04942086001
Roche
Dispase® I (neutrale Protease, Qualitätsgrad I)
lyophilized, ≥10 units/mg protein (20 U/vial (37 °C, casein as substrate, pH 7.5)), optimum pH 6.0-8.5
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About This Item
Empfohlene Produkte
Biologische Quelle
Bacillus polymyxa
Qualitätsniveau
Form
lyophilized
Spezifische Aktivität
≥10 units/mg protein (20 U/vial (37 °C, casein as substrate, pH 7.5))
Verpackung
pkg of 10 × ~2 mg
Hersteller/Markenname
Roche
Konzentration
0.6-2.4 U/mL
Methode(n)
tissue processing: suitable
Farbe
white
Optimaler pH-Wert
6.0-8.5
Löslichkeit
water: soluble
Anwendung(en)
life science and biopharma
sample preparation
Versandbedingung
wet ice
Lagertemp.
2-8°C
Allgemeine Beschreibung
Dispase ist eine neutrale, schnell wirkende, sanfte Protease, die die intakte Epidermis von der Dermis trennt. Außerdem trennt sie intakte kultivierte Epithelzellen von der Trägerschicht (Substratum). Sie spaltet die Basalmembranzone und die Epithelzellen bleiben intakt.
Spezifität
Dispase® ist eine unspezifische Metalloprotease.
Anwendung
Dispase® wird zur Präparation von Zellen aus vielen verschiedenen Geweben und Organen verwendet. Das Enzym hat sich als rasch, effektiv und doch sanft wirkendes Mittel erwiesen, um die extrazelluläre Matrix von Geweben aufzuschließen und so einzelne Zellen für Zellkulturen freizusetzen (primäre Zellkulturen) oder bereits kultivierte Zellen für den Transfer zu einem neuen Substrat zu ernten (sekundäre Kultur). Außerdem wird es verwendet, um ein unerwünschtes Verklumpen von in Suspension kultivierten Zellen zu verhindern.
Leistungsmerkmale und Vorteile
- Rasches, effektives und doch sanftes Mittel für die Freisetzung intakter Zellen
- Wahrt die Integrität der Zellmembranen
- Nicht-Säuger-Quelle – frei von Mycoplasma und Kontamination mit Tierviren
- Extrem stabil gegenüber Einflüssen von Temperatur und pH-Wert sowie Interferenz von Serumbestandteilen
- Leicht inaktivierbar durch Chelatbildner oder Verdünnung
- Für höhere Aktivität und bequeme Anwendung
Inhalt
10 Fläschchen zu je ca. 2 mg (= 20 U/Fläschchen).
Spezifikationen
Enzymaktivität: = 10 U/mg (+37 °C, Casein als Substrat, pH 7,5)
Inhibitoren: EDTA, EGTA, Hg2+, andere Schwermetalle. Dispase wird durch Serum nicht gehemmt.
Inhibitoren: EDTA, EGTA, Hg2+, andere Schwermetalle. Dispase wird durch Serum nicht gehemmt.
Einheitendefinition
Eine Einheit ist die Enzymaktivität, die Folin-positive Aminosäuren und Peptide aus Casein entsprechend 1 μmol (181 μg) Tyrosin in 1 Minute unter Testbedingungen (pH 7,5, +37 °C) freisetzt.
Ein praktischer Vergleich von Dispase® in RAS-Einheiten mit den in der japanischen Literatur zitierten (wo Konzentrationen von 1.000 bis 2.000 Dispase®-Einheiten/ml nicht unüblich sind) lässt darauf schließen, dass eine „Roche Applied Science“-Einheit Dispase® I rund 416 japanischen Dispase®-Einheiten entspricht.
Eine „Roche Applied Science“-Einheit Dispase® entspricht 181 Proteaseeinheiten (PU), gemessen als Freisetzung von Aminosäuren entsprechend 1 μg Tyrosin pro Minute und ml bei einem pH-Wert von 7,5 und +37 °C.
Ein praktischer Vergleich von Dispase® in RAS-Einheiten mit den in der japanischen Literatur zitierten (wo Konzentrationen von 1.000 bis 2.000 Dispase®-Einheiten/ml nicht unüblich sind) lässt darauf schließen, dass eine „Roche Applied Science“-Einheit Dispase® I rund 416 japanischen Dispase®-Einheiten entspricht.
Eine „Roche Applied Science“-Einheit Dispase® entspricht 181 Proteaseeinheiten (PU), gemessen als Freisetzung von Aminosäuren entsprechend 1 μg Tyrosin pro Minute und ml bei einem pH-Wert von 7,5 und +37 °C.
Physikalische Form
weißes Lyophilisat, vor der Lyophilisierung durch eine Membran mit Porengröße von 0,2 μm filtriert
Angaben zur Herstellung
Aktivator: Die optimale Ca2+-Konzentration liegt bei 2 mM. Die Enzympräparate enthalten ausreichend Ca2+ für optimale Aktivität.
Arbeitskonzentration: 0,6 bis 2,4 U/ml
Arbeitslösung: Herstellung von Stammlösung und Arbeitslösungen:
Zur Herstellung einer Stammlösung mit einer Konzentration von 10 mg/ml die lyophilisierte Dispase® I in HEPES-gepufferter Kochsalzlösung (50 mM HEPES/KOH pH 7,4, 150 mM NaCl) auflösen. Zur Herstellung der Arbeitslösung die oben beschriebene Stammlösung mit dem Kulturmedium für die isolierten Zellen verdünnen, bis eine endgültige Konzentration von 0,6 bis 2,4 U/ml erreicht ist. Wichtig: Konzentrationen über 2,4 U/ml werden nicht empfohlen. Für optimale Ergebnisse die Arbeitslösung mit einer 0,22-μm-Filtermembran filtern.
Lagerbedingungen (Arbeitslösung): -15 bis -25 °C
Die rekonstituierte Stammlösung ist bei 2 bis 8 °C 2 Wochen lang stabil. Für eine Lagerung von bis zu 2 Monaten sollte die Stammlösung in Aliquoten eingefroren werden. Wiederholtes Einfrieren und Auftauen ist zu vermeiden.
Die mit PBS verdünnte Stammlösung ist bei 2 bis 8 °C 3 Tage lang stabil.
Arbeitskonzentration: 0,6 bis 2,4 U/ml
Arbeitslösung: Herstellung von Stammlösung und Arbeitslösungen:
Zur Herstellung einer Stammlösung mit einer Konzentration von 10 mg/ml die lyophilisierte Dispase® I in HEPES-gepufferter Kochsalzlösung (50 mM HEPES/KOH pH 7,4, 150 mM NaCl) auflösen. Zur Herstellung der Arbeitslösung die oben beschriebene Stammlösung mit dem Kulturmedium für die isolierten Zellen verdünnen, bis eine endgültige Konzentration von 0,6 bis 2,4 U/ml erreicht ist. Wichtig: Konzentrationen über 2,4 U/ml werden nicht empfohlen. Für optimale Ergebnisse die Arbeitslösung mit einer 0,22-μm-Filtermembran filtern.
Lagerbedingungen (Arbeitslösung): -15 bis -25 °C
Die rekonstituierte Stammlösung ist bei 2 bis 8 °C 2 Wochen lang stabil. Für eine Lagerung von bis zu 2 Monaten sollte die Stammlösung in Aliquoten eingefroren werden. Wiederholtes Einfrieren und Auftauen ist zu vermeiden.
Die mit PBS verdünnte Stammlösung ist bei 2 bis 8 °C 3 Tage lang stabil.
Lagerung und Haltbarkeit
Bei 2 bis 8 °C aufbewahren (Trocken lagern!)
Sonstige Hinweise
Nur für die Life-Science-Forschung. Nicht für den Einsatz in diagnostischen Verfahren geeignet.
Rechtliche Hinweise
Dispase is a registered trademark of Godo Shusei Co., Ltd.
Signalwort
Danger
H-Sätze
Gefahreneinstufungen
Eye Irrit. 2 - Resp. Sens. 1 - Skin Irrit. 2 - STOT SE 3
Zielorgane
Respiratory system
Lagerklassenschlüssel
11 - Combustible Solids
WGK
WGK 1
Flammpunkt (°F)
does not flash
Flammpunkt (°C)
does not flash
Analysenzertifikate (COA)
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