Description générale
La solution de collagène est préparée en dissolvant les molécules de collagène dans une solution aqueuse. Chez l'homme, le collagène de type Iα1 (COL1A1) est codé par un gène situé sur le chromosome 17q21.33. C'est la protéine de matrice extracellulaire la plus abondante chez l'homme. Le collagène de type 1 est la principale protéine de structure des os, des tendons, de la peau et de la cornée. La protéine codée est un hétérotrimère constitué de deux chaînes α1 et d'une chaîne α2.Le collagène de type I se distingue des autres types de collagène de par son faible niveau d'hydroxylation de la lysine et sa composition pauvre en glucides. En tant qu'hétérodimère composé de deux chaînes a1 et d'une chaîne a2, il forme spontanément une structure de triple hélice à pH neutre et à 37 °C.
Application
Cette solution de collagène de peau de bovin a été utilisée :
- dans la préparation de gels de collagène.
- pour enduire des boîtes de culture cellulaire en vue de la culture de lignées de cellules HeLa.
- pour construire des hydrogels chargés destinés à la culture de cellules HepG2.
Cette solution hautement purifiée est adaptée pour la formation de matrices 3D en culture cellulaire. Les gels de collagène tridimensionnels imitent mieux la physiologie des cellules in vivo que les systèmes bidimensionnels conventionnels ; ils ont donné de bons résultats avec plusieurs types de cellules, y compris les fibroblastes cardiaques et cornéens, les cellules étoilées du foie et les cellules de neuroblastome. Ces gels tridimensionnels sont également utiles dans les études de la mécanotransduction, processus de signalisation cellulaire impliquant la transformation des signaux mécaniques en signaux biochimiques.
Actions biochimiques/physiologiques
Cette solution de collagène de peau de bovin est une solution hautement purifiée qui peut être utilisée pour former des matrices 3D en culture cellulaire. Les gels de collagène tridimensionnels imitent mieux la physiologie des cellules in vivo que les systèmes bidimensionnels conventionnels ; ils ont donné de bons résultats avec plusieurs types de cellules, y compris les fibroblastes cardiaques et cornéens, les cellules étoilées du foie et les cellules de neuroblastome. Ces gels tridimensionnels sont également utiles dans les études de la mécanotransduction, processus de signalisation cellulaire impliquant la transformation des signaux mécaniques en signaux biochimiques. Le collagène de type I (COL1A1) participe à la fibrose. COL1A1 est un important composant de la matrice du tissu conjonctif. Il joue un rôle essentiel dans la croissance et la maintenance des organes et l'intégrité des tissus. Cette protéine participe également aux processus de réparation tissulaire.
Dans des environnements tridimensionnels, les prolongements des cellules peuvent utiliser les intégrines sur les surfaces cellulaires pour activer des voies de signalisation spécifiques ; des interactions mécaniques indépendantes des intégrines résultant de l′enchevêtrement des fibrilles de la matrice sont également possibles.
Composants
Le collagène de type I se distingue d′autres types de collagène de par son faible niveau d′hydroxylation de la lysine et sa composition pauvre en glucides. En tant qu′hétérodimère composé de deux chaînes a1 et d′une chaîne a2, il forme spontanément une structure de triple hélice à pH neutre et à 37 °C.
Attention
Ce produit est expédié sur glace ; dans les conditions de stockage recommandées (entre 2 et 8 °C), ce produit est stable pendant 2 ans.
Notes préparatoires
Ce produit est préparé à partir de collagène de type I purifié et extrait de la peau de bovins ; il contient une forte proportion de monomères. Le collagène brut utilisé pour préparer ce produit a été isolé à partir d'un troupeau fermé et a été purifié selon un processus de fabrication respectant les BPF, qui inclut l'inactivation de toute contamination éventuelle par des virus ou des prions. Il est fourni à 3 mg/ml dans une solution aqueuse d'HCl à 0,01 M, pH 2,0. Le collagène se dénature lorsqu'il est exposé à des températures élevées ou aux rayonnements. Avant d'ajuster le pH, conserver les solutions mères ou diluées dans un réfrigérateur. Une fois le pH ajusté à 7, les solutions ne peuvent pas dépasser 40 °C et ne peuvent pas être congelées.
Autres remarques
Le collagène comprend un certain nombre de types distincts du point de vue structurel et génétique. Nous utilisons la nomenclature proposée par Bornstein et Traub. Il est important de ne pas confondre les désignations utilisées par Sigma et les types de classification reconnus.