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Magna MeRIP m6A Kit - Perfil de N6-Metiladenosina em todo o transcriptoma

• Sinônimo(s): Kit Magna MeRIP m6A, Kit de perfilamento m6A
• Código UNSPSC: 41105331
• NACRES: NA.84

Propriedades

• Nível de qualidade: 300

Descrição

Descrição geral

A N6-metiladenosina (m6A) representa uma modificação abundante do RNA que é conservada em muitas espécies diferentes, desde as plantas, às leveduras e aos mamíferos. À semelhança da modificação do DNA pela 5-metilcitosina (5-mc), a m6A é uma modificação química reversível do RNA. As modificações do RNA pela m6A são um tema emergente no controle das transições do destino celular em células estaminais embrionárias de mamíferos. A m6A é uma das modificações mais prevalecentes nos RNAm e nos RNA não codificantes em eucariotas, estimando-se que existam 12.000 locais de m6A em mais de 7.000 genes. A marca é depositada por um heterodímero de metiltransferase 3 e 14 (Mettl3 e Mettl14) e pode ser removida pelas enzimas desmetilase do RNA FTO e ALKBH5. O gene de risco para a obesidade FTO codifica a primeira desmetilase m6A identificada. As mutações no FTO têm sido associadas a um risco acrescido de obesidade e diabetes tipo II. Recentemente, o comprometimento do status da regulação m6A levou à expressão prolongada de Nanog em células ES e à incapacidade de sair dos estágios de autorrenovação em direção à diferenciação.

A imunoprecipitação do RNA metilado (m6A) (MeRIP) é um método para monitorizar o estado do m6A e mapear a localização das modificações do RNA m6A em todo o transcriptoma. O Magna MeRIP M6A Kit utiliza o método MeRIP para permitir a identificação e o perfil de todo o transcriptoma das modificações do RNA m6A. No ensaio MeRIP, o RNA é quimicamente fragmentado em 100 nucleótidos ou fragmentos mais pequenos, seguido de imunoprecipitação magnética com um anticorpo monoclonal contra m6A. Após a imunoprecipitação, os fragmentos de RNA isolados podem ser submetidos a qRT-PCR ou sequenciação de RNA (MeRIP-seq). O protocolo simplificado é fácil de processar e pode produzir resultados com rácios SN elevados.

Aplicação

O Magna MeRIP m6A Kit simplifica o método MeRIP (Imunoprecipitação de RNA metilado) para permitir a identificação e a caraterização de todo o transcriptoma dos locais de metilação do RNA m6A (N6-metiladenosina). Adequado para MeRIP-Seq e qRT-PCR de transcrições de RNA metilado.

Componentes

Tampão de fragmentação de RNA 10X (0,5 ml); EDTA 0,5 M (0. 5 ml); Tampão IP 5X (15 ml); Mistura de esferas magnéticas A/G (315 μl); Anti-N6-metiladenosina (m6A), clone 17-3-4-1 (100 μg); Inibidor de RNase (90 μl); N6-Metiladenosina, sal sódico de 5′-monofosfato (m6A) (10 mg); IgG normal de camundongo (125 μg); Primers MeRIP EEF1A1 humanos positivos (75 μl); Primers MeRIP EEF1A1 humanos negativos (75 μl)

Exoneração de responsabilidade

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Informações de segurança

• Pictogramas: GHS07
• Palavra indicadora: Warning
• Frases de perigo: H315,H319,H412
• Declarações de precaução: P264 - P273 - P280 - P302 + P352 - P305 + P351 + P338 - P332 + P313
• Classificações de perigo: Aquatic Chronic 3 - Eye Irrit. 2 - Skin Irrit. 2
• Código de classe de armazenamento: 10 - Combustible liquids