Corantes de gel para eletroforese de proteínas

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Soluções para fixação

Após a eletroforese em gel, as proteínas são tipicamente "fixadas" no gel para evitar sua dispersão antes da coloração. Certos corantes de gel contêm compostos químicos eliminam a necessidade de fixar géis antes da coloração.

Corantes de gel colorimétricos para proteínas

• O azul de coomassie brilhante é usado para corar proteínas em géis de poliacrilamida por meio de interações eletrostáticas com os grupos amino e carboxila das proteínas.
• O corante de gel para proteínas ReadyBlue™ é um corante de coomassie coloidal rápido e sensível para géis de poliacrilamida fornecido como uma solução pronta para uso, permitindo um protocolo mais rápido e simplificado. O ReadyBlue™ pode ser visualizado por métodos de fluorescência IV ou colorimétricos. Esta formulação segura não contém solventes orgânicos ou ácido fosfórico e pode ser reutilizada até 3 vezes. O ReadyBlue™ demonstrou ter sensibilidade de até 2 ng por banda.
• O corante de proteínas InstantBlue™ é um corante de solução pronta para uso que é especialmente formulado para detecção rápida, sensível e segura de suas proteínas. Os géis de proteína podem ser corados em minutos com InstantBlue™, sem necessidade de lavagem, fixação ou descoloração. A formulação do InstantBlue™ é atóxica e não contém metanol.
• O reagente de coloração de gel EZBlue™ é um corante para proteínas coloidal G-250 de azul de coomassie brilhante que melhora os resultados da eletroforese de proteínas e, ao mesmo tempo, reduzo significativamente o tempo de coloração. Por ser um corante coloidal, ele reage apenas com proteínas, e não com o gel em si. A coloração de fundo é reduzida, de modo que as bandas de proteína podem ser visualizadas quase imediatamente em géis de poliacrilamida e membranas de PVDF. Não é necessária nenhuma etapa de descoloração, embora uma lavagem com água possa intensificar as bandas e clarear o fundo. O reagente EZBlue™ é extremamente sensível, detectando quantidades mínimas a partir de 5 ng de proteína.
• O kit de detecção de proteínas reversível é um sistema de detecção exclusivo projetado para corar proteínas em membranas de náilon, nitrocelulose e PVDF, ou géis de PAGE, com sensibilidade de detecção semelhante à dos corantes de Coomassie. A maioria dos outros corantes produz alto nível de interferência em membranas de náilon devido a fortes interações de carga com a membrana. A coloração é facilmente reversível com uma solução de EDTA, de modo que o blot possa ser reutilizado para western blot ou para análise de sequências de aminoácidos.
• O corante naftol azul preto pode ser usado para corar proteínas em géis de poliacrilamida, géis de agarose e membranas de nitrocelulose. Após a eletroforese, recomenda-se fixar as proteínas ao gel. O gel é, em seguida, corado com naftol azul preto 0,1% em ácido acético a 7% (v/v) por pelo menos 2 horas e descorado com uma solução de ácido acético a 7% (v/v). A sensibilidade de detecção é de aproximadamente 20% da sensibilidade do azul de coomassie
• Proporcionando a maior sensibilidade, o kit de coloração com prata ProteoSilver™ tem uma sensibilidade ≥0,1 ng de proteína por banda, com um tempo de incubação de 3 a 12 minutos. Este corante é recomendado para proteínas de baixíssima abundância e é compatível com aplicações de MALDI-TOF.

Corantes de gel fluorescentes para proteínas

• O corante de gel fluorescente para proteínas em uma única etapa EZFluor™ é um corante de gel fluorescente para proteínas pronto para uso que requer apenas uma única etapa de coloração de 5 a 30 minutos, sem fixação, e é capaz de detectar quantidades mínimas a partir de 1 a 10 ng de proteína por banda. A coloração é totalmente compatível com espectrometria de massa e sequenciamento baseado no método de Edman.
• O corante de gel fluorescente para proteínas em uma única etapa EZFluor™ UV é um corante de gel para proteínas pronto para uso, projetado para imageamento usando um transiluminador UV e filtro de brometo de etídio compatível com espectrometria de massa.
• O corante de gel para proteínas SYPRO^® Ruby é um corante fluorescente ultrassensível, pronto para uso, para detectar proteínas separadas por eletroforese em gel de poliacrilamida (PAGE). Este corante, projetado especialmente para uso em PAGE bidimensional, provou ser uma excelente escolha para géis usados em PAGE unidimensional e também em focalização isoelétrica (IEF). O corante de gel para proteínas SYPRO^® Ruby atinge sensibilidade comparável a muitas técnicas de coloração com prata.
• O SYPRO^® Orange (laranja) é semelhante ao SYPRO^® Red (vermelho), embora seja um pouco mais brilhante e apresente fluorescência de fundo ligeiramente maior. O corante é eficientemente excitado por iluminação UV ou de banda larga. Ele não é adequado para coloração de proteínas em blots ou em géis de IEF e apresenta menor sensibilidade na coloração de proteínas em géis bidimensionais.

Reagentes de descoloração

• O CoZap é usado para a remoção rápida do corante azul de coomasie. O exclusivo bloco absorvente CoZap é colocado diretamente na bandeja de descoloração e absorve todo o corante livre na solução, eliminando a necessidade de trocar a solução de descoloração.