster City, California, 94404, USA.

Expand is a trademark of Roche

Nur Kit-Komponenten

• Expand Long Range Enzyme Mix
• Expand Long Range Buffer with 12.5 mM MgCl₂ 5x concentrated
• Expand Long Range Buffer without MgCl₂ 5x concentrated
• MgCl₂ Stock Solution 25 mM
• DMSO 100%
• PCR Nucleotide Mix

Sicherheitshinweise

• H-Sätze: H412
• P-Sätze: P273 - P501
• Gefahreneinstufungen: Aquatic Chronic 3
• Lagerklassenschlüssel: 10 - Combustible liquids
• WGK: WGK 2
• Flammpunkt (°F): 203.0 °F
• Flammpunkt (°C): 95 °C