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Sigma-Aldrich

Mistura-mestre KOD Hot Start

ready-to-use solution, Ready-to-use 2X mixture, containing KOD Hot Start DNA Polymerase, two monoclonal antibodies, ultrapure deoxynucleotides, and reaction buffer with MgSO4, optimized for convenient high fidelity PCR., suitable for PCR

Sinônimo(s):

High fidelity master mix, Hot start PCR, Hot start master mix

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About This Item

Código UNSPSC:
41105500
NACRES:
NA.55

Nível de qualidade

forma

ready-to-use solution

uso

sufficient for 100 reactions
sufficient for 500 reactions

Características

Difficult Templates/Specialty Enzymes PCR
High Fidelity PCR
dNTPs included
hotstart

fabricante/nome comercial

Novagen®

condição de armazenamento

OK to freeze

técnica(s)

PCR: suitable (2X PCR Master Mix for high fidelity)
PCR: suitable

entrada

purified DNA

Condições de expedição

dry ice

temperatura de armazenamento

−20°C

Descrição geral

A mistura-mestre KOD Hot Start é uma mistura 2X pronta para uso, otimizada para realização conveniente de PCR de alta fidelidade, que utiliza uma DNA polimerase com baixa taxa de erro e gera um alto grau de precisão na replicação do DNA de interesse. A mistura contém DNA polimerase KOD Hot Start, dois anticorpos monoclonais, desoxinucleotídeos ultrapuros e tampão de reação com MgSO4. Os anticorpos monoclonais inibem a DNA polimerase e as atividades da exonuclease 3′→5′ em temperaturas ambientes.
A mistura-mestre KOD Hot Start é uma mistura 2X pronta para uso, otimizada para realização conveniente de PCR de alta fidelidade, que utiliza uma DNA polimerase com baixa taxa de erro e gera um alto grau de precisão na replicação do DNA de interesse. Ela contém DNA polimerase KOD Hot Start, dois anticorpos monoclonais, dNTPs ultrapuros e tampão de reação com MgSO4. A mistura é ideal para uso em aplicações de PCR de alto rendimento.

Aplicação

A mistura-mestre KOD Hot Start foi usada:
  • Para gerar o produto de PCR para ensaio com T7 endonuclease I (T7EI).
  • Para amplificação por PCR do DNA isolado a partir de Chrysosporium multifidum, um fungo com atividade antimicrobiana.
  • Na amplificação de cDNA por PCR
  • Em PCR de duas etapas para a amplificação da sequência-alvo, seguida por sua inserção em um vetor.

Características e benefícios

  • Precisão, rendimento e processividade mais altos dentre as DNA polimerases de revisão comercialmente disponíveis
  • Amplifica moldes de DNA genômico de até 12 kbp
  • Amplifica moldes de DNA plasmidial e lambda de até 21 kbp
  • Elimina erros de priming e formação de dímeros de primers
  • Configuração para temperatura ambiente conveniente e compatível com automação
  • O tampão KOD HotStart® garante o desempenho ideal da PCR em uma ampla variedade de alvos.
  • Oferece alta especificidade, fidelidade e rendimento durante amplificação por PCR
  • Aprimorado para facilidade de uso e reprodutibilidade de dados
  • Simplifica a configuração da PCR e economiza tempo
  • Alta consistência com risco mínimo de contaminação

*Fabricado pela Toyobo e distribuído pela Merck KGaA, Darmstadt, Alemanha e/ou suas filiais (exceto no Japão).

Observação: A compra deste produto inclui imunidade contra processos judiciais relacionados às patentes especificadas no encarte do produto, para ser usado apenas na quantidade adquirida para fins de pesquisa interna do próprio comprador. Nenhum outro direito de patente (como o direito de patente do Processo da 5′ Nuclease) é expresso explicitamente, por implicação ou preclusão. Mais informações sobre a compra de licenças podem ser obtidas junto ao Diretor de licenças (Director of Licensing), Applied Biosystems, 850 Lincoln Centre Drive, Foster City, Califórnia 94404, EUA.

Componentes

  • 2 × 1,25 ml ou 10 × 1,25 ml de mistura-mestre KOD Hot Start

Referências:
Kitabayashi, M., et al. 2002. Biosci. Biotechnol. Biochem.66 (10), 2194. Fujii, S., et al. 1999. J. Mol.

Advertência

Toxicidade: Manuseio padrão (A)

Definição da unidade

Uma unidade é definida como a quantidade de enzima necessária para catalisar a incorporação de 10 nmol de dNTP na forma insolúvel ácida, em 30 min a 75 °C, em uma reação contendo 20 mM de Tris-HCl (pH 7,5 a 25 °C), 8 mM de MgCl₂, 7,5 mM de DTT, 50 µg/ml de BSA, 150 µM de cada um dos seguintes: dATP, dCTP, dGTP, dTTP (uma mistura de dTTP não rotulado e [3H]dTTP), e 150 µg/ml de DNA de timo de bezerro ativado.

Outras notas

Basta adicionar a mistura-mestre KOD Hot Start® a um volume idêntico de amostra contendo o molde de DNA e os primers. A reação diluída final contém 1 U de DNA polimerase KOD Hot Start® por 50 μl de reação. O menor tamanho disponível fornece mistura-mestre suficiente para 100 (escala de 50 μl) ou 250 (escala de 20 μl) reações, enquanto o tamanho maior é adequado para 500 (escala de 50 μl) ou 1250 (escala 20 μl) reações.

Informações legais

*Fabricado pela Toyobo e distribuído pela Merck KGaA, Darmstadt, Alemanha e/ou suas filiais (exceto no Japão). Observação: A compra deste produto inclui imunidade contra processos judiciais relacionados às patentes especificadas no encarte do produto, para ser usado apenas na quantidade adquirida para fins de pesquisa interna do próprio comprador. Nenhum outro direito de patente (como o direito de patente do Processo da 5′ Nuclease) é expresso explicitamente, por implicação ou preclusão. Mais informações sobre a compra de licenças podem ser obtidas junto ao Diretor de licenças (Director of Licensing), Applied Biosystems, 850 Lincoln Centre Drive, Foster City, Califórnia 94404, EUA.
HOTSTART is a registered trademark of Molecular BioProducts, Inc.
NOVAGEN is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

Código de classe de armazenamento

12 - Non Combustible Liquids

Classe de risco de água (WGK)

WGK 1

Ponto de fulgor (°F)

Not applicable

Ponto de fulgor (°C)

Not applicable


Certificados de análise (COA)

Busque Certificados de análise (COA) digitando o Número do Lote do produto. Os números de lote e remessa podem ser encontrados no rótulo de um produto após a palavra “Lot” ou “Batch”.

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Artigos

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The purpose of Hot Start PCR is to inhibit the PCR reaction in order to reduce nonspecific amplification, prevent the formation of primer dimers, and increase product yields.

Nossa equipe de cientistas tem experiência em todas as áreas de pesquisa, incluindo Life Sciences, ciência de materiais, síntese química, cromatografia, química analítica e muitas outras.

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