Marcadores de proteínas

Marcadores de peso molecular de proteínas, às vezes chamados de padrões de proteínas ou marcadores de proteínas, são usados para estimar o peso molecular de proteínas de interesse e monitorar o progresso da separação eletroforética ou transferência em western blot. Os marcadores de peso molecular não corados, de modo geral, consistem em uma mistura de proteínas nativas ou recombinantes purificadas de pesos moleculares definidos. Visualizar sua localização em um gel ou membrana requer uma etapa de coloração. Os marcadores de proteínas pré-corados permitem o fácil rastreamento da separação eletroforética e eficiência de transferência. Padrões individuais de proteínas também estão disponíveis para aplicações de eletroforese de proteínas, focalização isoelétrica e PAGE bidimensional.

Padrões de proteínas mPAGE^®

• Os padrões de proteínas para western blot mPAGE^® consistem em sete proteínas recombinantes com 20 kDa, 30 kDa, 40 kDa, 50 kDa, 60 kDa, 80 kDa e 120 kDa, com um sítio de ligação à IgG que se liga à maioria dos anticorpos. Isso possibilita a visualização tanto do marcador de proteína quanto das proteínas da amostra no mesmo western blot, sem reagentes adicionais.
• Os padrões de proteínas coloridos mPAGE^® incluem uma mistura de dez proteínas pré-coradas, altamente purificadas, que variam de 10 kDa a 203 kDa, acopladas por ligações covalentes a diferentes cromóforos. Os padrões de proteínas coloridos mPAGE^® são projetados para possibilitar a observação da separação das proteínas durante a análise por SDS-PAGE, verificar a eficiência de transferências de western blot nas membranas e determinar aproximadamente o tamanho de proteínas.
• Os padrões de proteínas não corados mPAGE^® incluem uma mistura de doze proteínas recombinantes não coradas que variam de 10 kDa a 200 kDa. As bandas de 85 kDa, 25 kDa e 10 kDa têm maior intensidade para servir como pontos de referência. Os padrões de proteína não corados mPAGE^® são adequados para determinar o peso molecular após análises de SDS-PAGE ou western blot e servem como padrões para calibrar a mobilidade de marcadores pré-corados.

Marcadores de proteínas ColorBurst

Os marcadores ColorBurst são compostos de oito polipeptídeos que foram quimicamente reduzidos e conjugados a corantes de cores brilhantes. Os marcadores Colorburst podem ser usados para estimar pesos moleculares das amostras, monitorar o progresso de uma corrida eletroforética ou confirmar a conclusão de eletroblots.

Marcadores de proteínas SigmaMarker™

Os marcadores de proteínas SigmaMarker™ são projetados para uso com SDS-PAGE e abrangem o intervalo de pesos moleculares comuns à maioria das proteínas ou suas subunidades. Estes marcadores de amplo alcance na faixa alta e baixa são liofilizados com tampão de amostra para que estejam prontos para uso após a reconstituição com água desionizada. Os marcadores são formulados para produzir uma distribuição de bandas bem definidas de intensidade aproximadamente igual após a eletroforese e coloração com azul de coomassie.

Marcadores de proteínas Perfect

Os marcadores de proteínas Perfect foram projetados para uso de rotina em SDS-PAGE para permitir a determinação de tamanho de amostras desconhecidas com alta precisão. Ao contrário de muitos marcadores convencionais (p. ex., ovalbumina, albumina sérica), os marcadores de proteínas Perfect não contêm oligossacarídeos que causam migração anômala, bandas heterogêneas "difusas" ou induzem a estimativas imprecisas de tamanho. Estes marcadores são otimizados para uso com o corante azul de coomassie, mas quantidades ajustadas também podem ser usadas com outros métodos de coloração de gel, incluindo coloração com prata e coloração com corantes fluorescentes.

Marcadores de proteínas de alcance na faixa ultrabaixa

Marcadores de peso molecular na faixa ultrabaixa (P.M. de 1.060 a 26.600) foram usados como marcadores de proteínas em SDS-PAGE e western blot. Recomenda-se uma etapa de fixação.

Marcadores de proteínas não desnaturantes

Os marcadores não desnaturantes foram usados como padrões para PAGE nativa, bem como para calibrar colunas para cromatografia de exclusão em gel.

Marcadores biotinilados

A mistura padrão de pesos moleculares biotinilados contém proteínas que são conjugadas com biotina para uso tanto como padrões para SDS-PAGE quanto como padrões para western blot. A visualização é realizada usando estreptavidina-peroxidase com um substrato colorimétrico ou luminescente apropriado. Esses marcadores podem ser detectados simultaneamente com procedimentos de imunocoloração.