PFHYS1008

Millicell^® HY frasco para cultura Multilayer

T-1000, 5 layer, 200-300 mL, sterile, vented cap, Tissue Culture (TC)-treated surface

• Sinônimo(s): Frasco multicamadas, cultura celular, cultura de tecidos, frasco para cultura celular
• Código UNSPSC: 41104923
• eCl@ss: 32011202
• NACRES: NB.22

Propriedades

• Materiais: high-density polyethylene cap; polystyrene flask
• Nível de qualidade: 200
• esterilidade: sterile; γ-irradiated
• Características: 5 layer
• embalagem: pack of 8
• fabricante/nome comercial: Millicell^®
• Parâmetros: 45 °C max. temp.
• técnica(s): cell culture | mammalian: suitable
• Altura: 51 mm , excluding cap; 74 mm , including cap
• Comprimento: 22.2 cm
• Largura: 12 cm
• área da superfície: 1000 cm²
• volume de trabalho: 200-300 mL
• tipo de ligação: Tissue Culture (TC)-treated surface
• Condições de expedição: ambient

Descrição

Nota de preparo

1. Para semear células, encha o frasco Millicell HY T-1000 com o meio de crescimento desejado.
2. Adicione o número desejado de células para atingir a densidade típica de semeadura.
3. Misture as células e o meio levantando a extremidade do frasco e pipetando a solução várias vezes para cima e para baixo até obter uma suspensão homogênea. Observação: Se as células não forem adequadamente misturadas em uma suspensão homogênea, poderá ocorrer uma distribuição desigual das células nas camadas do frasco Millicell HY.
4. Posicione brevemente o frasco de lado para equilibrar o volume de líquido igualmente entre as camadas do frasco.
5. Vire o frasco para dividir o volume de líquido para cada camada do frasco.
6. Coloque o frasco sobre uma superfície para espalhar a suspensão de células uniformemente por toda a superfície de cada camada.
7. Dependendo do volume, pode ser necessário balançar o frasco nas quatro direções para garantir que toda a superfície fique úmida. Observação: Se o volume de líquido em alguma das camadas mudar durante o procedimento de umectação (por exemplo, derramamento de líquido da camada superior para as camadas inferiores), repita as etapas de 4–6 para garantir a distribuição uniforme de líquido entre todas as camadas.
8. Retorne o frasco para uma posição vertical ao transportar para a incubadora. Coloque o frasco na posição horizontal na incubadora (como na etapa 6) e cultive as células em condições adequadas.
9. Se for necessário trocar o meio, aspire ou despeje o meio do frasco Millicell HY T-1000. Observação: Devido à maior área de superfície dos frascos Millicell, pode ser necessário deixar o frasco de lado por vários minutos após cada aspiração para que todo o líquido residual se acumule em um ponto comum, permitindo uma segunda aspiração para remover completamente o líquido restante.
10. Adicione o volume apropriado de meio novo e repita as etapas 4–8.
11. Para colher células, remova o meio como na etapa 9.
12. Adicione a quantidade desejada de solução de lavagem apropriada (por exemplo, PBS ou EDTA 0,02%) ao frasco e repita as etapas 4–7.
13. Remova a solução de lavagem como na etapa 9.
14. Adicione a quantidade desejada de enzima de dissociação (por exemplo, tripsina/EDTA 0,25% ou equivalente) de acordo com o protocolo de preferência, repita as etapas 4–8 e incube. O volume da enzima de dissociação exigido por cm² não precisa ser alterado a partir do protocolo do frasco-T. Observação: Certifique-se de que todas as células tenham sido completamente dissociadas da superfície do frasco por meio de observação ao microscópio. Não permitir a dissociação completa das células da superfície da cultura (de modo que todas as células estejam flutuando livremente) pode resultar em rendimentos celulares reduzidos.
15. Se estiver usando tripsina, adicione o volume desejado de solução de inativação, como meio contendo soro.
16. Colete as células por aspiração ou derramamento, como na etapa 9.

Informações legais

Millicell is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

Informações de segurança

• Código de classe de armazenamento: 10-13 - German Storage Class 10 to 13