FSUPMMRO

FastStart Universal Probe Master (Rox)

sufficient for 250 reactions, sufficient for 1250 reactions, sufficient for 5000 reactions, suitable for qPCR, suitable for RT-qPCR

• Código UNSPSC: 41106300
• NACRES: NA.55

Propriedades

• uso: sufficient for 1250 reactions; sufficient for 250 reactions; sufficient for 5000 reactions
• Nível de qualidade: 100
• Características: dNTPs included: no; hotstart
• fabricante/nome comercial: Roche
• embalagem: pkg of 1250 x 20 μL reactions (04913957001); pkg of 250 x 20 μL reactions (04913949001); pkg of 5000 x 20 μL reactions (04914058001)
• técnica(s): RT-qPCR: suitable; qPCR: suitable
• entrada: purified DNA
• método de detecção: probe-based

Descrição

Descrição geral

Demonstrou-se que os protocolos hot start melhoram significativamente a especificidade, a sensibilidade e o rendimento da PCR. Grupos bloqueadores termoinstáveis em alguns resíduos de aminoácidos da Taq DNA polimerase FastStart^™ tornam a enzima modificada inativa em temperatura ambiente. Portanto, não há alongamento durante o período quando os primers podem se ligar de maneira inespecífica. A Taq DNA polimerase FastStart^™ é ativada por meio da remoção dos grupos bloqueadores em uma temperatura alta (ou seja, uma etapa de pré-incubação a +95 °C).

Mistura de reação hot start pronta para uso universal para qPCR e RT-qPCR em todos os sistemas de PCR em tempo real que requerem normalização com ROX.

A FastStart^™ Universal Probe Master (Rox) inclui um novo corante de referência que permite seu uso em todos os instrumentos de PCR em tempo real que requerem normalização com ROX, sem modificação ou ajustes ao instrumento ou protocolo específico. Esta mistura-mestre 2x concentrada, pronta para uso, contém todos os reagentes (exceto primers, sonda e molde) necessários para a realização de ensaios de detecção de DNA quantitativos, em tempo real, inclusive qPCR e qRT-PCR em duas etapas, no formato de detecção de sonda por hidrólise. A FastStart^™ Universal Probe Master (Rox) gera resultados excelentes em instrumentos como o sistema de PCR rápido em tempo real da Applied Biosystems 7900 HT ou o sistema de PCR em tempo real da Applied Biosystems 7500. Este produto não é destinado ao uso com os Instrumentos LightCycler^®.

Aplicação

A FastStart^™ Universal Probe Master (Rox) foi usada:

• em reações em cadeia da polimerase quantitativas em tempo real (qRT-PCR) TaqMan^® para a quantificação de miRNAs endógenos, como MIR376B, MIR376A e MIR181A.
• na transcriptase reversa (RT-PCR) para estudo da expressão do fator de necrose tumoral (TNF) em tecido sinovial inteiro de pacientes com artrite inflamatória periférica indiferenciada (AIPI)
• para a amplificação e detecção de qualquer alvo de DNA ou cDNA, inclusive aqueles com alto teor de GC ou AT por PCR quantitativa.

Combine esta mistura-mestre com o kit de síntese de cDNA Transcriptor First Strand (Roche) para obter excelentes resultados em qRT-PCR de duas etapas.

Características e benefícios

• Aumente a sensibilidade e a especificidade do qPCR.

Produz valores limiares de ciclo (Ct) menores.

• Use a mistura-mestre com qualquer ensaio à base de sonda.

Obtenha resultados específicos e sensíveis em ensaios com as sondas da Universal ProbeLibrary ou qualquer outra sonda de hidrólise.

• Amplifique e detecte uma ampla gama de alvos de DNA e cDNA.

Amplifique fragmentos com até 500 pb de comprimento, inclusive aqueles com alto teor de GC ou AT.

• Visualize produtos de amplificação em géis de agarose.

• Use estações de pipetagem robóticas para montar reações de qPCR.

Use uma mistura-mestre que é estável em temperatura ambiente durante períodos de montagem de reações prolongados.

• Evite falsos positivos resultantes de contaminação por transferência.

Use esta mistura contendo dUTP com uracil-DNA glicosilase para eliminar o DNA contaminante transferido de reações de PCR anteriores.

Componentes

Mistura-mestre 2x concentrada FastStart Universal Probe Master (Rox), que contém a Taq DNA polimerase FastStart, tampão de reação, nucleotídeos (dATP, dCTP, dGTP, dUTP) e um corante de referência.

Qualidade

Teste de função: Todos os lotes são testados quanto ao seu desempenho em qPCR usando três moldes: um com alto teor de GC, um com alto teor de AT e um molde longo (cerca de 440 pb).

Outras notas

Somente para fins de pesquisas biológicas. Não é destinado ao uso em procedimentos diagnósticos

Informações legais

FastStart is a trademark of Roche

LightCycler is a registered trademark of Roche

TaqMan is a registered trademark of Roche Molecular Systems, Inc.

Informações de segurança

• Código de classe de armazenamento: 12 - Non Combustible Liquids
• Classe de risco de água (WGK): WGK 1
• Ponto de fulgor (°F): does not flash
• Ponto de fulgor (°C): does not flash