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Terpenos em Cannabis: perfil e importância

Determinação por GC-MS do perfil de terpenos em plantas do gênero Cannabis para determinação da pureza, qualidade e identidade das cepas de Cannabis e que, ao mesmo tempo, atende aos requisitos legais e regulatórios.

A determinação do perfil de terpenos é fundamental para demonstrar a identidade e a eficácia medicinal de cultivares ou cepas da Cannabis. Os terpenos são os principais componentes orgânicos das resinas e óleos essenciais de Cannabis, com odor característico e propriedades organolépticas características. Formados por combinações voláteis e semivoláteis de subunidades de isopreno C5, acredita-se que os terpenos potencializem de forma sinérgica os efeitos terapêuticos dos canabinoides pelo “efeito entourage”. Como o tipo e as quantidades de terpenos diferem entre as linhagens genéticas de cannabis, como a Cannabis sativa, Cannabis indica e a Cannabis ruderalis, existe a necessidade de métodos e padrões analíticos robustos para a identificação de cultivares e para a validação científica de suas propriedades medicinais e farmacológicas.


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REQUISITOS LEGAIS E REGULATÓRIOS PARA TESTES DE TERPENOS EM CANNABIS

O aumento do uso recreativo ou medicinal de Cannabis requer regulamentos rígidos para práticas de fabricação e padrões de qualidade derivados de materiais originários de Cannabis. Para abordar preocupações sobre a eficácia terapêutica, segurança e qualidade dos produtos de Cannabis, devem ser realizados testes de controle de qualidade de Cannabis para terpenos em todas as regiões geográficas, inclusive nos Estados Unidos e Canadá, onde o cenário de legalização está se modificando rapidamente.

FLUXO DE TRABALHO PARA DETERMINAÇÃO DO PERFIL DE TERPENOS EM CANNABIS

O fluxo de trabalho típico para a análise de terpenos em Cannabis, maconha e seus produtos inclui o preparo de amostras por extração com solvente ou microextração em fase sólida em headspace, preparo de padrões e calibração, separação por cromatografia gasosa, seguida de detecção por espectrometria de massa e análise dos dados do perfil de terpenos.

PREPARO DE AMOSTRAS DE TERPENOS DE CANNABIS POR EXTRAÇÃO OU SPME DE HEADSPACE

Atualmente, os laboratórios de teste usam principalmente uma das duas técnicas a seguir para o preparo de amostras na análise de terpenos em Cannabis: extração simplificada com solvente ou microextração em fase sólida em headspace (HS-SPME). O preparo de amostras geralmente antecede uma análise por GC-FID ou GC-MS.

A técnica de HS-SPME oferece os seguintes benefícios:

  • garantia que os componentes não voláteis da matriz não sejam extraídos concomitantemente
  • geração de resultados com maior sensibilidade
  • determinação simultânea de terpenos de Cannabis e solventes residuais, permanecendo após seu uso na extração com alcoóis e hidrocarbonetos
  • eliminação da necessidade de instrumentação especial
  • preparo de amostras favorável baseado em autoamostrador ou manual

A extração com solvente também não requer instrumentos especiais e é uma alternativa conveniente quando as interferências da matriz não são críticas.

PADRÕES DE CALIBRAÇÃO PARA QUANTIFICAÇÃO DE TERPENOS EM CANNABIS

A determinação do perfil e quantificação de terpenos em produtos de Cannabis requer o uso de padrões de referência autênticos e precisos. Devido às propriedades isoméricas de muitos terpenos, as referências que caracterizam o isômero ou enantiômero podem ser importantes para a identificação e quantificação. Materiais de referência certificados (CRMs), fabricados de acordo com a ISO17034, proporcionam precisão na concentração, com incerteza e rastreabilidade, além de serem recomendados para uma quantificação precisa. Em geral, os CRMs são diluídos em padrões de trabalho e curvas de calibração no intervalo de referência para a análise da amostra.

ANÁLISE DE TERPENOS POR GC-MS EM CANNABIS

Métodos baseados em GC-MS e GC-FID estão na vanguarda da determinação do perfil e quantificação de terpenos nos testes de terpenos em Cannabis, com excelente resposta à ionização sob fontes de ionização de elétrons (IE).

A GC-MS é uma técnica eficiente e robusta para investigar os produtos de Cannabis quanto à presença de terpenos, pois proporciona resolução cromatográfica, identificação e quantificação. Colunas de GC quirais podem melhorar a identificação superando os desafios impostos por isômeros e pelas diferenças no caráter aromático dos terpenos. As técnicas de GC x GC são adequadas para a determinação do perfil de terpenos em matrizes complexas de Cannabis, com indexação dos tempos de retenção para maior precisão.

O uso de padrões, reagentes e consumíveis cromatográficos de alta qualidade é um pré-requisito para testes e detecção precisos e confiáveis de terpenos nas plantações de Cannabis e produtos derivados dessa planta. A escolha certa de CRMs, padrões de referência analíticos, solventes de alta pureza, bem como das colunas, fundamenta o desenvolvimento e a validação de métodos, a calibração de instrumentos, controle de qualidade e verificação de adequação do sistema.





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