Determinação do perfil de canabinoides e testes de potência de Cannabis e produtos de Cannabis

Tipos de canabinoides

Os canabinoides são um grupo de compostos terpenofenólicos C21, encontrados principalmente em Cannabis indica, Cannabis sativa e Cannabis ruderalis. Eles interagem com os receptores canabinoides no organismo para produzir efeitos psicoativos e não psicoativos. Os canabinoides podem ser divididos em 11 subclasses: canabigerol (tipo CBG), (–)-Δ9-tetra-hidrocanabinol (tipo Δ9-THC), canabidiol (tipo CBD), canabicromeno (tipo CBC), canabinol (tipo CBN), (–)-Δ8-tetra-hidrocanabinol (tipo Δ8-THC), canabiciclol (tipo CBL), canabinodiol (tipo CBND), canabielsoína (tipo CBE), canabitriol (tipo CBT) e outras. Foram desenvolvidos cultivares de plantas Cannabis para otimizar a produção de THC ou CBD. Os efeitos farmacológicos da maioria dos outros canabinoides não foram bem estudados, mas estão atraindo cada vez mais interesse.

Fluxo de trabalho da análise de canabinoides

Cannabis é um produto desafiador de se analisar, pois contém diversos canabinoides e terpenos e está disponível em várias formas, como flores e concentrados, alimentos e produtos cosméticos com diferentes concentrações de diferentes canabinoides. Um fluxo de trabalho típico para a análise de canabinoides envolve:

• preparo de amostras por extração, método QuEChERS (do inglês, quick, easy, cheap, effective, rugged, and safe [rápido, fácil, barato, eficaz, robusto e seguro]) ou SPE (extração em fase sólida)
• calibração usando padrões de referência de alta qualidade
• separação cromatográfica e análise por métodos de LC ou GC

Preparo de amostras de Cannabis

As amostras de Cannabis são extremamente diversas, variando de flores secas, extratos de Cannabis, cosméticos e muitos tipos de comestíveis. A planta de Cannabis em si é uma matriz complexa com diversos terpenos, canabinoides, lipídios, clorofila e outros componentes. Extração à base de solvente, QuEChERS, e SPE são métodos comuns de extração e limpeza usados no preparo de amostras de produtos de Cannabis.

Padrões e calibração

A quantificação precisa de canabinoides requer o uso de calibradores precisos. Padrões puros para canabinoides muitas vezes são resinosos, viscosos, sensíveis ao ar e difíceis de manusear. Portanto, frequentemente são fornecidos na forma de solução, individualmente ou como misturas. Os padrões para canabinoides são frequentemente fornecidos na forma de solução, individualmente ou como misturas. Materiais de referência certificados (CRMs) fabricados de acordo com a ISO17034, com certificação da precisão, incerteza da medição e rastreabilidade, são exigidos por vários reguladores estaduais e por laboratórios de teste com certificação ISO17025. Os padrões de adequação do sistema garantem controle de métodos e resolução de canabinoides cuja eluição ocorre quase simultaneamente. Isso é especialmente relevante para a análise de produtos de maconha em que a quantidade de THC total (THC e THCA) permitida é limitada por regulamentos.

Análise de canabinoides por HPLC

HPLC associada à detecção por UV ou MS é a principal técnica usada para análise de potência de Cannabis e maconha comerciais. Colunas C18 e C8 superficialmente porosas/Fused Core^® propiciam separações de alta resolução e rápidas de canabinoides em menos de 10 minutos. As colunas monolíticas proporcionam robustez para aplicações de alto rendimento. Métodos econômicos incluem o uso de metanol como fase móvel orgânica. A detecção por UV é econômica e prática para a análises de canabinoides de alto rendimento. A detecção por MS diferencia os canabinoides com base em sua proporção de massa em relação à carga (m/z) para proporcionar especificidade e seletividade para determinação do perfil, caracterização e quantificação. Os métodos de MS requerem a inserção de padrões internos marcados com isótopos para a análise quantitativa.

Análise de canabinoides por GC

A cromatografia gasosa (GC) aliada a um detector por ionização por chama (FID) ou um espectrômetro de massa (MS) também é utilizada nos testes de Cannabis. Ela usa tempos de corrida de 20 minutos em fases estacionárias de baixa polaridade, como as fases estacionárias com 5% de difenil/95% de dimetilpolissiloxano. As altas temperaturas usadas em GC causam a descarboxilação dos canabinoides ácidos (THCA e CBDA). O teor de canabinoides relatado para um analito é a soma de suas respectivas espécies ácidas e neutras. É necessária a derivatização para analisar separadamente os canabinoides ácidos e neutros por GC.

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