SCR150
® Ensaio de detecção ALDH AldeRed
Sinônimo(s):
ALDH Assay, Aldehyde Dehydrogenase Assay, Cancer Stem Cell Assay
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About This Item
Código UNSPSC:
12352207
eCl@ss:
32161000
NACRES:
NA.84
Produtos recomendados
técnica(s)
cell culture | stem cell: suitable
flow cytometry: suitable
Nível de qualidade
fluorescência
λex 488 nm
λex 532 nm
λem 615 nm
método de detecção
fluorometric
Condições de expedição
wet ice
Categorias relacionadas
Descrição geral
O kit de detecção ALDH AldeRed fornece aos cientistas de câncer e células-tronco novas capacidades para isolamento e caracterização de células vivas. O reagente AldeRed é um substrato fluorescente vermelho deslocado para aldeído desidrogenase (ALDH), permitindo que as células sejam identificadas e isoladas por citometria de fluxo com o uso concomitante de linhagens celulares fluorescentes verdes, anticorpos, animais transgênicos e ensaios de repórter.
Saiba mais sobre o AldeRed em Nature Communications! (Descubra agora!)
A alta atividade de ALDH serve como um marcador universal de células-tronco, normais e malignas. As células podem ser identificadas e isoladas com base na atividade enzimática de ALDH, uma enzima desintoxicante responsável pela oxidação de subprodutos aldeído perigosos. O marcador ALDH tem sido usado para isolar células-tronco de câncer de várias malignidades humanas, incluindo bexiga, mama, cervical, cólon, cabeça e pescoço, fígado, pulmão, pâncreas, próstata e ovário. O ensaio AldeRed emprega um substrato fluorescente e não tóxico de ALDH (AldeRed 588-A) que se difunde livremente em células intactas e viáveis, mas permanece preso dentro das células uma vez convertidas por ALDH no ácido correspondente. A quantidade de fluorescência produzida é proporcional à atividade de ALDH nas células e é medida por citometria de fluxo, permitindo a classificação de células ativadas por fluorescência (FACS). Este kit fornece o inibidor de ALDH dietilaminobenzaldeído (DEAB), que é usado em testes de controle negativo necessários para avaliação de fluorescência de fundo.
Saiba mais sobre o AldeRed em Nature Communications! (Descubra agora!)
A alta atividade de ALDH serve como um marcador universal de células-tronco, normais e malignas. As células podem ser identificadas e isoladas com base na atividade enzimática de ALDH, uma enzima desintoxicante responsável pela oxidação de subprodutos aldeído perigosos. O marcador ALDH tem sido usado para isolar células-tronco de câncer de várias malignidades humanas, incluindo bexiga, mama, cervical, cólon, cabeça e pescoço, fígado, pulmão, pâncreas, próstata e ovário. O ensaio AldeRed emprega um substrato fluorescente e não tóxico de ALDH (AldeRed 588-A) que se difunde livremente em células intactas e viáveis, mas permanece preso dentro das células uma vez convertidas por ALDH no ácido correspondente. A quantidade de fluorescência produzida é proporcional à atividade de ALDH nas células e é medida por citometria de fluxo, permitindo a classificação de células ativadas por fluorescência (FACS). Este kit fornece o inibidor de ALDH dietilaminobenzaldeído (DEAB), que é usado em testes de controle negativo necessários para avaliação de fluorescência de fundo.
Aplicação
• Para excitação e emissão ideais de AldeRed 588-A, use uma combinação de laser azul (488 nm) ou laser verde (532 nm) com detector vermelho PE-Texas (615 nm). A detecção em canais de medição proximais (por exemplo, PE) também é possível, mas pode afetar o delta MFI (intensidade média de fluorescência) entre a amostra de teste e a amostra de controle tratada com DEAB.
• Todas as células vivas intactas (mesmo com baixa expressão de ALDH) tornam-se fluorescentes na exposição ao AldeRed 588-A. A geração de um controle tratado com DEAB é necessária para cada amostra de célula estabelecer a fluorescência basal.
• Manuseie todos os reagentes usando técnicas assépticas.
• Todas as células vivas intactas (mesmo com baixa expressão de ALDH) tornam-se fluorescentes na exposição ao AldeRed 588-A. A geração de um controle tratado com DEAB é necessária para cada amostra de célula estabelecer a fluorescência basal.
• Manuseie todos os reagentes usando técnicas assépticas.
Categoria de pesquisa
Pesquisa de células-tronco
Apoptose & Câncer
Pesquisa de células-tronco
Apoptose & Câncer
Componentes
1. Reagente AldeRed: (Nº do item CS216596). Um (1) frasco contendo 50 µg de reagente em pó AldeRed.
2. Reagente DEAB: (Nº do item CS216595). Um (1) frasco contendo 1 mL de reagente DEAB (Dietilaminobenzaldeído).
3. Ácido clorídrico (2N): (Nº do item CS216594). Um (1) frasco contendo 1,5 mL de ácido clorídrico 2 normal.
4. Dimetilsulfóxido: (Nº do item CS216593). Um (1) frasco contendo 1,5 mL de dimetilsulfóxido (DMSO).
5. Tampão de ensaio AldeRed: (Nº do item CS216592). Quatro (4) frascos contendo 25 mL de tampão de ensaio AldeRed cada.
6. Verapamil: (Nº do item CS220012). Quatro (4) frascos contendo 615 µg de pó de verapamil cada.
2. Reagente DEAB: (Nº do item CS216595). Um (1) frasco contendo 1 mL de reagente DEAB (Dietilaminobenzaldeído).
3. Ácido clorídrico (2N): (Nº do item CS216594). Um (1) frasco contendo 1,5 mL de ácido clorídrico 2 normal.
4. Dimetilsulfóxido: (Nº do item CS216593). Um (1) frasco contendo 1,5 mL de dimetilsulfóxido (DMSO).
5. Tampão de ensaio AldeRed: (Nº do item CS216592). Quatro (4) frascos contendo 25 mL de tampão de ensaio AldeRed cada.
6. Verapamil: (Nº do item CS220012). Quatro (4) frascos contendo 615 µg de pó de verapamil cada.
Qualidade
• Cada lote é testado pela medição da atividade de ALDH em células SK-BR-3 por citometria de fluxo.
• O reagente de AldeRed® é 95% puro (PMR)
• O reagente de AldeRed® é 95% puro (PMR)
Armazenamento e estabilidade
• Armazenar o kit a 2-8 °C.
• O reagente AldeRed reconstituído e ativado pode ser armazenado em alíquotas a -20°C protegidas da luz por até 1 ano. Não é recomendado congelar e descongelar repetidamente.
• O tampão de ensaio AldeRed suplementado com verapamil pode ser armazenado a 2-8°C em alíquotas por até 3 meses.
• O reagente AldeRed reconstituído e ativado pode ser armazenado em alíquotas a -20°C protegidas da luz por até 1 ano. Não é recomendado congelar e descongelar repetidamente.
• O tampão de ensaio AldeRed suplementado com verapamil pode ser armazenado a 2-8°C em alíquotas por até 3 meses.
Informações legais
ALDERED is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
Exoneração de responsabilidade
Exceto quando indicado em contrário no nosso catálogo ou em outros documentos da empresa que acompanham o(s) produto(s), os nossos produtos destinam-se somente para uso em pesquisa e não devem ser usados para qualquer outra finalidade, o que inclui, dentre outros, usos comerciais não autorizados, usos para diagnóstico in vitro, usos terapêuticos ex vivo ou in vivo, ou qualquer tipo de consumo ou aplicação em humanos ou animais.
Palavra indicadora
Danger
Frases de perigo
Declarações de precaução
Classificações de perigo
Acute Tox. 3 Oral - Aquatic Chronic 2 - Eye Irrit. 2 - Flam. Liq. 2 - Met. Corr. 1
Código de classe de armazenamento
3 - Flammable liquids
Classe de risco de água (WGK)
WGK 3
Ponto de fulgor (°F)
55.4 °F
Ponto de fulgor (°C)
13 °C
Certificados de análise (COA)
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Artigos
AldeRed™ 588-A is a red fluorescent live cell probe that detects ALDH activity used to identify cancer stem cells and progenitor cells in culture. Cancer stem cells (CSCs) are subpopulations of cancer cells that can self-renew, generate diverse cells in the tumor mass, and sustain tumorigenesis. Some researchers believe that cancer arises from cancer stem cells that originate as a result of mutational hits on normal stem cells.
Cancer stem cell media, spheroid plates and cancer stem cell markers to culture and characterize CSC populations.
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