RNAINH-RO
Roche
O inibidor de RNase Protector
Sinônimo(s):
inibidor de rnase, protetor
Faça loginpara ver os preços organizacionais e de contrato
About This Item
Código UNSPSC:
41181611
NACRES:
NA.21
Produtos recomendados
Ensaio
>95% (SDS-PAGE)
Nível de qualidade
peso molecular
~50 kDa
embalagem
pkg of 10,000 U (03335402001 [5 x 2,000 U])
pkg of 2,000 U (03335399001)
fabricante/nome comercial
Roche
Parâmetros
25-55 °C optimum reaction temp.
faixa de pH
5.0-9.0
temperatura de armazenamento
−20°C
Descrição geral
Conteúdo
Inibidor de RNase Protector (40 U/μl) em tampão de armazenamento: 20 mM de HEPES-KOH, 50 mM de KCl, 8 mM de ditiotreitol, 50% de glicerol (v/v), pH aproximadamente 7,6 (+4 °C).
Inibidor de RNase Protector (40 U/μl) em tampão de armazenamento: 20 mM de HEPES-KOH, 50 mM de KCl, 8 mM de ditiotreitol, 50% de glicerol (v/v), pH aproximadamente 7,6 (+4 °C).
O inibidor de RNase Protector inativa uma ampla gama de RNases, incluindo
- RNase A
- RNase B
- RNase T2
- proteger o mRNA em reações de síntese de cDNA, RT-PCR (em termocicladores convencionais e sistemas de qPCR) ou reações de transcrição/tradução in vitro
- proteger o RNA viral durante a replicação viral in vitro
- inibir RNases durante o isolamento e purificação de RNA
- ser usado em ensaios de proteção contra RNases
- ajudar a preparar anticorpos sem RNases
Especificidade
O Protector RNase Inhibitor (20 U/ 20 μl de reação) inibe a RNase A até 1 ng, RNase B até 160 pg e RNase T2 até 0,03 U/μl de volume de reação.
RNase H não é inibido pelo Protector RNase Inhibitor.
Inativação por calor: > 65 °C
RNase H não é inibido pelo Protector RNase Inhibitor.
Inativação por calor: > 65 °C
Aplicação
O inibidor de RNase Protector pode ser usado para:
- Proteger o mRNA em reações de síntese de cDNA, RT-PCR (em termocicladores convencionais e sistemas de qPCR), p. ex., com os instrumentos LightCycler®, sistema de transcrição/tradução in vitro, ensaio de proteção contra RNase, síntese de RNA in vitro
- Proteger o RNA viral durante a replicação viral in vitro
- Inibir RNases durante o isolamento e purificação de RNA
- Ajudar a preparar anticorpos sem RNases
- Sintetizar sondas de RNA para hibridização in situ
Características e benefícios
- Depende de um inibidor de RNase termoestável: O inibidor de RNase Protector permanece estável, mesmo quando se usa transcriptases reversas termoestáveis, como a transcriptase reversa Transcriptor.
- Beneficie-se de uma ampla gama de condições de reação: O inibidor de RNase Protector é ativo em pH 5,0 a 9,0 e em temperaturas entre +25 °C a +55 °C (a atividade parcial ainda é mensurável a +60 °C).
- Elimina interferência em diferentes aplicações de análise de RNA: Mantém o desempenho mesmo quando adicionado em concentração 16 vezes maior que a concentração padrão.
- Insista em uma purificação altamente purificada: Cada lote é testado quanto à função, usando técnicas como RT-PRC quantitativo para garantir a ausência de endonucleases, ribonucleases ou atividade de corte, segundo os procedimentos de controle de qualidade atuais.
Qualidade
Cada lote de inibidor de RNase Protector é testado quanto à função com o kit de RT-PCR Titan One Tube e o kit LightCycler DPD. O inibidor de RNase Protector também é testado quanto a atividades contaminantes, conforme descrito abaixo.
Tampão de teste: 50 mM de Tris-HCl, 10 mM de MgCl2, 0,1 mM de EDTA, 7 mM de β-mercaptoetanol; pH 7,5 (+37 °C).
Ausência de endonucleases: 1 μg de fragmentos de DNA EcoR I/Hind III* λé incubado com inibidor de RNase Protector em 50 μl de tampão de teste a +37 °C por 1 hora. A quantidade de inibidor que causa nenhuma alteração no padrão de formação de bandas é referida como “Endo”.
Ausência de atividade de cortes (nicking): 1 μg de DNA pBR322 superenrolado é incubado com inibidor de RNase Protector em 50 μl de tampão de teste a +37 °C por 1 hora. A quantidade de inibidor que não causa nenhum afrouxamento do DNA superenrolado é referida como “Nick. Act.".
Ausência de ribonuclease (1): 5 μg de RNA MS2 são incubados com inibidor de RNase Protector por 1 hora a +37 °C em um volume final de 50 μl. A quantidade de inibidor que não causa nenhuma degradação do RNA MS2 é referida como “RNase 1”.
Ausência de ribonuclease (2): 5 μg de RNA MS2 são incubados com inibidor de RNase Protector por 1 hora a +37 °C, depois de 10 minutos a +65 ºC em um volume final de 50 μl. A quantidade de inibidor que causa nenhuma degradação do RNA MS2 é referida como “RNase 2”.
Tampão de teste: 50 mM de Tris-HCl, 10 mM de MgCl2, 0,1 mM de EDTA, 7 mM de β-mercaptoetanol; pH 7,5 (+37 °C).
Ausência de endonucleases: 1 μg de fragmentos de DNA EcoR I/Hind III* λé incubado com inibidor de RNase Protector em 50 μl de tampão de teste a +37 °C por 1 hora. A quantidade de inibidor que causa nenhuma alteração no padrão de formação de bandas é referida como “Endo”.
Ausência de atividade de cortes (nicking): 1 μg de DNA pBR322 superenrolado é incubado com inibidor de RNase Protector em 50 μl de tampão de teste a +37 °C por 1 hora. A quantidade de inibidor que não causa nenhum afrouxamento do DNA superenrolado é referida como “Nick. Act.".
Ausência de ribonuclease (1): 5 μg de RNA MS2 são incubados com inibidor de RNase Protector por 1 hora a +37 °C em um volume final de 50 μl. A quantidade de inibidor que não causa nenhuma degradação do RNA MS2 é referida como “RNase 1”.
Ausência de ribonuclease (2): 5 μg de RNA MS2 são incubados com inibidor de RNase Protector por 1 hora a +37 °C, depois de 10 minutos a +65 ºC em um volume final de 50 μl. A quantidade de inibidor que causa nenhuma degradação do RNA MS2 é referida como “RNase 2”.
Definição da unidade
Uma unidade do inibidor de RNase Protector é definida como a quantidade de proteína necessária para inibir 50% da atividade de 5 ng de RNase A.
Teor de unidades: A atividade é medida segundo Blackburn como a capacidade de inibir a hidrólise de citidina-2′ cíclica: Ácido 3′-monofosfórico. Em condições de ensaio, 200 U do inibidor de RNase Protector inibe 50% da atividade de 1 μg de RNase A.
Atividade por volume: 40 U/μl
Teor de unidades: A atividade é medida segundo Blackburn como a capacidade de inibir a hidrólise de citidina-2′ cíclica: Ácido 3′-monofosfórico. Em condições de ensaio, 200 U do inibidor de RNase Protector inibe 50% da atividade de 1 μg de RNase A.
Atividade por volume: 40 U/μl
Nota de preparo
Concentração de trabalho:
de inibidor não interfere com o RT-PCR.)
- 5 a 10 U em RT-PCR em uma etapa
- 25 a 50 U em RT-PCR em duas etapas
- 20 U para transcrição in vitro
de inibidor não interfere com o RT-PCR.)
Outras notas
Especificações do produto:
Fonte: Pulmão de rato; o produto é produzido em E. coli recombinante
Ponto isoelétrico: pH 4,5
Temperatura na qual o inibidor de RNase Protector é ativo: 25 °C a +55 °C; a atividade parcial ainda é mensurável a +60 °C
Inativação: Em condições desnaturantes severas (temperaturas acima de +65 ºC), o inibidor é inativado
Biocarga: <50 UFC/ml
Teor de DNA: <100 pg/mg
Fonte: Pulmão de rato; o produto é produzido em E. coli recombinante
Ponto isoelétrico: pH 4,5
Temperatura na qual o inibidor de RNase Protector é ativo: 25 °C a +55 °C; a atividade parcial ainda é mensurável a +60 °C
Inativação: Em condições desnaturantes severas (temperaturas acima de +65 ºC), o inibidor é inativado
Biocarga: <50 UFC/ml
Teor de DNA: <100 pg/mg
Somente para fins de pesquisas biológicas. Não é destinado ao uso em procedimentos diagnósticos.
Informações legais
AVISO AO COMPRADOR: AVISO LEGAL DE LICENÇA
Este produto é otimizado para uso em reação em cadeia da polimerase (PCR), coberto por patentes de propriedade da F. Hoffmann-La Roche Ltd ("Roche"). Nenhuma licença sob estas patentes de uso do processo de PCR é transmitida expressamente ou por embargo ao comprador por meio da compra deste produto. A licença para usar o processo de PCR para determinadas atividades de pesquisa e desenvolvimento acompanha a compra de certos reagentes da Roche, da Applied Biosystems ou de outros fornecedores licenciados′ quando usados juntamente com um termociclador autorizado, ou estão disponíveis diretamente através da Applied Biosystems. O uso para fins de diagnóstico requer licença da Roche. Pode-se obter mais informações sobre a compra de licenças contatando o Diretor de licenciamento no endereço: Applied Biosystems, 850 Lincoln Centre Drive, Foster City, Califórnia 94404, EUA.
Este produto é otimizado para uso em reação em cadeia da polimerase (PCR), coberto por patentes de propriedade da F. Hoffmann-La Roche Ltd ("Roche"). Nenhuma licença sob estas patentes de uso do processo de PCR é transmitida expressamente ou por embargo ao comprador por meio da compra deste produto. A licença para usar o processo de PCR para determinadas atividades de pesquisa e desenvolvimento acompanha a compra de certos reagentes da Roche, da Applied Biosystems ou de outros fornecedores licenciados′ quando usados juntamente com um termociclador autorizado, ou estão disponíveis diretamente através da Applied Biosystems. O uso para fins de diagnóstico requer licença da Roche. Pode-se obter mais informações sobre a compra de licenças contatando o Diretor de licenciamento no endereço: Applied Biosystems, 850 Lincoln Centre Drive, Foster City, Califórnia 94404, EUA.
LightCycler is a registered trademark of Roche
Código de classe de armazenamento
12 - Non Combustible Liquids
Classe de risco de água (WGK)
WGK 1
Ponto de fulgor (°F)
does not flash
Ponto de fulgor (°C)
does not flash
Escolha uma das versões mais recentes:
Já possui este produto?
Encontre a documentação dos produtos que você adquiriu recentemente na biblioteca de documentos.
Os clientes também visualizaram
Monica Frinchi et al.
Acta histochemica, 115(3), 252-256 (2012-08-18)
Although connexin36 (Cx36) has been studied in several tissues, it is notable that no data are available on Cx36 expression in the carotid body and the intestine. The present study was undertaken to evaluate using immunohistochemistry, PCR and Western blotting
Jurgen Schnermann et al.
American journal of physiology. Renal physiology, 305(9), F1352-F1364 (2013-09-21)
Deletions of claudin-2 (Cldn2) and aquaporin1 (AQP1) reduce proximal fluid reabsorption (PFR) by about 30% and 50%, respectively. Experiments were done to replicate these observations and to determine in AQP1/claudin-2 double knockout mice (DKO) if the effects of deletions of
Stefanie Dukowic-Schulze et al.
Frontiers in plant science, 5, 57-57 (2014-03-13)
High-throughput sequencing has become the large-scale approach of choice to study global gene expression and the distribution of specific chromatin marks and features. However, the limited availability of large amounts of purified cells made it very challenging to apply sequencing-based
Adam D Langenbacher et al.
EvoDevo, 7, 9-9 (2016-04-14)
Germ cells are specified during early development and are responsible for generating gametes in the adult. After germ cells are specified, they typically migrate to a particular niche in the organism where they reside for the remainder of its lifetime.
Yoshihiro Komatsu et al.
Methods in molecular biology (Clifton, N.J.), 1092, 1-15 (2013-12-10)
In situ hybridization is a powerful method for detecting endogenous mRNA sequences in morphologically preserved samples. We provide in situ hybridization methods, which are specifically optimized for mouse embryonic samples as whole mounts and section tissues. Additionally, β-Galactosidase (β-gal) is
Protocolos
Protector RNase Inhibitor Protocol & Troubleshooting
Conteúdo relacionado
Polymerase chain reaction (PCR) is a technique for amplifying nucleic acid molecules and is commonly used in many applications, including RT-PCR, hot start PCR, end point PCR and more.
Nossa equipe de cientistas tem experiência em todas as áreas de pesquisa, incluindo Life Sciences, ciência de materiais, síntese química, cromatografia, química analítica e muitas outras.
Entre em contato com a assistência técnica